钙磷镁测定
三、微量元素与疾病
(一)微量元素对各种生命活动的影响
1. 促进机体生长发育 2. 对神经系统结构和功能的影响 3. 内分泌的影响、 45测.. 复免对合疫心物系血的统 管活的 疾性影 病响 的影响 6免. 疫对化肿学瘤法发生、发展和治疗 7. 对胚胎及胎儿发育的影响
(三)微量元素的生物学作用及代谢
草酸、植酸抑制 Ca:P=2:1时,吸收最好
肠道:食物中未吸收及肠道分泌钙 肾脏:点总排钙量的20%
(三)钙、磷代谢的调节 促进肾脏对Ca、P重吸收
甲状旁腺素: 促进破骨细胞生成,促进骨盐溶解 促进钙、磷重吸收
Ca2+上升
抑制肾脏对钙、磷的重吸收 降钙素: 促进骨盐沉积
抑制Ca、P吸收
降低Ca2+
中基态镁原子蒸汽吸收--------吸收量 与镁浓度成正比
2. 甲基麝香草酚蓝法 碱性溶液中与镁螯合------蓝紫色化合物
3. Calmagite比色法 碱性下,镁与Calmagite染料生成紫红色化合物
4. 达旦黄比色法
碱性下-----Mg2+-----Mg(OH)2胶体--------与达旦黄生成橘红色复合物
1. 铁: 吸收:
贮量少时---------吸收多 酸性---------------吸收多 Fe2+比Fe3+ -----吸收多
代谢:Fe2+------Fe3+ -----运铁蛋白---合成血红素
功能:合成血红素----血红蛋白、肌红蛋白、细 胞色素、过氧化物酶、过氧化氢酶
2. 锌
分布:
肌肉:62.2% 骨: 28.5%
二、尿液中钙镁磷的测定 先将尿液酸化,溶解尿中盐
三、铁、铜、锌测定
(一)铁测定 1. 血清铁
酸性---Fe3+与运铁蛋白分离----还原剂---Fe2+-----络合显色剂-------比色测定
2. 总铁结合力 加过量Fe----使运铁蛋白饱和----除去多余Fe2+------上清-----测Fe
骨:99%
可扩散钙:影响代谢、功能
体液、组织:1%
非扩散钙:与血浆蛋白结合
血钙受H+影响:
pH升高-----------结合钙增加--------Ca2+减少
[H+] Ca2+ =K--------
[HCO3-]
2.VD3 年龄 溶解状态:乳糖、乳酸、氨基
6 紫外分光光度法 色氨酸、酪氨酸 在280nm有吸收峰 保持蛋白活性
7 折光测定法
溶于溶液中的固体可增加它的光折射 率 固定波长、固定温度下,光折射率与蛋 白浓度成正比
第十二章 钙磷镁和微量元素检验
目标:
1. 钙、磷、镁代谢情况及功能 2. 微量元素的功能 3. 它们的测定方法
钙磷占第五、六位 镁占第十一位
微量元素有重要的生物作用和临床意义
第一节 概述 一、钙、磷代谢和调节 二、镁代谢和生理功能 三、微量元素与疾病
一、钙、磷代谢和调节 (一)钙代谢:
1. 钙的含量、分布和血钙
(1)参与核酸、核苷酸、磷脂、磷蛋白的分子组成 (2)参与高能磷酸化合物生成 (3)共价修饰调节 (4)HPO42/H2PO4是缓冲体系
二、镁代谢和生理功能
(一)镁的代谢
骨:60% 骨骼肌:20-30% 其它组织:10%
Mg2+ 血浆中: Mg-血浆蛋白复合物
重碳酸、柠檬酸、磷酸盐
(二)镁的生理功能 1. 酶的辅助因子:约300种酶需Mg2+ 2. 对神经肌肉兴奋性有降低作用
(一)钙测定
1. 离子钙的测定: 离子选择电极法
(二)总钙测定
1. 邻甲酚酞络合酮比色法:
2. 甲基麝香草酚蓝法 碱性溶液中与钙螯合-------淡绿变蓝
3. 原子吸收分光光度法 高温--------Ca2+------气态钙离子----吸
收422.7nm光谱
4. EDTA络合滴定法
碱性下-------Ca2+与钙红结合-----淡红色 EDTA滴入-----夺取Ca2+------钙红重新游 离------变蓝色
O
NH2-CH-C +
H OH
甘氨酸
O NH-CH-C
H H OH
甘氨酸
-HOH
OO NH2-CH-C-N-CH-C
H HH OH
肽键
甘氨酰甘氨酸
(二)铜测定
1. 原子吸收分光光度法
2. 血清铜比色法
稀酸—Cu2+与蛋白分离---除蛋白----上 清与二乙基二醇代氨基甲酸钠---金黄 色化合物
功能:1. 与酶的合成与活性有关 2. 与免疫功能有关
3. 铜 吸收:肠粘膜-------合成铜蓝蛋白 排出:胆道---------肠道
功能:1. 参与许多酶的组成 2. 促进Fe3+---------Fe2+,促进铁吸收
4. 硒: 肠道吸收--------尿汗排出 多种酶的组成成分。如谷胱苷肽过氧化物酶 抗氧化作用
(二)血清磷的测定
1. 磷钼酸还原法 2. 磷酸盐与钼酸--------无色磷钼酸----3. 加还原剂-----------蓝色复合杂聚物钼蓝
2. 磷钼酸非还原法 酸性溶液中磷酸+钼酸铵---磷钼酸铵杂聚化合物
3. 酶法
(三)血清镁的测定
1. 原子吸收分光光度法: 2. 镁灯---激发---285.2nm光谱------标本
(三)锌测定
酪氨酸残基和色氨酸残基与酚试剂的 磷钨酸、磷钼酸------蓝色化合物
加上Cu2+,结合双缩脲法,提高灵敏度
适于测单一蛋白,且适用于蛋白含量较 少的样品
4 比浊法 酸性试剂+蛋白质--------沉淀
5 染料结合法 酸性条件下,蛋白质------NH3+酪,与 染料中阴离子产生颜色反应。 氨基黑、考马斯亮兰
5.铬
葡萄糖耐量因子------使胰岛素与受体 形成-S-S-键
6. 锰 参与多种酶的组成(精氨酸酶、丙酮酸 羟化酶、过氧化物岐化酶等)
8. 钼
黄嘌呤氧化酶、醛氧化酶、亚硫酸氧 化酶 9. 氟 骨牙中。对骨牙形成有重要作用
10. 碘 甲状腺素T3、T4合成
第二节 钙、磷、镁和微量元素测定 一、血清钙、磷、镁的测定
促进肾脏对钙、磷的重吸收 促进溶骨作用 VD3 促进肠道Ca、P吸收
升高Ca2+
(四)钙、磷的生理功能
1. 钙的作用:
(1)凝血因子之一 (2)增强心肌收缩、降低神经肌肉兴奋性 (3)降低毛细血管通透性,减少渗出 (4)做为酶的激活剂、抑制剂 (5)激素的“第二信使”,参与代谢调节
2. 磷的作用