1管 2管 3管 反应物（滴） （测定管） （阴性管） （阳性管） 受检者红细 胞悬液 正常人红细 胞悬液 阳性对照红 细胞悬液 1 — — — 1 — — — 1
4管（盐水 对照） 1 — — —
抗人球蛋白 血清（工作 液）
生理盐水
1 —
1 —
1 —
1
实验操作
2. ① ②
③
④
间接试验 将混合O型Rh阳性红细胞用生理盐水洗涤1次， 配成5%红细胞生理盐水悬液。 取试管3支按下表操作。 混匀各管，置37℃水浴箱中1h后取出，用生 理盐水洗涤3次，最后一次弃支上清液，仅留 1滴红细胞悬液。 每管加抗人球蛋白血清1滴，混匀，5min后 观察结果。
2.
3.
4.
5.
红细胞应充分洗涤，除去吸附的血浆球蛋白，以 免中和抗人球蛋白而出现假阴性结果。 尽量用温的0.85%生理盐水进行试验，以利用消 除高难浓度冷抗体的影响，而不致出现假阳性。 血液标本要当天检查，因弱抗体置室温放置24h 后反应减弱。 用枸橼酸钠、EDTANa2或肝素抗凝对强抗体无 明显影响，对弱抗体则有抑制作用，故用去纤维 蛋白抗凝方法好。
实验材料
1. 2. 3. 4.
5.
6. 7. 8.
受检红细胞。 对照同型混合红细胞悬液 阳性对照红细胞悬液。 抗人球蛋白血清。 抗D血清。 受检者血清。 AB型血清。 0.85%生理盐水。 离心机、水浴箱（37℃）、吸管、试管。
实验操作
1.
①
直接试验
受检者红细胞悬液：取患者抗凝血去纤维蛋白血， 离心除上清液，用生理盐水洗涤3次，配成10% 红细胞悬液。 正常“O”型抗凝血，离心除去上清液，每次用 5ml生理盐水洗涤红细胞3次，然后配成10%红 细胞悬液。
②
实验操作
③
阳性对照红细胞悬液的制备：取经洗涤的混合O 型红细胞（离心后）1滴，加抗D血清2滴混匀， 置37℃水浴1h。离心后弃去上清液，再用生理 盐水洗涤3次，配成10%红细胞悬液。
④ ⑤
取试管4支，编号按下表进行操作。 混匀后置室温5min后观察。或低速离心 （1000rpm/min,1min）轻轻混和。
反应物（滴）
1管（测 2管（阳 3管（阴 定管） 性对照管）性对照管）
被检血清 5%O型D阳性 红细胞
抗D血清 AB型血清
2 1
— —
— 1
1 —
— 1Biblioteka — 1注意事项1.
本试验必须设阳性对照、阴性对照、盐水对 照。如阳性对照管不凝集，说明抗D血清失 效或抗人球蛋白血清失效，应更换血清，重 作试验；若阴性对照出现凝集，可能由于抗 人球蛋白血清中含有残余（制备时未被完全 破坏或吸附）种属抗体，或被细菌污染；盐 水对照出现凝集，可能由于存在完全抗体或 其它原因引起的自凝现象，本实验均失去意 义，不能判断结果。
抗人球蛋白试验以直接抗人球蛋白试验最常 用。 只有阳性对照、阴性对照、盐水对照出现预 期结果，本实验才有判断价值。 特异性和抗体量对试验影响较大，因此抗人 球蛋白血清最好用不同批号混合血清作试验。
抗人球蛋白试验
实验原理
免疫性溶血性贫血患者的血清中或红细胞 膜上常有不完全抗体，这种不完全抗体能吸附 在红细膜上，使红细胞致敏，但不能使红细胞 凝集，能与相应的抗体（抗人球蛋白抗体）发 生特异的抗原抗体结合反应，使致敏红细胞发 生凝集。抗人球蛋白试验用于检测不完全抗体， 有直接法和间接法两种，直接法是检测患者红 细膜表面的不完全抗体，间接法用于检测患者 血清中不完全抗体。
结果判断（健康人都呈阴性）
1.
2.
直接试验 如阴性对照不出现凝集，而阳性对 照及被检红细胞出现凝集，即阳性结果，表 示被检红细胞膜上有不完全抗体。 间接试验 若对照全相符，再看待检管结果， 若出现凝集为阳性，提示待检血清中有不完 全抗体；无凝集为阴性，则表示待检血清无 不完全抗体。
评价
1.
2.
3.