环加氧酶一２和胃泌素（Ｇａｓ）在胃黏膜中的表达。用酶联免疫吸附法测定了胃黏膜中的前列腺素Ｅ：的含量，还测定
了胃液的ｐＨ、再生黏膜厚度、扩张腺体数。结果：环加氧酶一１积分光密度在模型对照组、盐水对照组和阿司匹林组
中没有差异。而阿司匹林组环加氧酶一２与Ｇａｓ的积分光密度高于模型对照组和盐水对照组（Ｐ＜０．０１）；阿司匹林组
１６巾■医药弓冀ＣＨＩＮＡ ＭＥＤＩＣＡＬ ＨＥＲＡＬＤ
万方数据
２０１０年１２月第７卷第３４期
·论著·
腺素Ｅ２（ｐｒｏｓｔａｇｌｌａｎｄｉｎ Ｅ２，ＰＧＥ２）检测试剂盒为美国Ｉｔ＆Ｄ公 司产品。 １．２仪器与设备
日本产奥林巴斯光学显微镜、Ｍｏｔｉｅ Ｍｅｄ ６．０数码医学图 像分析检测仪。Ｌｅｉｃａ切片机为德国产品，ＰＨＳ一３Ｂ型ｐＨ计 为中国上海精科仪器有限公司产品。Ｍｏｄｅｌ ６８０型酶标仪为 美国Ｂｉｏ—Ｒａｄ公司产品。
再生黏膜扩张腺体数高于模型对照组和盐水对照组（Ｐ＜０．０１），而再生黏膜厚度、前列腺素Ｅ：含量固Ｈ值都低于模
型对照组和盐水对照组（Ｐ＜０．０１）。结论：阿司匹林可能通过抑制环加氧酶的活性导致前列腺素Ｅ２生成减少，进而促
进Ｇ细胞Ｇａｓ的表达，引起壁细胞分泌胃酸增多，导致愈合质量下降，使溃疡复发。
［关键词】阿司匹林；胃溃疡；胃酸分泌；复发
ｒｏｐｌｉｃａｔｉｏｎ （Ａ：Ｍｏｄｅｌ ｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐ．Ｂ：Ｓａｌｉｎｅ ｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐ．Ｃ：Ａｇｐｉｆｉｎ ｇｒｏｕｐ．Ｄ：Ｎｏ－ ｒｅＣｌｌｌＴｅｌｌＣｅ ｕｌｃｅｒ ｒｅｇｉｏｎａｌ ＩｌｌＵＣ０６ａ ｏｆ Ａｓｐｉｒｉｎ ｇｒｏｕｐ．Ｅ：ｎｏｎｌｌｌｉｌ ｇａｓｔｒｉｃ ｍｌｌＣ，０６ａ． Ｈ—Ｅ ｓｔａｉｎ：ｘｌＯＯ）
雄性清洁级Ｗｉｓｔａｒ大鼠购于哈尔滨医科大学第二附属 医院动物实验中心，生产许可证号：ＳＣＸＫ２００６—０１０．体重 １８０—２１０ ｇ。阿司匹林为ａｌｆａ ａｅｓａｒ公司产品。环加氧酶一１ （Ｃｙｃｌｏｏｘｙｇｅｎａｓｅ－１，ＣＯＸ－Ｉ）一抗、ＣＯＸ一２一抗和胃泌素 （Ｇａｓｔｒｉｎ，Ｇａｓ）一抗为北京博奥森生物技术有限公司产品。 它们的山羊抗兔酶标二抗都是北京康为世纪生物科技有限 公司产品。ＤＡＢ显色试剂盒为康为世纪公司产品。防脱片 氨基载玻片为天津灏洋生物制品科技有限公司产品。前列
【中图分类号】Ｒ３６３．２
【献标识码】Ａ
【文章编号】１６７３—７２１０（２０１０）１２（ａ）—０１６—０３
Ｔｈｅ ｐａｔｈ ｏｆ Ａｓｐｉｒｉｎ ｐｒｏｍｏｔｉｎｇ ｇａｓｔｒｉｃ ａｃｉｄ ｓｅｃｒｅｔｉｏｎ ａｎｄ ｕｌｃｅｒ ｒｅｃｕｒｒｅｎｃｅ
ＬＩＵ航ＣＵＩ Ｗｅｉｌｏｎｇ，ＭＵ Ｌｉｎ，ＸＩＡ Ｌｉｄｉｎｂ ＬＩ Ｇｕａｎｇｗｅｉ，ＳＵＮ Ｄｏｎｇｓｈｅｎｇ，ＷＡ ＮＧ Ｃｕｏｚｈｏｎｇ＂
【基金项目】黑龙江省自然科学基金（项目名称：阿司匹林引起大鼠乙酸溃 疡复发的作用和机制；编号：Ｄ２００７一１１１）；黑龙江省卫生厅科学技术研究 项目（项目名称：幽门螺杆菌与阿司匹林对大鼠乙酸胃溃疡的作用；编号： （２００５－３３４）。 ’通讯作者
对胃黏膜结构的影响，进而阐明溃疡复发的机制，这对防止 溃疡复发，保护煤矿工人的健康，提高生产效率具有重要的 临床意义。 １材料与方法 １．１材料
表１ 各组再生黏膜厚度和扩张腺体数的差异ｆｉ：ｌ＝ｓ）
Ｔ｛ｌｂ．１ Ｄｉｆｆｅｒｅｎｅｅ ｏｆ ｔｈｅ ｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｖｅ ｍｔｌｃｏｓａｌ ｔｈｉｅｋｎｏｓｓ ａｎｄ ｔｈｅ
ｎｕｍｂｅｒ ｏｆ ｄｉｌａｔｅｄ ｇｌａｎｄ ｉｎ ｏａｅｈ ｇｒｏｕｐ任±ｓ）
组别
再生黏膜厚度（斗ｍ）
扩张腺体数（个，ＨＰ）
（Ｑｉｑｉｈａｒ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｃｏｌｌｅｇｅ，Ｈｅｉｌｏｎｇｊｉａｎｇ Ｐｒｏｖｉｎｃｅ，Ｑｉｑｉｈａｒ，１６１００６，Ｃｈｉｎａ） 【Ａｂｓｔｒａｃｔ】Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｔｏ ｅｘｐｌｏｒｅ ｔｈｅ ｐａｔｈ ｏｆ Ａｓｐｉｒｉｎ ｐｒｏｍｏｔｉｎｇ ｇａｓｔｒｉｃ ａｃｉｄ ｓｅｃｒｅｔｉｏｎ ａｎｄ ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ ｏｆ ｕｌｃｅｒ ｒｅｃｕｒｒｅｎｃｅ． Ｍｅｔｈｏｄｓ：Ｔｈｅ ｍｏｄｅｌ ｏｆ ｇａｓｔｒｉｃ ｕｌｃｅｒｓ Ｗａｓ ｉｎｄｕｃｅｄ ｗｉｔｈ ａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ ｉｎ ｒａｔｓ，ａｎｄ ｔｈｅ ｕｌｃｅｒｓ ｈａｄ ｈｅａｌｅｄ ｏｎ ２５ ｄａｙｓ ａｆｔｅｒ ｔｈｅ ｕｌｃｅｒｓ ｗｅｒｅ ｉｎｄｕｃｅｄ．ａｎｄ ｔｈｅｎ ｔｈｅ ｒｅｃｕｒｒｅｎｃｅ ｏｆ ｈｅａｌｅｄ ｕｌｃｅｒ Ｗａｓ ｉｎｄｕｃｅｄ ｗｉｔｈ Ａｓｐｉｒｉｎ ｆｒｏｍ ｄａｙ ２５ｔＩＩ．Ｏｎ ｄａｙ ５５ｔｈ ｔｈｅ ｍｏｄｄ ｒｅｐｌｉｃａｔｉｏｎ，ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｃｙｃｌｏｏｘｙｇｅｎａｓｅ－１，ｃｙｃｌｏｏｘｙｇｅｎａｓｅ一２ ａｎｄ ｇａｓｔｒｉｎ ｗｅｒｅ ｏｂｓｅｒｖｅｄ ｉｎ ｇａｓｔｒｉｃ ｍｕｃｏｓａ ｗｉｔｈ ｉｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ｍｅｔｈｏｄｓ．Ｔｈｅ ｃｏｎｔｅｎｔ ｏｆ ｔｈｅ ｐｒｏｓｔａｇｌａｎｄｉｎ Ｅ２ ｉｎ ｔｈｅ ｇａｓｔｒｉｃ ｍｕｃｏｓａ Ｗａｓ ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ ｗｉｔｈ ｅｎｚｙｍｅ ｌｉｎｋｅｄ ｉｍｍｕｎｏｓｏｒｂｅｎｔ ａｓｓａｙ．Ｔｈｅ ｐＨ ｏｆ ｇａｓｔｒｉｃ ｊｕｉｃｅ，ｔｈｅ ｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｖｅ ｍｕｃｏｓａｌ ｔｈｉｃｋｎｅｓｓ ａｎｄ ｔｈｅ ｎｕｍｂｅｒ ｏｆ ｄｉｌａｔｅｄ ｇｌａｎｄ ｗｅｒｅ ｄｅｔｅｃｔｅｄ ｔｏｏ．Ｒｅｓｕｌｔｓ：Ｔｈｅ ｉｎｔｅｇｒａｌ ｌｉｇｈｔ ｄｅｎｓｉｔｙ ｏｆ ｃｙｃｌｏｏｘｙｇｅｎａｓｅ一１ ｈａｄ ｎｏ ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ ａｍｏｎｇ ｍｏｄｅｌ ｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐ， ｓａｌｉｎｅ ｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐ ａｎｄ Ａｓｐｉｒｉｎ ｇｒｏｕｐ；Ｔｈｅ ｉｎｔｅｇｒａｌ ｌｉｇｈｔ ｄｅｎｓｉｔｙ ｏｆ ｃｙｃｌｏｏｘｙｇｅｎａｓｅ－２ ａｎｄ ｇａｓｔｒｉｎ，ｔｈｅ ｎｕｍｂｅｒ ｏｆ ｄｉｌａｔｅｄ ｇｌａｎｄ ｉｎ ｔｈｅ ｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｖｅ ｍｕｃ０９８ ｗｅｒｅ ｉｎｃｒｅａｓｅｄ ｉｎ Ａｓｐｉｒｉｎ ｇｒｏｕｐ ｃｏｍｐａｒｅｄ ｗｉｔｈ ｔｈｏｓｅ ｏｆ ｍｏｄｅｌ ｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐ ａｎｄ ｓａｌｉｎｅ ｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐ俨＜０．０１），Ｔｈｅ ｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｖｅ ｍｕｃｏｓａｌ ｔｈｉｃｋｎｅｓｓ，ｐｒｏｓｔａｇｌａｎｄｉｎ Ｅ２ ａｎｄ ｐＨ ｗｅｒｅ ｄｅｃｒｅａｓｅｄ ｉｎ Ａｓｐｉｒｉｎ ｇｒｏｕｐ ｃｏｍｐａｒｅｄ ｗｉｔｈ ｔｈｏｓｅ ｏｆ ｏｔｈｅｒ ｔｗｏ ｇｒｏｕｐｓ（Ｐ＜０．０１）．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：Ａｓｐｉｒｉｎ ｄｅｃｒｅａｓｅｓ ｔｈｅ ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ ｏｆ ｐｒｏｓｔａｇｌａｎｄｉｎ Ｅ２ ｂｙ ｉｎｈｉｂｉｔｉｎｇ ｃｙｃｌｏｏｘｙｇｅｎａｓｅ ａｃｔｉｖｉｔｙ，ｗｈｉｃｈ ｐｒｏｍｏｔｅｓ ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｇａｓｔｒｉｎ ｏｆ Ｇ ｃｅｌｌ，ａｎｄ ｔｈｅｎ ｉｎｃｒｅａｓｅｓ ｔｈｅ ｇａｓｔｒｉｃ ａｃｉｄ ｓｅｃｒｅｔｉｏｎ．Ｉｎｃｒｅａｓｉｎｇ ｏｆ ｔｈｅ ｇａｓｔｒｉｃ ａｃｉｄ ｓｅｃｒｅｔｉｏｎ ｒｅｓｕｌｔｓ ｉｎ ｔｈｅ ｑｕＭｉｔｙ ｏｆ ｕｌｃｅｒ ｈｅａｌｉｎｇ ｔｏ ｄｅｃｒｅａｓｅ，ｗｈｉｃｈ ｃａｕｓｅｓ ｔｈｅ ｕｌｃｅｒ
量ｐＨ。 １．４统计学分析
所得实验数据用均数±标准差（牙虹）表示，用ＳＰＳＳ １６．０ 统计软件进行正态分布检验和方差齐性检验后进行统计学 分析。组间差异比较采用单因素方差分析中的ＬＳＤ方法。 Ｐ＜Ｏ．０５为差异有统计学意义，Ｐ＜Ｏ．０１为有差异高度统计学意 义。 ２结果 ２．１溃疡组织学变化
模型复制后第５５天溃疡的组织学变化。见图ｌ。 ２．２各组再生黏膜厚度和扩张腺体数的差异
模型对照组
３４１．０５＋２８．６０
２１．３８：ｔ４．６６
盐水对照组
３５３．８４±２１．０４
１８．５０－ｘ－４．９０
阿司匹林组
２８６．５６＋３４．５ ｒ
与模型对照组和盐水对照组相比。’ｆＩ＜Ｏ．Ｏｌ
３０．７５＋６．０９‘
Ｃｏｍｒ，ａｒｅｄ ｗｉｔｈ ｍｏｄｅｌ ｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐ ａｎｄ ｓａｌｉｎｅ ｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐ．？Ｐ℃Ｏ．Ｏｌ
各组再生黏膜厚度和扩张腺体数的差异见表ｌ。
图１ 模型复制后第５５天溃疡的组织学变化 （Ａ：模型对照组。Ｂ：盐水对照组。Ｃ：阿司匹林组复发的溃疡。Ｄ：阿司 匹林组未复发溃疡部位的黏膜。Ｅ：正常胃黏膜。Ｃ中箭头指向复发溃疡 和愈合黏膜之间的部位。Ｈ＆Ｅ染色：×１００倍） Ｆｉｇ．１ Ｔｈｅ ｃｈａｎｇｏ ｏｆ ｕｌｃｅｒ ｈｉｓｔｏｌｏｇｙ ０１３ ｄａｙ ５５ｔｈ ａｆｔｅｒ ｔｈｅ ｍｏｄｏｌ
１．３方法 １．３．１动物模型复制和分组 大鼠乙酸溃疡模型按文献报道 方法进行复制［５１，简述为：将内径为６ ｍｍ的塑料管放置于大 鼠胃体与幽门交界处，管内注入１００％乙酸７５“ｍ，２５ ｓ后移 去乙酸。模型制作后的第２５天光镜下检测溃疡的组织学后， 随机分为如下３组：模型对照组，溃疡制作后的第２５～５４天， 每天禁食５ ｈ；盐水对照组，溃疡制作后的第２５—５４天，每天 禁食４ ｈ后，用灌胃法给予生理盐水４ｍｌ／（ｋｇ·ｄ），然后再禁 食ｌ ｈ；阿司匹林组，溃疡制作后的第２５～５４天，每天禁食４ ｈ 后，用灌胃法给予阿司匹林４０ ｍｇ／（ｋｇ·ｄ），然后再禁食ｌ ｈ。 在５５ ｄ收集各组标本，进行各项指标检测。 １．３．２溃疡组织学检测 用过量乙醚处死大鼠，取出胃，以溃 疡部为中心，沿胃长轴取材，行组织切片，Ｈ＆Ｅ染色，光镜下 观察黏膜结构。 １．３．３再生黏膜厚度和扩张腺体数的检测 每组随机取４张 切片，每张切片随机取２个视野。Ｈ＆Ｅ染色后在光镜下放大 １００倍．测量再生黏膜上皮细胞表面至黏膜下层之间的距 离，结果表示为：微米（Ｉ．Ｌｍ）；Ｈ＆Ｅ染色切片在光镜下放大 １００倍，测量再生黏膜内呈囊状扩张的腺体数，结果表示为： 个／高倍视野（个／ＨＰ）。 １．３．４ ＣＯＸ一１、ＣＯＸ－２和Ｇａｓ表达的检测用免疫组织化学 Ｅｌｉｖｉｓｏｎ二步法检测。ＣＯＸ一１一抗１：１５０稀释，ＣＯＸ一２一抗 ｌ：１ ０００稀释，Ｇａｓ一抗ｌ：ｌ ０００稀释；它们的山羊抗兔酶标 二抗都是ｌ：１５０稀释，用ＤＡＢ试剂盒显色。每组随机取４张 切片．每张切片随机取２个视野，然后用１Ｖｌｏｔｉｃ ｌＶｌｅｄ ６．０数码 医学图像分析检测仪检测其组织切片的积分光密度来表示 ＣＯＸ一１、ＣＯＸ一２和Ｇａｓ表达的强度。 １．３．５ ＰＧＥ２和胃液ｐＨ的检测 按试剂盒生产厂商说明书并 参考文献【６】报道的方法进行胃黏膜ＰＧＥ：的测定；大鼠禁食 ２４ ｈ．乙醚麻醉，结扎幽门，４ ｈ后再结扎责门，收集胃内容 于离心管内１ ５００ ｒ／ｒａｉｎ离心１０ ｒａｉｎ，取上清液用ｐＨ计测