抗人球蛋白实验
概述
抗人球蛋白实验（AGT）又称Coombs试 验，是不完全抗体的一种很好方法。抗人 球蛋白是用人血清免疫家兔，产生的抗人 球蛋白抗体，即抗人球蛋白血清。可检测 体内致敏的RBC(直接抗人球蛋白实验)和 体外致敏的RBC(间接抗人球蛋白试验)。
实验原理
直接抗人球蛋白试验是用抗球蛋白试剂直接和待 检RBC进行反应，目的是检测RBC上是否存在 免疫球蛋白，该试验是免疫血液学最长用的试验 之一。大多免疫抗体为IgG类，分子量小,与RBC 相应抗原结合后，在盐水介质中不出现肉眼可见 的凝集反应，称为不完全抗体。但在抗-IgG（抗 人球蛋白抗体）参与下，通过抗人球蛋白的桥连 作用，可使RBC与相应抗体（IgG）反应出现肉 眼可见的凝集。
仪器及用具：小试管、吸管、离心机、 37℃水浴箱、显微镜、冰箱等。
试剂
（1）抗球蛋白试剂。 抗球蛋白试剂通常有三种：多特异性抗球 蛋白试剂（简称：多抗，在直抗试验中常 常作为初筛试剂使用）、单特异性抗-IgG 试剂（简称：抗-IgG）和单特异性抗-C3 试剂（简称：抗- C3）。多抗包括了抗IgG和抗- C3两种成分，在直抗试验中一 旦出现阳性结果，通常需要单抗-IgG和抗C3进一步分析。
（2）以1000rpm离心试管，轻轻混合， 观察结果。
结果判定
如阳性对照凝集，阴性对照不凝集，受检 RBC凝集者直接抗球蛋白试验为阳性，不 凝集者为阴性。
质量控制
（1）未洗涤的RBC或悬浮血浆中细胞及 用酶处理过的RBC不能用于检测。 （2）所有结果应在检测结束时立即判断， 并熟练掌握其判断标准，结果观察过迟、 重悬浮过度均可产生假阴性。 （3）离心时间和速度应根据阳性对照反 应程度适当调整，不适的离心和温育都会 产生假阴性。
（2）致敏对照RBC：取3人O型RBC混合 用生理盐水洗涤，上清液倒尽后取压积 RBC加等量抗-D血清，置37℃水浴箱致敏 1h，取出后生理盐水洗涤3次，末次洗涤 后降上层盐水倒尽，配成5%RBC盐水悬 液，供阳性对照。
（3）未致敏的对照RBC：除不用抗-D血 清致敏外，其余按上述配制，供阴性对照。
标本
取受检者RBC以生理盐水洗涤3次，末次 洗涤后降上层盐水倒尽，配成5%RBC盐 水悬液。
操作
（1）取3只小试管分别标记（受检、阳性 对照、阴性对照），3只试管分别加入受 检者5%RBC盐水悬液、致敏的5%“D” 阳 性RBC盐水悬液、5%“D” 阴性RBC盐水悬 液各一滴，再加入抗球蛋白血清1滴，混 匀。