游离三碘甲状腺原氨酸(FT3) 检测方法学性能验证评价报告验证内容：正确度、重复精密度、中间精密度、线性范围、临床可报告范围及参考区间的确认验证人员：王绮华、李立一检测系统信息项目：FT3仪器名称：全自动免疫分析仪仪器型号：Modular E170试剂及厂商：罗氏公司检测方法：电化学发光法二厂商提供的相关参数需验证参数厂商参数验证结果分析灵敏度0.4pmol/l 沿用厂商参数线性范围0.4-50 pmol/l pmol/l可报告范围0.4-50 pmol/l pmol/l参考区间 3.1-6.8 pmol/l三验证过程1 正确度1.1 目的：评价仪器测试结果与接受参考值之间的一致程度。
通过实验室检测数据的偏倚从而评价和验证实验室检测结果的准确性。
1.2 评价方法：参加卫生部临检中心的室间质评，本组参加室间质评的项目一律用回报结果作为评价标准，最近一次参加卫生部室间质评卫生部质控值。
1.3 结果判断：<1/2 CLIA’88正确度验证试验数据记录表项目名称/单位游离三碘甲状腺原氨酸（FT3）/ pmol/l 检测设备/编号Roche E170检测试剂/批号Roche 试剂/校准品/批号Roche 校准品/质控品/批号检测方法电化学发光法最近一次参加的临检中心室间质评回报日期：样本编号我室结果临检中心均值PT允许范围PT得分检测值与均值绝对差检测值与均值相对值相对值平方11211122112311241125CV值CV值平方偏倚批内变异系数批间变异系数不确定度判断标准：<1/2C LIA’ 88 12.5%正确度验证结果：■满足要求□不满足要求结论：E170分析检测系统所检测的项目FT3 正确度在允许范围内统计者：李立统计日期：审核者：王绮华审核日期：2 精密度2.1 重复精密度2.1.1 目的：考察仪器检测方法的随机误差2.1.2 原理：在检测系统处于优良的条件下，连续测定20个结果，判断这20个独立结果间的一致程度2.1.3 评价方法：选择新鲜混合血清标本（病人高值、低值）各20份，测量前先定标，再做质控，质控结果在控制范围内，连续重复测定20次，计算SD，CV，得到重复性精密度。
2.1.4 标本来源：高、低值标本均为混合血清。
2.1.5 结果判断：<1/4C LIA’ 88 6.25%重复性精密度验证试验数据记录表项目名称/单位游离三碘甲状腺原氨酸（FT3）/ pmol/l检测设备/编号Roche E170/检测试剂/批号Roche 试剂/校准品/批号Roche 校准品/质控品/批号Roche 质控品(PC TM)/158274检测方法电化学发光法重复性精密度数据低值样本条码号：混合样本高值样本条码号：混合样本测定测定测定测定测定测定测定测定次数结果次数结果次数结果次数结果1 11 1 112 12 2 123 13 3 134 14 4 145 15 5 156 16 6 167 17 7 178 18 8 189 19 9 1910 20 10 20低浓度均值：SD：CV：高浓度均值：SD：CV：判断标准：<1/4C LIA’ 88 6.25%重复性精密度验证结果：■满足要求□不满足要求结论：E170分析检测系统所检测的项目FT3低值、高值重复性精密度均在允许范围内，可接受。
检测者：李立检测日期：审核者：王绮华审核日期：2.2 中间精密度：2.2.1 目的：考察目前实验室检测方法中间精密度。
2.2.2 原理：在检测系统处于优良的条件下，连续测定20天，取得20个结果，判断这20个独立结果间的一致程度。
2.2.3 评价方法：取一个月的室内质控值（高值、低值）计算CV、SD，得到批间精密度。
2.2.4 结果判断：<1/3 CLIA’ 88 8.33%中间精密度验证试验数据记录表项目名称/单位游离三碘甲状腺原氨酸（FT3）/ pmol/l检测设备/编号Roche E170检测试剂/批号Roche 试剂/校准品/批号Roche 校准品/质控品/批号检测方法电化学发光法中间精密度数据低值质控品批号：高值质控品批号：测定天数测定结果测定天数测定结果测定天数测定结果测定天数测定结果1 11 1 112 12 2 123 13 3 134 14 4 145 15 5 156 16 6 167 17 7 178 18 8 189 19 9 1910 20 10 20 低浓度均值：标准差：变异系数：高浓度均值：标准差：变异系数：判断标准：<1/3 C LIA’ 88 8.33%中间精密度验证结果：■满足要求□不满足要求结论：本室所检测项目FT3低值、高值中间精密度均在允许范围内。
检测者：李立检测日期：审核者：王绮华审核日期：3 线性范围（Linearity range, AMR）3.1 目的：在确定某项目检测上限的同时检测其上下限是否呈线性关系，从而保证该浓度范围检测结果的准确性。
3.2 标本要求：高值标本可使用病人混合血清。
一般地样本的高值推荐在AMR上限的90％，低值推荐在AMR下限的10％，但这不是绝对的规则。
最好有5个或以上的系列浓度的实验样品，数据点数不得低于4个，浓度范围遍布整个预期可报告范围。
3.3 评价方法：a) 以50ul为一个体积单位，将高值标本与低值标本以3：1、2：2、1：3的体积比例混合，加上高低值标本共5个标本按照由低到高测定，记录结果。
b) 线性统计：以直接测定结果计算得出的相应浓度为X，以通过稀释测定结果为Y，回归方法学统计，得到a、b及r值。
3.4 结果判断：①若a在0.97-1.03范围内，r2>0.95，作b与0有无显著性差异的t检验，如果P>0.05，则可直接判断线性范围在实验已涉及浓度。
②若a不在0.97-1.03范围内，b较大，舍去高值或低值组数据，另做回归统计，直至缩小的分析范围其回归方程的a和b的判断符合要求，则该范围为线性范围。
线性范围验证试验数据记录表项目名称/单位游离三碘甲状腺原氨酸（FT3）/ pmol/l检测设备/编号Roche E170检测试剂/批号Roche E170试剂/校准品/批号Roche 校准品/质控品/批号检测方法电化学发光法厂家声明线性范围：0.4-50 pmol/l，线性方程：Y=aX+b，R2>0.95样本编号配制比例测定值1 测定值2 测定均值预期值差值1 4L2 3L+1H3 2L+2H4 L+3H5 4H平均斜率a采用线性回归，以预期值为X，以按比例稀释的实测均值为Y，得线性方程：Y= X+线性回归散点图：计算每一稀释度测定均值和预期值的差值。
以预期值为横轴，差值为纵轴，制作线性差异图。
回归方程：Y= X+ ■a在0.97-1.03范围内□a不在0.97-1.03范围内b的P值：■b与0无显著性差异□b与0有显著性差异R2：■R2≥0.95 □R2＜0.95直线回归方程是否可接受■可接受□不可接受线性范围延伸：●在直线回归方程可接受基础上，如果验证的线性范围小于厂家申明的线性范围，将验证的上限扩展为（上限+上限*10%），验证下限扩展为（下限-下限*50%）；●若验证上限超出厂家声明上限，以厂家线性范围为准，若没有超出厂家声明上限，以自行验证为准；扩展后的线性范围：pmol/l结论：在标本状态良好无干扰的情况下，已验证FT3测定结果在0.4-50范围内呈线性，进行线性范围延伸后，可使用的线性范围为pmol/l检测者：李立检测日期：审核者：王绮华审核日期：4 临床可报告范围（Clinical reportable range ,CRR）试剂说明书上说明检测范围足够宽，标本不需稀释，所以临床可报告范围即为线性范围0.4-50 pmol/l。
5 灵敏度:6 干扰物质干扰物质对本项目的影响大小沿用厂商参数，详细内容见本项目SOP。
7 参考区间（Reference intervals）:7.1 目的：选择20份体检合格的健康人标本，在检测系统上进行测定，对结果进行统计并与仪器说明书提供的参考区间进行比较。
7.2 原理：收集20 例正常健康人血清标本及时检测，要求其年龄，性别等均匀分布，对参考范围进行验证，只允许10%的数据超过所验证的参考范围，否则需建立参考范围。
验证范围：66-181 pmol/l7.3 标本的要求1) 体检合格健康的筛选者2) 脂血、溶血均勿用7.4 结果判断方式：R≥90%即合格生物参考区间数据及验证记录表项目名称/单位游离三碘甲状腺原氨酸（FT3）/ pmol/l检测设备/编号Roche E170检测试剂/批号Roche 试剂/校准品/批号Roche 校准品/质控品/批号检测方法电化学发光法试剂说明书提供参考范围：3.1-6.8 pmol/l各编号样本测定情况序号 条形码号性别 年龄(岁) 测定结果1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20结果判断：%90≥=总测定例数的例数测定结果在参考范围内R 为合格R 值：95% ■满足要求 □不满足要求 结论：厂家提供的FT3参考范围66-181 pmol/l 可用（可被转移） 检测者：李立 检测日期： 审核者：王绮华 审核日期：7.5 结论：若本实验室所检测的20个标本其检测结果个均在验证区间3.1-6.8 pmol/l内，故本实验室参考区间验证通过。
四总结(Summary)游离三碘甲状腺原氨酸试剂盒在罗氏E170电化学免疫检测系统的精密度、正确度、线性范围、可报告范围及生物参考区间通过验证。
通过以上各项性能验证室验的结论，罗氏E170电化学免疫检测系统达到检测要求，保证检验结果准确可靠，可以满足临床需求。