Institute for Environmental Health and Related Product Safety, China CDC
阳 性 率 ％
医院环境病原微生物气溶胶调查结果1
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甲型流感病毒巢式PCR电泳图
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• 分支杆菌： 分支杆菌 — 巢式PCR（Hsp65基因） 结核分支杆菌 — 巢式PCR（IS6110基因） 致病性非结核分支杆菌 — 核酸序列分析
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☞ 检测采样方法
— 气溶胶样品采集方法 浓缩器+ 液体冲击式微生物采样器 总采气量 100L/min. 浓缩气流量 10L/min. 浓缩效率：
2m 85% 采样效率：
☞ 医院环境病原微生物污染调查 ☞ 医院集中空调卫生管理
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一、医院病原微生物气溶胶污染调查
— 国家科技支撑项目
《公共场所传染性疾病监控技术研究》
— 国家卫生行业科研专项
阳性对照： 嗜肺军团菌Ⅰ型 (ATCC33152)
阴性对照： 金黄色葡糖球菌
产物： 486bp产物为 嗜肺军团菌
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• 流感病毒： Nacl（氯化钠）＋PEG（聚乙二醇）沉淀浓缩 一步法逆转录（RNA变为DNA） 巢式PCR
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系统发育分析实例
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0.5m 90%
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采样器内加装20ml 吸收液
流感病毒：
牛血清蛋白
嗜肺军团菌： 酵母浸出液
结核分支杆菌： 吐温80
Biosampler
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According to WHO estimates, 300 million people suffer from asthma and 255, 000 people died of asthma in 2005
• 尿中嗜肺军团菌LP1抗原 — 静态浓缩：Minicon®临床样本浓缩器 — 定性测定：双抗体夹心的ELISA
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• 血清中嗜肺军团菌抗体 — 定性测定：ELISA方法测定血清中嗜肺军团 菌血清1-6型IgG/IgA/IgM联合抗体
调查结果2: 医院肺炎病人血清LP1-6型IgA/IgG/IgM 联合抗体阳性率18.2% 肺炎病人LP1尿抗原阳性率11.8%
Institute for Environmental Health and Related Product Safety, Chin 支气管哮喘
《环境污染人群健康危害监测评价与控制》
— 国家自然科学基金项目
《公共场所病原微生物气溶胶人群感染风险
定
量评价研究》
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☞ 调查方案
— 调查地点
南北方三个地区、五个城市、二十多家三级
鸟胞内分枝杆菌巢式PCR电泳图
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非结核分支杆菌分型 对于非结核分支杆菌阳性的样品进行hsp65基因核 酸测序 使用软件MEGA4.0/系统发育树方法进行分类 鸟-胞内分枝杆菌复合群(M. avium-intracellulare) 偶然分支杆菌(M. conceptionense)
和
二级综合医院（小样本量）
全部调查医院使用集中空调系统
综合医院候诊室（公共场所）
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— 调查指标
候诊室环境空气：
结核分支杆菌（包括致病性非结核分支杆菌） 流感病毒（甲型，乙型） 嗜肺军团菌（条件致病）
— 实验室检验方法 •嗜肺军团菌：巢式PCR（Nestd-PCR）
PCR仪，琼脂糖凝胶电泳，凝胶成像系统 Omega基因组DNA提取试剂盒 Mip基因特异性引物（嗜肺） 5S基因特异性引物（非嗜肺） 一管便携式反应体系
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肺炎病人：
军团菌尿抗原 军团菌血清抗体
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— 调查方法（横断面现场调查方法）
环境调查时间： 流感病毒（当地流感高发期） 嗜肺军团菌（夏季、空调运行期间） 结核分支杆菌（任意） 住院肺炎病人： 入院时采集血样、尿样 问卷调查 — 样本量 环境气溶胶样本500份，肺炎病人280人