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微生物学(格式)第六章微生物的生长及控制ppt课件
① 生长速率常数R等于零。 ② 细胞形态变大或增长。 ③ 细胞内RNA尤其是rRNA含量增高,原生质呈嗜碱性。
④ 合成代谢活跃,核糖体、酶类和ATP的合成加快,易产 生诱导酶。
⑤ 对外界不良条件例如NaCl溶液浓度、温度和抗生素等化
学药物的反应敏感。
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Ⅰ 延滞期 (lag phase)
影响延滞期长短的因素 (1)接种龄 (2)接种量 (3)培养基成分
2、 间接法
比浊法:分光光度法(OD) 生理指标法:测含氮量
二、 计繁殖数
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二、 计繁殖数
1、 直接法:用血球计数板在显微镜下进行计数 2、 间接法:用平板菌落进行的活菌计数
菌数/mL = cfu X 稀释度 X 10
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第二节 微生物的生长规律
一、 微生物的个体生长和同步生长 二、 微生物的典型生长曲线 三、 微生物的连续培养方法
0.5mg/ml 0.2mg/ml
时间
营养物浓度对生长速度和菌体产量的影响
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Ⅲ 稳定期(stationary phase)
①生长速率常数R=0,即新繁殖的细胞数与衰亡的细胞 数相等;
②菌体产量达到最高点,且产量与营养物质的消耗出现 有规律的比例关系,用生长产量常数Y表示;
Y = (X-X0) / C0-C = (X-X0) / C0
X :稳定期的细胞干重(g/ml培养液)
X0 :刚接种时的细胞干重 C0 :限制性营养物的最初浓度(g/ml) C : 稳定时期限制性营养物的浓度
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稳定期的实践意义
①对以生产菌体或与菌体生长相平行的代谢产物(SCP、乳酸)等 为目的的一些发酵生产来说,稳定期是产物的最佳收获期: ②是对维生素、碱基和氨基酸等生长因子进行生物测定的最佳 测定时期; ③通过对稳定期到来原因的研究,促进了连续培养原理的提 出和工艺、技术的创建;
目前由于研究的微生物种类主要局限于
三个重要参数 (1)繁殖代数(n)
(2)生长速率常数(R)
(3)代时(G)
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Ⅱ 指数期 (exponential phase)
X2 = X1 · 2n
两边取对数:
lgX2 = lgX1 + nlg2
(lg2 =0.301) x2
n = 3.322 ( lgX2 - lgX1)
x1
G = (t2-t1) / n
主要获得不同生长速率的菌体;
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恒浊与恒化培养控制装置
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Turbidostat & chemostat的比
较 装置
恒浊器
恒化器
控制对象 菌体密度(内控制) 培养基流速(外控制)
培养基
无限制生长因子
有限制生长因子
培养基流速
不恒定
恒定
生长速率
最高速率
低于最高速率
产物
大量菌体或与菌体相平 不同生长速率的菌体 行的代谢产物
= (t2-t1) / 3.322(lgX2-lgX1)
R = 1 /G = 3.322 (lgX2-lgX1) / (t2-t1)
t1 t2
Ⅱ 指数期 (exponential phase)
影响代时长短的因素
(1)菌种 (2)营养成分 (3)营养物浓度 (4)培养温度
细胞数或菌体量
8.0mg/ml 6.0mg/ml 4.0mg/ml 2.0mg/ml 1.0mg/ml
出现延滞期的原因?
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Ⅱ 指数期 (exponential phase)
是指在生长曲线中,紧接着延滞期的一段细胞数 以几何级数增长的时期。
① 生长速率常数R最大,代时G最短;
② 整个群体的生理特性较一致; ③ 细胞各成分平衡增长,生长速率恒定; ④ 酶系活跃,代谢旺盛。
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Ⅱ 指数期 (exponential phase)
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一、 微生物的个体生长和同步生 长
➢同步生长
➢通过同步培养的手段而使细胞群体中各个体处于分 裂步调一致的生长状态;
➢获得同步生长的方法
➢环境条件诱导法 ➢机械筛选法
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二、微生物的典型生长曲线(growth curve)
➢ 生长曲线:
➢当把少量纯种单细胞微生物接 种到恒容积的液体培养基中后, 在适宜的温度、通气等体积下, 该群体就会由小到大,发生有规 律的增长。如果以细胞数目的对 数值作纵坐标,以培养时间作横 坐标就可画出一条曲线——微生 物的典型生长曲线。
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二、微生物的典型生长曲线(growth curve)
生 长 速
度0
lg细胞数 (个/ml)
总菌数 活菌数
I
II
III
I 延滞期 II 指数期精品课I件II 稳定期
IV
培养时间(h)
IV 衰亡期
Ⅰ 延滞期 (lag phase)
指少量微生物接种到新鲜培养液中后,在开始培养 的一段时间内细胞数目不增加的时期。
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1. 恒浊器 (turbidostat)
是一种根据培养器内微生物的生长密度,并 借光电控制系统来控制培养液流速,使细菌培 养液保持恒定的连续培养方法;
主要用于获得大量菌体或与菌体相平行的代 谢产物。
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2、恒化器 (chemostat)
是一种设法使培养液的流速保持不变,并使 微生物始终在低于其最高生长速率的条件下进 行繁殖的连续培养装置;
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IV 衰亡期 (death phase)
微生物个体死亡速度超过新生速度,整个群体呈现负 生长状态;
细胞形态发生变化,出现畸形;
有的发生自溶;
有的合成或释放次生代谢产物;
芽孢此期释放;
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三、 微生物的连续培养方法
稳定期到来的主要原因?
➢营养物尤其是生长限制因子的耗尽; ➢有害代谢产物的累计; ➢理化条件的不适宜等;
第六章 微生物的生长及其控制
Microbial Growth and Control
第一节 测定生长繁殖的方法 第二节 微生物的生长规律 第三节 影响微生物生长的主要因素 第四节 微生物培养法概论 第五节 有害微生物的控制
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第一节 测定生长繁殖的方法
一、 测生长量
1、 直接法
测体积法(粗放) 称干重法(精确)
应用范围
生产为主
实验室为主
分批培养与连续培养的比较
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连续培养的优缺点
优点
高效 自控 产品质量稳定 节约动力、人力、水和蒸汽等
缺点
菌种容易退化 容易污染杂菌 营养物的利用率低于单批培养
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微生物的高密度培养
指微生物在液体培养中细胞群体密度超过常 规培养10倍以上的生长状态或培养技术;