红色
红色
符合
红色
红色
符合
紫色 紫色 紫色 明显区分 紫色 紫色 紫色 紫色 紫色 红色 红色 红色 红色 红色 紫色 紫色 紫色 紫色 紫色 明显区分 明显区分 明显区分 明显区分 明显区分 明显区分 明显区分 明显区分 明显区分 明显区分 明显区分 明显区分 明显区分 明显区分 明显区分 明显区分 明显区分 明显区分 明显区分 明显区分

标本的采集应符合国家、地区法规要求。
已通过一种或多种方式确定性能的标准菌株或质控品 （如国家或地方临床检验中心使用过的质控菌株）也适 用。
CNAS-GL41:4.2
CNAS-GL41:4.3

涂片制备 染色镜检
染色方法包括手工染片和自动化仪器染片

结果报告 应在检验项目开展前进行性能验证，并由有经验的实 验人员操作 所有样品及容器应当作具有传染性的物质，应按照实
《XJ-SOP-006细菌室检验项目性能验证》
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验证应覆盖临床常见微生物 需氧成人/儿童血培养瓶验证菌株应包括:需氧/兼性 厌氧革兰阳性 菌、需氧/兼性厌氧革兰阴性菌、苛养菌（如：流感嗜血杆菌、肺 炎链球 菌等）和真菌，

厌氧血培养瓶验证菌株应包括兼性厌氧革兰阳性菌、兼性厌氧革
CNAS-GL41:4.4.2
标准化菌悬液法
1.菌悬液制备
1）直接菌落法：挑取培养18-24h的菌落，在生理盐水
中制备成0.5Mcf的菌悬液 2）生长法：从培养24h的培养物中挑取3-5个菌落至无
菌肉汤中，孵育数小时使其达到0.5Mcf
CNAS-GL41:4.4.2

标准化菌悬液法 2.接种
1）验证非选择培养基 用无菌肉汤或生理盐水将配置好的菌悬液进行1:100稀释， 每个平板接种10uL，均匀涂布接种。如生长过密则进行 1:1000稀释 2）验证选择性培养基 用无菌肉汤或生理盐水将配置好的菌悬液进行1:10稀释， 每个平板接种10uL，均匀涂布接种。如生长过密则进行1:100 稀释 3）验证培养管 用10uL未经稀释的菌悬液进行接种。

标准菌株、能力验证/室间质评活动使用的菌株、从临 床病人标本分离的具有稳定表型的菌株均可用做验证菌 株，实验室对其生化特征及鉴定结果应做好相关记录。
CNAS-GL41:4.4.2

直接接种法 按照实验室细菌分离培养的SOP，将待测标本接种到相 应的培养基上，观察菌落生长情况。 注意：在直接接种法验证不合格的情况下要采用标准 化菌悬液进行验证。

Com.30550：Instrument/Equipment Performance Verification The performance of all instruments and equipment is verified upon installation and after major maintenance or service to ensure that they run according to expectations.2015/07/28

微生物检验程序包括：显微镜检查、分离培养和鉴 定、药物敏感试验，血清学检查，抗原检查等各项
检验活动，

实验室应根据分析类型和用途进行验证程序的设计、验证 结果的统计学分析、建立新检验程序的可接受性能标准。

验证结果应证明该检验程序可用于检测或准确分析待测物 的特点，通常验证计划和可接受标准应在验证开始前确定。

某些特殊菌株需要在培养瓶中加入无菌、未使用抗生素
的厂 家推荐血液标本，如不加可能不生长，如流感嗜 血杆菌。
CNAS-GL41:4.4.1

模拟临床血流感染患者的细菌含量。 若苛养菌需添加适量的新鲜无菌血液（成人瓶 5-
10ml，儿童瓶 1-3ml）后置于血培养系统上进行
培养、检测。
CNAS-GL41:4.4.1
CNAS-GL41:4.4.2

在选择性培养基上验证菌株长势良好、菌落大小与 预期相符、菌落形态典 型，并且能够抑制特定微生
物的生长，可判定性能符合要求，验证合格。

在非选择性培养基上验证菌株长势良好、菌落大小
与预期相符、菌落形态典 型，血培养基上的溶血类
型符合，可判定非选择性培养基验证合格。
CNAS-GL41:4.4.2

验室生物安全要求进行操作。
CNAS-GL41:4.3
包括能力验证/实验室间比对，实验室内人员比对,
实验室如果开展手工染片和自动化染片，应该对两
种方法进行实验室内比对。
CNAS-GL41:4.3

样品数量 1.每项检查至少5份样本
2.需覆盖全部样本类型
3.无菌样本类型应包含阳性和阴性结果
4.应优先选择使用已知结果的留样 样本，不可获取

CNAS-CL042：5.3.1.5 如果设备故障影响了方法学性能，在设备修复、校准后，实验室可通 过检测质控 菌株或已知结果的样品的方式进行性能验证。

CNAS-GL41：临床微生物检验程序验证指南， 在常规应用前，应由实验室对未加修改而使用的 已确认的检验程序进行独立验证。实验室应从制 造商或方法开发者获得相关信息，以确定检验程 序的性能特征。 2016/5/30
量。

将接种好的血培养瓶放入仪器进行监测，

待阳性报警后移种平板，涂片染色，确认是否为接
种菌

在厂家说明书规定时间内检测出所有菌株则该方法 通过验证。

3 天时间应足以 检测出至少 95%的临床相关细菌，
须具备苛养菌、真菌、厌氧菌等的检出能力。

若未能 检出应使用相同菌株进行重复试验来验证。
若仍不能检测，实验室和/或制造商应在临 床使用
时采用模拟样本
CNAS-GL41:4.3




按照临床标本常用检验方式处理，由工作人员进行 操作 进行手工染片和自动化仪器染片时涂片需同时制备 两份 进行实验室间比对和能力验证时，需由当日在岗人 员进行涂片，染色，镜检，结果报告 进行实验室内人员比对时，由本岗位人员负责制片， 染色，所有从事显微镜检查的人员 进行镜检，结果 报告，由专人进行结果统计。


标本类型包括痰液、尿液、粪便、分泌物、组织等
细菌包括厌氧菌和分枝杆菌等
培养程序包括标本处理、接种、培养基选择、培养
条件选择等
CNAS-GL41:4.4.2

每项检查，每种样本至少1份标本 无论商品化培养基还是自配培养基，都需要在使用前对
培养基性能进行验证，验证菌株可选择质控菌株或临床
菌株。
5155951 报阳时间h
17.14 12.12 9.77 19.01 13.27 14.95 12.75 14.08 26.67 9.78 12.27 28.17 23.08 16.75 34.07 5d-
时间差
白色念珠菌 铜绿假单胞菌 大肠埃希菌 肺炎链球菌 甲型副伤寒沙门菌 金黄色葡萄球菌 流感嗜血杆菌 屎肠球菌 表皮葡萄球菌 肺炎克雷伯菌 鲍曼不动杆菌 咽峡炎链球菌 脑膜炎奈瑟菌 嗜麦芽窄食单胞菌 新型隐球菌 阴性对照
CNAS-GL41:4.2

验证计划和可接受标 准应与该分析物相关的国家/行 业标准/权威出版物等保持一致。

定义可接受标准的方法之一是根据医学和临床要求确
定总允许误差，但通常应用于定量检测。定性检测的
可接受标准可以用一致性（符合率）表达。
CNAS-GL41:4.2

检验程序验证所使用的标本应为合格的临床标本或从回 顾性/前瞻性临床标本中分离的菌株。
兰阴 性菌、专性厌氧菌，

其他特殊用途血培养瓶参照厂家要求选择合适类型菌株进行验 证。
CNAS-GL41:4.4.1

每种类型至少１株，总体不少于 15 株。应尽可能使用 真实患者的临床分离菌株 （性能验证用临床留样菌株
宜经质谱或 DNA 序列分析确认）。对于特殊、苛养菌
可使 用标准菌株或质控菌株。

仪器/设备性能验证 所有仪器和设备在安装后以及重要维护保养服务后应进行 性能验证，以确保其可以按照预期运行。 NOTE：Performance verification
equipment. is necessary after repairs or replacement of critical components of an instrument or item of
该系统前采取纠正措施。
CNAS-GL41:4.4.1

如果血培养仪升级，原系统和新系统的差别不大， 使用的培养瓶也没有改变，那么由供应商技术代表
核查仪器性能即可，无需再次验证。功能核 查将对
孵育系统和光学系统以及软件是否按照制造商规定
运行进行评价。
CNAS-GL41:4.4.1
BacTAlert 3D
菌株 需氧培养瓶批号 培养瓶条形码 1041828 报阳时间h
22.4 16.56 16.08 16.80 14.88 18.96 20.64 19.2 18.0 10.8 20.4 24.96 25.44 23.28 30.99 5d-
BECTEC FX
需氧培养瓶批号 培养瓶条形码
44922851842 449228951822 449228951816 449228951801 449228951808 449228951818 449228951850 449228951837 449228951799 449228951779 449228951797 449228951834 449228951785 449228951792 449228951805 449229278837
维修或更换仪器，或者更换仪器关键部件后必须进 行性能验证