邻二氮菲分光光度法测定微量铁
一、实验原理
邻二氮菲（1，10—二氮杂菲），也称邻菲罗啉是测定微量铁的一个很好的显色剂。

在pH2—9范围内（一般控制在5—6间）Fe2+与试剂生成稳定的橙红色配合物Fe（Phen）32+lgK=，在510nm下，其摩尔吸光系数为, ）Fe3+与邻二氮菲作用生成兰色配合物，稳定性较差，因此在实际应用中常加入还原剂盐酸羟胺使Fe2+还原为Fe3+：
2 Fe3++2NH2OHHCl=2 Fe2++N2+4H++2H2O+2Cl-
二、试剂与仪器
仪器：
1．721型分光光度计
2．50mL容量瓶8个,100mL1个,500mL1个
3．移液管：2 mL1支，10 mL1支
4．刻度吸管：10mL、5mL、1mL各1支
试剂：
1．铁标准储备溶液100ug/mL：1000 mL（准确称取铁盐NH4Fe（SO4）212H2O置于烧杯中，加入3moL/LHCI20mL和30ml水，然后加水稀释至刻度，摇匀。

)
2．铁标准使用液10ug/mL：用移液管移取上述铁标准储备液 mL，置于100 mL容量瓶中，加入3moL/和少量水，然后加水稀释至刻度，摇匀。

3．HCI3moL/L：100mL
4．盐酸羟胺100g/L（新鲜配制）：100mL
5．邻二氮菲溶液L（新鲜配制）：200mL
6．HAc—NaAc缓冲溶液（pH=5）500 mL：称取136gNaAc，加水使之溶解，再加入120 mL 冰醋酸，加水稀释至500 mL
7．水样配制（mL）：取2mL100ug/mL铁标准储备溶液加水稀释至500mL
三、实验步骤
1.配置mL的铁标准溶液。

1．绘制吸收曲线：用吸量管吸取铁标准溶液（10ug/mL）、、、、、分别放入50 mL容量瓶中，加入1 mL10%盐酸羟胺溶液、 L邻二氮菲溶液和5 mL HAc—NaAc缓冲溶液，加水稀释至刻度，充分摇匀，放置5分钟，用3cm比色皿，以试剂溶液为参比液，于721型分光光度计中，在440—560nm波长范围内分别测定其吸光度A值。

当临近最大吸收波长附近时应间隔波长5—10nm测A值，其他各处可间隔波长20—40nm测定。

然后以波长为横坐标，所测A值为纵坐标，绘制吸收曲线，并找出最大吸收峰的波长。

2．标准曲线的绘制：用吸量管分别移取铁标准溶液（10ug/mL）、、、、、、 mL依次放入7只50mL 容量瓶中，分别加入10%盐酸羟胺溶液1 mL，稍摇动，再加入%邻二氮菲溶液 mL及5 mL HAc —NaAc缓冲溶液，加水稀释至刻度，充分摇匀，放置5分钟，用3cm比色皿，以不加铁标准溶液的试液为参比液，选择最大测定波长为测定波长，依次测A值。

以铁的质量浓度为横坐标，A值为纵坐标，绘制标准曲线。

3．水样分析：分别加入（或，铁含量以在标准曲线范围内为宜）未知试样溶液，按实验步骤2的方法显色后，在最大测定波长处，用3cm比色皿，以不加铁标准溶液的试液为参比液，平行测A值。

求其平均值，在标准曲线上查出铁的质量，计算水样中铁的质量浓度。

四、数据记录与结果计算
3计算公式
样品中铁含量的计算
Cx=C所读取的数值×（mol/L）
五、实验结论与总结
1、对测定产品项目质量作结论，根据实验结果作出判断（用数据说话）
2、实验总结：总结本次试验成功的方面，失误的操作，总结实验误差。

3、总结最佳实验条件。