专题二课题1一、选择题1．菌种鉴定的重要依据是(B)A．细菌的大小、形状和颜色B．菌落的大小、形状、颜色C．有无鞭毛D．培养基的不同[解析]不同种类的细菌所形成的菌落在大小、形状、光泽度、颜色、硬度、透明度等方面具有一定特征，所以，每种细菌在一定条件下所形成的菌落，可以作为菌种鉴定的重要依据。
单个的细菌用肉眼是看不见的，故细菌的个体特征不能作菌种鉴定的依据。
2．下列生物与灭菌无关的是(C)A．接种前用火焰灼烧接种环B．接种前用酒精擦拭双手C．将平板倒置，放入培养箱中培养D．接种在酒精灯的火焰旁完成[解析]接种用具、器皿、空气中都充满了微生物，都有污染的可能，必须严格地消毒灭菌。
A、B、D都是实验操作过程中灭菌或防止杂菌污染的措施。
将平板倒置，放入培养箱中培养与灭菌无关。
3．下列关于平菇培养的操作程序，正确的是(D)A．配制牛肉膏蛋白胨培养基，接种，高压蒸汽灭菌，培养B．配制牛肉膏蛋白胨培养基，高压蒸汽灭菌，接种，培养C．配制棉子壳培养基，接种，高压蒸汽灭菌，培养D．配制棉子壳培养基，高压蒸汽灭菌，接种，培养[解析]平菇的代谢类型属于异养型，需要提供现成的有机物才能成长。
在题目给出的选项中，B选项是实验中培养细菌等的方法，D选项则是人们常用的培养平菇的方法，为了避免杂菌污染，应在接种前先进行灭菌处理。
4．下图是微生物平板划线示意图。
划线的顺序为1,2,3,4,5。
下列操作方法正确的是(D)A．操作前要将接种环放在火焰边灼烧灭菌B．划线操作必须在火焰上进行C．最可能得到所需菌落的区域是1D．在1,2,3,4,5区域中划线前后都要对接种环灭菌[解析]操作前要将接种环放在火焰上灼烧灭菌；划线操作必须在火焰旁进行，而不是火焰上；最可能得到所需菌落的区域是5。
5．制备各种牛肉膏蛋白胨固体培养基，关于倒平板的具体描述正确的是(C)①待培养基冷却至40℃左右时，在酒精灯火焰附近倒平板②将灭过菌的培养皿放在桌面上，左手拔出棉塞③右手拿锥形瓶，使瓶口迅速通过火焰④用左手的拇指和食指完全打开皿盖⑤右手将锥形瓶中培养基倒入培养皿，左手立即盖上培养皿的皿盖⑥等待平板冷却5～10s，将平板倒过来放置，使皿盖在下，皿底在上A．①③④⑤B．④⑤⑥C．③⑤D．①②④⑥[解析]琼脂是一种多糖，在98℃以上可溶解于水，在45℃以下凝固，倒平板时高于50℃则会烫手，低于50℃时若不能及时操作，琼脂会凝固。
无菌操作应贯穿于操作的全过程，皿盖全打开则空气中的微生物会进入培养基。
6．(2017·西宁四中高二月考)下列有关细菌培养的叙述，正确的是(D)A．在琼脂固体培养基上长出的单个菌落含有多种细菌B．在培养基中加入青霉素可抑制真菌而促进细菌生长C．向液体培养基中通入氧气能促进破伤风杆菌的生长D．在半固体培养基中接种细菌培养后可以观察其运动[解析]菌落是指单个或少数细菌在固体培养基上大量繁殖时，形成的一个肉眼可见的、具有一定形态结构的子细胞群体，所以单个菌落中通常只有一种细菌，A错误；青霉素能够干扰细菌细胞壁的合成，所以青霉素培养基抑制细菌生长而促进真菌生长，B错误；破伤风杆菌的代谢类型属于异养厌氧型，向其培养基中通入氧气会抑制其生长，C错误；在半固体培养基中接种细菌培养后可以观察其运动，D正确。
7．平板冷凝后要将平板倒置，其意义是(D)A．利于大肠杆菌的接种B．防止杂菌污染C．利于培养基的冷却D．防止皿盖冷却水倒流入培养基[解析]平板倒置可避免凝集在皿盖上的水流入培养基。
8．下表是关于四种生物能源、碳源、氮源、新陈代谢类型的描述。
描述正确的一组生物是(D)AC．根瘤菌与衣藻D．硝化细菌与衣藻9．培养基、培养皿、接种环、实验操作者的双手、空气、牛奶采用的灭菌、消毒方法依次是(A)①化学消毒②灼烧灭菌③干热灭菌④紫外线灭菌⑤高压蒸汽灭菌⑥巴氏消毒法A．⑤③②①④⑥B．①②③④⑤⑥C．⑥②③④①⑤D．③④②①⑥⑤10．外科手术器械和罐头食品的消毒，都要以能够杀死什么为标准(D)A．球菌B．杆菌C．螺旋菌D．芽孢[解析]消毒一般以杀死芽孢、孢子为标准。
11．高温灭菌的原理是(C)A．每种微生物生长的最适温度是一定的B．微生物对高温环境不适应C．高温破坏了细胞内的蛋白质、核酸，影响其生命活动D．高温降低了环境中氧的浓度[解析]相对于动植物来说，微生物的耐高温能力是很强的。
灭菌即杀死各种微生物及其他生命形态(如芽孢)，所以要采用更高温以破坏微生物体内蛋白质、核酸的分子活性，以使其永远丧失生活能力。
12．(2018·康杰中学高二期中)分离纯化大肠杆菌最常用的方法是平板划线法和稀释涂布平板法。
下列有关这两种方法的叙述正确的是(D)A．两种方法都可以用来计数活菌B．单菌落均是由一个细菌繁殖而来的C．都需要使用接种环进行接种D．两种方法的目的都是得到单菌落[解析]平板划线法只能用来分离大肠杆菌，不能用来计数，A项错误；单菌落可能是由一个或几个聚在一起的细菌繁殖而来的，B项错误；稀释涂布平板法需要使用涂布器，C 项错误；两种方法的目的都是得到单菌落，前者用于分离，后者可用于分离、计数，D项正确。
二、非选择题13．(2017·江苏盐城中学高二期末)烧伤病人容易感染绿脓杆菌，引起化脓性感染，比阿培南、美罗培南、头孢菌素和碳青霉烯类抗生素都是非常经典的抗绿脓杆菌的药物。
临床使用抗生素前，有时需要做细菌耐药实验。
实验时，从病人身上获取少量样本，按照一定的实验步骤操作，以确定该病人体内的绿脓杆菌对不同抗生素的敏感性。
(1)获取绿脓杆菌单菌落：配制适于绿脓杆菌生长的培养基，培养基中的营养成分一般含有__碳源__、氮源、生长因子、水和无机盐，调节pH至7，灭菌处理，待培养基冷却至50℃时，在__酒精灯火焰__附近倒平板。
经过选择培养、鉴别等步骤获得单菌落。
(2)检测绿脓杆菌对不同抗生素的敏感性：取该单菌落适当稀释，用__涂布平板法__法接种于固体培养基表面，使其均匀生长，布满平板。
将分别含等剂量的比阿培南、美罗培南、头孢菌素和碳青霉烯类抗生素的相同大小的小滤纸圆片均匀置于该平板上的不同位置，适宜条件培养一段时间，结果是含不同抗生素的滤纸片周围均出现透明圈，这说明绿脓杆菌对上述抗生素__敏感__；含头孢菌素的滤纸片周围的透明圈比含美罗培南的小，这说明绿脓杆菌对头孢菌素的敏感性比美罗培南__弱__(填“强”或“弱”)；含比阿培南、碳青霉烯类的滤纸片周围的透明圈也比含美罗培南的小，且比阿培南透明圈中出现了一个菌落，请推测此菌落产生的可能原因：一是__杂菌污染__，二是__抗比阿培南的绿脓杆菌(或绿脓杆菌产生耐药性突变)形成的菌落__。
(3)根据上述实验结果，为达到抗绿脓杆菌的目的，对于该患者来说最好应选用抗生素__美罗培南__。
[解析](1)获取绿脓杆菌单菌落过程中，配制菌落生长需要的培养基，在培养基中一般含有碳源、氮源等营养成分物质，调节好pH后进行灭菌，灭菌完成后，冷却到适应温度，在酒精灯火焰边倒平板；在平板上进行接种，选择、鉴别等步骤最后获得单菌落；(2)检测菌体对不同抗生素的敏感性：取该单菌落适当稀释，用涂布平板法法接种于固体培养基表面，使其均匀生长，布满平板。
将分别含等剂量的比阿培南、美罗培南、头孢菌素和碳青霉烯类抗生素的相同大小的小滤纸圆片均匀置于该平板上的不同位置，适宜条件培养一段时间，结果是含不同抗生素的滤纸片周围均出现透明圈，这说明绿脓杆菌对上述抗生素都敏感；含头孢菌素的滤纸片周围的透明圈比含美罗培南的小，这说明绿脓杆菌对头孢菌素的敏感性比美罗培南弱；含比阿培南、碳青霉烯类的滤纸片周围的透明圈也比含美罗培南的小，这说明该杆菌对美罗培南最为敏感，比阿培南透明圈中出现了一个菌落，此菌落的产生可能是杂菌污染，也可能是形成了耐药性的突变菌；(3)根据上述实验结果，为达到抗绿脓杆菌的目的，而它对美罗培南最为敏感，那么对于该患者来说最好应选用抗生素是美罗培南。
14．某航空公司宣布，启用以生物柴油(俗称“地沟油”)为燃料的客机执行飞行任务，以减少碳排放。
科学家发现，在微生物M(单细胞)产生的脂肪酶作用下，从地沟油中提取的植物油与甲醇反应能够合成生物柴油。
(1)用培养基培养微生物时，培养基中应有__碳源__、__氮源__、__水__和__无机盐__等营养，同时还必须满足微生物生长对__特殊营养物质__、__pH__、__氧气__的要求。
在筛选产脂肪酶的微生物M时，应用__选择__培养基，可以在培养基中添加__植物油__作为唯一碳源。
(2)培养基灭菌采用的最适方法是__高压蒸汽灭菌__法。
(3)图示是采用纯化微生物M培养的两种接种方法接种后培养的效果图，过程一的接种方法是__平板划线法__，过程二的接种方法是__稀释涂布平板法__，此方法计数的微生物M 的数目__<__(选填“>”“＝”“<”)实际活菌数，接种后应注意培养皿要__倒置__放置。
15．请回答与大肠杆菌纯化培养有关的问题：(1)制备培养基。
配制培养基时各种成分在溶化后分装前必须调节__pH__，培养基在接种前要进行__高压蒸汽__灭菌。
(2)纯化大肠杆菌。
①通过连续划线操作，将聚集的菌种逐步分散到培养基的表面，在数次划线后培养，可以分离到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体，这种方法称为__平板划线法__。
②用该方法统计样本菌落数时__需要__(填“需要”或“不需要”)设置对照组。
为什么？__需要判断培养基是否被污染__。
(3)讨论分析。
①纯化大肠杆菌时，__不可__(填“可”或“不可”)用加入抗生素的方法防止杂菌感染。
②用该方法分离大肠杆菌时，从第二次划线操作起，每次总是要从上一次划线的末端开始划线，其原因是__线条末端的细菌数量少，最终可得到由单个细菌繁殖而形成的菌落__。
③大肠杆菌与酵母菌的最本质区别是__大肠杆菌无成形的细胞核(酵母菌有成形的细胞核)__。