57中国医药技术经济与管理Chinese Journal of PharmaceuticalT echnology Economics and Management滇重楼研究进展滇重楼Paris polyphylla Smith var. yunnanensis (Franch.)Hand-Mazz，延龄科Trilliaceae重楼属Paris 植物，全世界该属植物有24个种，分布于欧亚大陆的热带至温带地区。

我国为该属植物的分布中心之一，有19个种，大部分省区均有分布，以西南各省区为多[1]。

滇重楼主要分布于云南、贵州和四川等地，为云南白药、宫血宁和季德胜蛇药等中成药的重要原料药。

然而滇重楼自然繁殖率很低，周期长，随着需求量日益加大，野生资源短缺。

本文对近年相关滇重楼研究进行综述。

1 滇重楼生物学及植物学特征1.1 植物学特征：滇重楼是多年生草本植物，最高可达2m，地下有肥大的横生根状茎，茎多呈紫黑色，基部有1-3片膜质叶鞘抱茎。

叶通常7-10枚轮生，长7-11cm，宽2.5-5c m ，为倒卵状披针形或倒披针形，先端渐尖或急尖，基部楔形至圆形，长4-9.5c m ，宽1.7-4.5c m ，常具1对明显的基出脉，叶柄长1.8-6cm。

花梗从茎顶抽出，顶端着生一花，两性，花被两轮，外轮被片4-6，绿色，卵形或卵状披针形，内轮花被片与外轮花被同数，条形，长为外轮花被的1/3或近等长，黄绿色，常在中部以上变宽，雄蕊2-3轮，8-10枚，花药长1-2mm。

花丝很短，仅为花药的1/3-/4，药隔突出于花药之上，子房近球形，具棱，花柱短。

蒴果球形，花期4-6月，果期9-11月，果实膨大期20天，果实成熟期40天，花期不明显。

越冬芽在6月底7月初在茎基前端形成白色越冬芽。

1.2 生物学特征：滇重楼生长在海拔1400-3100m的常绿阔叶林、云南松、竹林、灌丛、草坡背阴处或阴湿山谷中，为阴生植物。

其生境的年平均气温12.6℃左右，年平均降雨量826-900mm，冬季严寒，夏无酷暑，雨量充沛，气候凉爽，腐殖质层丰富的酸性土壤[2]。

滇重楼为多年生宿根性草本。

自然生长状态下，根茎埋在0-10 cm土壤表层范围内。

每年秋末冬初，地上部分倒苗、枯萎、脱落，茎痕侧下方根茎顶端的分生组织分化出顶芽。

顶芽在第二年发育成新的地上部分[3]。

苏文华等[4]采用LI-6400光合测定仪和人工气候箱研究了滇重楼叶片光合补偿点、光合饱和点、羧邓子超 黄玮 张文生 孟繁蕴* 王永炎58中国医药技术经济与管理Chinese Journal of PharmaceuticalT echnology Economics and Management化效率和CO2补偿点，并进行进行温度、相对湿度对光合速率的单因子影响研究，发现滇重楼光合速率在温度11-20℃范围内，随温度升高上升；光合速率在温度20-35℃随温度升高下降，最适生长温度为16-28℃，最适生长湿度在75%左右，光照度为15-50%（光强1000-3500Lx），光合有效辐射为750-2000μmol/(m 2·s)的散光。

1.3 分子生物学特征王丽等[5]利用荧光原位杂交(FISH)对4种重楼属植物的18-26S rDNA进行了定位，为探讨rDNA在重楼属Paris L．中的分布规律。

唐荣华等[6]利用随机扩增多态性DNA ( RAPD )技术，对重楼属植物11个种的遗传多样性进行了分析。

12个引物共扩增出86条带，其中有82条(95.3％)表现出多态性，说明重楼属植物有很高的遗传多样性。

张瑞等[7]通过对影响重楼AFLP一银染技术体系的关键因素作对比研究，建立了一套优化的重楼AFLP分子标记体系，采用CTAB法从幼叶中提取DNA，酶切时间为9h，退火温度为56℃，从15对引物中筛选出4对进行选择性扩增，得到扩增条带276条，其中多态性带201条(占72.83％)。

2 滇重楼化学成分研究2.1 甾体类2.1.1 甾体皂苷：是其主要活性成分，其苷元主要为异螺甾烷醇类的薯蓣皂苷元和偏诺皂苷元[8]。

此外，尚有2,4α-羟基偏诺皂苷元、2,7-羟基偏诺皂苷元[9]、2,5S-异纽替皂苷元以及呋甾烷醇类皂苷元，C21甾类皂苷元等共计12种。

它们多在3位与糖连接成苷，所连接的糖主要有D-葡萄糖、L-鼠李糖、L-呋喃阿拉伯糖3种[10]。

薯蓣皂苷元-3-O-α-L-呋喃阿拉伯糖基（1→4）-[α-L-吡喃鼠李糖基（1→2）]-β-D-葡萄糖苷、薯蓣皂苷元-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基（1→4）-[α-L-吡喃鼠李糖基（1→2）]-β-D-葡萄糖苷、薯蓣皂苷元-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基（1→4）-α—L-吡喃鼠李糖基（1→4）-α-L-吡喃鼠李糖基（1→2）]-β-D-葡萄糖苷和偏诺皂苷元-3-O-α—L-呋喃阿拉伯糖基（1→4）-[α-L-吡喃鼠李糖基（1→2）]-β-D-葡萄糖苷[11]。

(23S，25s)一3 ，23，27-trihydroxyspirest-5一en-3一O—pD—glucopyranosyl一(1— 6)一pD—glucopyranosid [12]、pennogenin diglyeoside [13]。

对于呋甾烷醇类皂苷，尚在26位连接有D-葡萄糖。

这些皂苷中，已发现有多种具有药理活性，包括重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ、Ⅶ、H [14-17]。

2.1.2 植物蜕皮激素现已从滇重楼中分离得到或测定到β-蜕皮激素（β-ecdysone）[18]。

2.1.3 植物甾醇主要为β-谷甾醇、豆甾醇及其衍生的苷类[19]。

豆甾醇-3-O-β-D-葡萄糖苷、1-O-（β-D-葡萄糖基）-（2S，3S，4E，8E）-2-[（2’R）-2＇-羟基十六酰氨基]-4（E），8（E）-十八二烯-1，3-二醇。

2.2 黄酮有山柰酚-3-O -鼠李糖（1－4）-葡萄糖苷（15）等5种[20]。

2.3 其它成分氨基酸、微量元素、肌酸酐、鞣质等[21]。

Chinese Journal of Pharmaceutical Technology Economics & Managenment中国医药技术经济与管理2007年6月 第1卷 第2期59中国医药技术经济与管理Chinese Journal of PharmaceuticalT echnology Economics and Management3 滇重楼药理研究3.1 抑菌、抗病毒作用据王强等人的研究显示，浓度为100mg/ml的滇重楼溶液，用试管法测得其最小抑菌浓度（MIC，mg/ml）对宋内氏痢疾杆菌为25.00，粘质沙雷氏菌为50.00，大肠杆菌为25.00，金黄色葡萄球菌（耐药）50.00，金黄色葡萄球菌（敏感）25.00[15]。

石晓枫[22]报道，7.8mg/ml的醇提物在试管内有杀灭钩端螺旋体作用，而用同浓度水煎剂则无此作用。

此外，我们用鸡胚接种法证明水或醇提取物对甲型及亚洲甲型流感病毒均有抑制作用，稀释至1:10000于1:10份仍有效；小鼠用重楼药液滴鼻，5h后接种病毒，其死亡率比对照组低。

滇重楼的抗病毒作用与所含鞣质有重要关系。

另滇重楼煎剂对于右旋糖酐所致“无菌性炎症”具有对抗作用；在体外实验中，能抑制乙肝病毒脱氧核糖核酸。

3.2 止血作用从滇重楼中提取的偏诺皂苷C，在浓度很低时体内试验即呈现较强的止血作用；另含滇重楼的中成药云南白药和宫血宁胶囊0.4g/kg对小鼠灌服，呈较强止血作用。

皂苷单体的研究表明，皂苷C能显著缩短小鼠凝血时间和大鼠血浆复钙时间，还能诱导家兔主动脉条收缩，降低小鼠腹腔毛细血管通透性[15，23]。

笔者认为其止血作用的机理在于激活内源性凝血因子及诱导血管收缩。

我们经实验研究证实偏诺皂苷较薯蓣皂苷止血作用更强。

3.3 镇静、镇痛作用雌性小鼠电刺激测痛试验结果表明，滇重楼具有较明显的镇痛作用，用药后痛阈提高，此与其有止痛作用的功效相吻合。

镇静实验的数据也表明，滇重楼有显著的镇静作用，而且其强度不弱于安定[24，25]。

证明了历代使用其治疗惊风抽搐是有一定内在物质基础和科学道理的。

3.4 止咳、平喘作用滇重楼煎剂15g /k g 灌胃，对二氧化硫引咳的小鼠有止咳作用；煎剂或乙醇提取物均按15g /k g 灌胃，对组织胺喷雾所致气管痉挛的豚鼠有保护作用，乙醇提取物作用尤强。

其提取物在1/2～1/5半数致死量即有明显平喘作用，效果与1/2半数致死量的氨茶碱相似[26]。

3.5 抗肿瘤作用：滇重楼根茎的甲醇提取物对小鼠成纤维细胞L-929有很强的细胞毒活性，10mg/ml时抑制率均高达95%以上，水提物细胞毒活性相对较小。

体外实验证明，滇重楼总皂苷对宫颈癌U14、RS615、艾氏腹水癌EAC、小鼠肉瘤S180、肝癌腹水型Hep、小鼠肝癌H22等细胞株均有明显抑制作用，此抑制作用是非特异性的。

可使3H-TdR、3H-UR、3H-Leucine 掺入肿瘤细胞的量减少，尤以3H-TdR掺入减少最为明显，且有较强溶血作用，因此可推测重楼皂苷主要通过抑制DNA合成和直接细胞毒作用而发挥抗肿瘤效应，对DNA的作用方式偏向于代谢干扰型[15，27]。

对重楼皂苷Ⅰ和Ⅱ的研究认为两者均具有较强细胞毒性，对白血病P-388、L-1210和鼻咽鳞癌KB细胞的EB50分别为0.94、0.14、0.16和0.22、0.43、0.029μg/ml。

体内试验亦表明，重楼皂苷可抑制H22动物移植性肿瘤小鼠脾组织DNA、RNA的生物合成，对小鼠腹腔巨噬细胞经LPS诱生TNF有明显抑制作用，药物剂量越高对TNF的活性及其诱生的抑制作用越明显。

重楼皂苷Ⅱ对裸鼠卵巢癌SK-OV-3、结肠癌HT-29及3H/HeN小鼠肝癌MH-134等移植性肿瘤有显著抑制作用[16，24]。

60中国医药技术经济与管理Chinese Journal of PharmaceuticalT echnology Economics and Management3.6 免疫调节作用滇重楼中的活性化合物重楼皂甙Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ在小鼠成纤维细胞L929培养基中可引起ConA诱导的小鼠淋巴细胞增殖效应，并能促进小鼠粒/巨噬细胞克隆形成细胞（GM-CFC）增殖。

活性化合物重楼皂甙Ⅱ尚对PHA诱导的人外周全血细胞有丝分裂有促进作用，体内试验能增强C3H/HeN小鼠的自然杀伤细胞活性，诱导干扰素产生，并可抑制S－抗原诱导的豚鼠实验性自身免疫性眼色素层炎（EAU）的发生发展[28]。

笔者认为重楼皂甙Ⅱ是一作用较强的免疫调节剂，有较强的拮抗多种炎性因子的作用。

此外，还发现其它活性化合物具有类似的免疫调节作用，其中，β-蜕皮激素（β-ecdysone）活性最强，且对脾细胞的细胞毒性非常小。