华南师范大学实验报告
学生姓名何茂辉学号20062501302
专业生物科学年级、班级06科三
课程名称细胞生物学实验实验项目
实验类型□验证□设计□综合实验时间09 年 5 月19 日
实验指导老师尤蓉、周仁超实验评分
细胞膜的渗透性及巨噬细胞的吞噬作用
实验目的:
1.通过红细胞的溶血过程的观察,了解细胞膜的渗透性及各种物质进入细胞膜
的速度。
2.通过小鼠巨噬细胞吞噬鸡红细胞的过程,了解巨噬细胞对大分子或颗粒物质
的内吞作用。
实验原理:
1.红细胞在低渗液中,细胞很快吸水而胀裂,称为溶血。
在等渗液中,由于
有些溶质会进入红细胞内、引起细胞渗透压升高,细胞也会吸水胀裂,由于各种物质透入细胞的速度不同,溶血的时间不同。
2.高等动物具有大小两类吞噬细胞(即巨噬细胞和嗜中性粒细胞),专司吞噬
作用,为非持异免疫功能的重要组成部分。
3.小鼠腹腔注射淀粉肉汤液,可诱导巨噬细胞大量产生,增强巨噬细胞吞噬活
性。
实验步骤:
细胞膜的渗透性(兔红细胞)
1.取1mL兔的抗凝全血于50mL小烧杯中,再加入10mL0.17 mol/L氯化钠,稀
释兔血制成兔的红细胞悬液,观察它的特点为一种不透明的红色浑浊液体。
2.取1支试管加入10ml蒸馏水,再加入1ml红细胞悬液,摇动2次混匀,可
见溶液由不透明的红色迅速变成红色澄清液
3.取6支试管贴上标签,依次加入下列等渗溶液10ml:①0.32M甲醇、②0.32M
乙醇、③0.32M丙醇、④0.32M乙二醇、⑤0.32M甘油、⑥0.32M葡萄
糖
4.向每支试管加入1ml红细胞悬液,摇动2次混匀,观察是否有溶血现象发生,
记下溶血时间并给予分析
小鼠巨噬细胞的吞噬作用观察
1.实验前一天向小白鼠腹腔注射6%淀粉肉汤液(含台盼蓝)1ml
2.鸡红细胞悬液制备:取抗凝全血1mL,移入10mL离心管,加入4mL生理盐水
混匀, 1500rpm离心5 min。
洗涤2次,最后按压积红细胞体积加生理盐水配成1%鸡红细胞悬液
3.小鼠腹腔注射1%的鸡红细胞悬液1ml,轻揉腹部使鸡红细胞分散
4.20~30min后,颈椎脱臼法处死小鼠
5.将小鼠置于解剖盘中,剪开腹腔,把内脏推向一侧,加适量生理盐水与腹
腔液混匀,用吸管吸取腹腔液于试管或小烧杯中备用
6.吸取腹腔液1~2滴,制作临时装片
7.镜检
结果与分析:
1、
2、
思考题
1、溶液的渗透压主要与哪些因素有关?对简单盐溶液如何粗略计算出其渗透压? 溶液的渗透压主要与溶液中溶质颗粒总数有关。
渗透压=ciRT或n/VRT(ci是解离常数、R是气体常数、T是绝对温度),可以通过这两个公式粗略计算出简单盐溶液的渗透压。
2、实验前一天向小白鼠腹腔注射含台盼蓝淀粉肉汤液的目的是什么?
注射含台盼蓝淀粉肉汤液的目的是诱导巨噬细胞大量产生,增强巨噬细胞吞噬活性。