3 工艺流程
菌种
原料
空气
斜面培养
预处理
空气压缩机
摇瓶扩大培养ຫໍສະໝຸດ 水解冷却种子罐扩大培养
过滤
淀粉水解糖
配料
气液分离 过滤除菌
发酵
4 工艺流程说明及主要工艺参数
菌种活化 将保藏的鸡腿蘑菌种转接于斜面培养基上，25℃培养至满 管。选择菌丝生长旺盛的菌种备用。
斜面培养 从已活化的斜面菌种中取出约O．5锄2大小的菌丝块，接 种于空白斜面培养基中部，于25℃培养至满管。
（2）取本品约 10mg，滴加水少许研磨，再加水制成每 1ml 中含 0.5mg 的溶液，置匀浆器中制 成匀浆液，取 10ml，加高碘酸钠溶液[取高碘酸钠（NaIO4）4.28g，加 0.005mol/L 硫酸溶液。溶 解并稀释至 1000ml]1ml，摇匀，立即取反应液 4ml，以水为空白对照，照分光光度法（中国药典 1995 年版二部附录ⅣA） ，在 295nm 的波长处测定吸收度（A1） ，剩余的反应液置避光容器中。于 3O℃连续搅拌 6 小时后，取出，测定吸收度（A2） 。两次吸收度之差（A1-A2）应为 0.15～0.25。
装液量对香菇深层发酵的影响 香菇是好气性真菌，足够的氧气是保证香菇正常生长发育的重要环境条件。 当空气不流通，氧气不足时，呼吸作用受到阻碍，菌丝的生长繁殖和子实体 发育就会受到抑制，甚至死亡。缺氧时，菌丝借酵解作用暂维持生命，但时 间过长会消耗大量营养，使菌丝容易衰老或死亡。其生长繁殖及代谢产物的 合成过程需要大量的能量，为了获得足够多的能量，以满足细胞生长和发酵 代谢产物的需要，培养基中的能源必须经有氧降解才能产生大量的ATP。为 此，必须供给充足的氧气。
Sevag法脱蛋白 在一定体积的粗多糖溶液中，加～定体积的Sevag试剂(氯仿， 正丁醇按照一定的比例混合)。充分混匀后静止一定时间，放置 于分液漏斗中，分层后弃去下层有机溶剂层及中间的蛋白质层。
DEAE．纤维素32的处理 DEAE一纤维素32(再生)一0．5mol／L NaOH和0．5moYL Naa混合溶液 处理0．5h一蒸馏水洗至中性一0．5mol／L HCl溶液处理O．5h一蒸馏水 洗至中性一0．5mol／L NaOH溶液处理0．5h一蒸馏水洗至中性一 0．5mol／L HCI溶液处理0．5h一蒸馏水洗至中性一悬浮于蒸馏水中备用。
5 产品的质量标准
正式名：香菇多糖 标准号：WS-291（X-256）-97
汉语拼音：Xianggu 拉丁文或英文：Lentina n
主要活性成分：香菇[Lentinus edodes（Berk）sing]子实体提取、精制的多糖。按干燥品计算，含 香菇多糖应不得少于 92.0%。
性状：类白色或浅黄色粉末；无味，有引湿性。在水、甲醇、乙醇或丙酮中几乎不溶；在 0.5mol/L 氢氧化钠中溶解。
（3）红外光吸收图谱应与对照品的图谱一致，在 89Ocm-1 上附近有弱吸收峰。
检查：酸碱度 取本品，加水制成 0.05%的匀浆液，依法测定（中国药典 1995 年版二部附录Ⅵ H） ， pH 值应为 6.0～8.0。
特性粘数 取本品，置五氧化二磷干燥器中，减压干燥至恒重，精密称取适量，加 0.5mol/L 氢氧化钠溶液数滴，使充分溶胀，研磨均匀，在 25～30℃放置 6～8 小时，使完全溶解，制成每 1ml 中含 0.5mg 的溶液，摇匀，依法测定（中国药典 1995 年版二部附录ⅥG 第三法） ，特性粘数 应为 60～130。
发酵优化培养基(％)：玉米淀粉4，黄豆饼粉0．2，蔗糖3，KH2P04 0．1， MgS04 0．1，Cas04 O．05，玉米浆0．5，pH6．0
2 生产原理
利用深层液体发酵培养香菇菌丝体后，从发酵液 中提取菌丝体，从而得到胞内香菇菌丝体，再从 菌丝体中，利用它在酒精和水，及酶液的不同溶 解度来提取胞内多糖。将菌丝体抽提、浓缩、离 心，取上清液脱色透析，透析液再浓缩、离心， 最后用溶液沉淀、洗涤干燥而成。
1．3培养基
斜面培养基(％)：马铃薯20，葡萄糖2，KH2P04 0．2，MgS04 0．05，琼脂2，VBxl0 mg／L,，pH6．0
液体种子培养基(％)：马铃薯20，葡萄糖2，KH2P04 0．2，MgS04 0．05，玉米浆0．5，pH6．0
发酵基础培养基(％)：葡萄糖2，蛋白胨0．2，KH2P040．2， MgS040．1，玉米浆0．5，pH6．0
液体种子培养 将斜面菌种切割成约0．5cm2大小的菌丝块，接种于装有 lOOmL液体种子培养基的250mL锥形瓶中，每瓶接半支 斜面。于25-26"C，140．150r／min振荡培养4d。
摇瓶培养 将液体种子按10％接种量接种于装有90mL液体培养基的250raL锥形瓶中， 于 25．26℃，140-150f／rain振荡培养5d。
干燥失重 取本品适量，置五氧化二磷干燥器中，减压干燥至恒重，减失重量不得过 3. 5% （中国药典 1995 年版二部附录Ⅷ L） 。
含量测定： 对照品溶液的制备 取香菇多糖对照品 25mg，精密称定，加 0.5mol/L 氢氧化钠溶液 10ml，
研磨，使溶解，加水分次转移至 1000ml 量瓶中，并稀释至刻度，摇匀，即得。 供试品溶液的制备 取本品 25mg，精密称定，照对照品溶液的制备项下，自“加 0.5mol/L
温度对香菇深层发酵的影响 发酵培养的温度是一项重要的发酵参数，它对许多方面产生影响。表观上讲， 它可以影响食用菌的生长、繁殖、代谢等，并影响到发酵培养基的物理化学 性质，如溶氧、pH值、氧化还原电位等；微观上由于它通过影响食用菌膜的 液晶结构、酶和蛋白质的合成和活性、以及RNA的结构及转录等影响微生物 生命活动，改变甚至破坏微生物的代谢调控机制，影响菌体的酶的合成方向， 并直接影响到酶系的组成，从而影响代谢产物的形成。温度对食用菌菌丝的 生长是双方面的：温度升高，可以加快菌体的生长，但是随着温度的上升， 细胞中对温度敏感的组成物质可能会遭到破坏，而且温度过高，菌体易老化， 影响到各种酶系的活性，从而影响菌体生长和胞外多糖的形成。
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1 .1 菌种
鸡腿蘑(Corprinus comatus)菌株Co一1由河南科技 大学林学院园艺研究所提供。
1．2主要试剂
葡萄糖 麦芽糖 乳糖 可溶性淀粉 硝酸钾 硫酸铵 酵母膏 蛋白胨 磷酸二氢钾 硫酸镁 硫酸钙 苯酚 硫酸 无水乙醇 三氯甲烷(氯仿) 正丁醇 碳酸氢钠 氢氧化钠 DEAE-纤维素32
玉米淀粉、红薯淀粉的预处理 当以玉米淀粉、红薯淀粉为培养基原料时，为了避免淀粉性多糖对试验结 果的影响，在配制培养基时首先对玉米淀粉、红薯淀粉进行了预处理。处 理方法如下：加水煮沸15rain左右，待其充分糊化后冷却至60℃，加0．1 ％a-淀粉酶保温至碘反应不显蓝色为止，四层纱布过滤，取其滤液备用。。
免疫调节功能 抗肿瘤 抗感染 保肝作用 抗氧化、延缓衰老 抗突变作用 抗病毒作用
4 产品的应用
•保健品 广西桂林实力天然食品有限公司生产的荷仕威香菇多糖颗粒冲剂有
免疫调节的功效
•治疗各种感染 香菇多糖注射液与抗生素合用,能有效防治反复呼吸道感染的
发生。
•药品 配合其他药物治疗慢性乙肝,可提高乙肝病毒标志物的转阴作用 •农药 香菇多糖0.5%水剂对番茄病毒病、烟草病毒病有较好的抗病毒作用
香菇多糖的生产工艺
精化1121 徐涛
主要内容
• 认识产品 • 追根求源 • 生产技术
一
1 结构式
认识产品
2 性质
物理：白色或棕黄色粉末状固体
化学：能溶于0.5M NaOH溶液中，溶解 度可达50-100mg/ml；不溶于甲醇、正丁 醇、高浓度乙醇、丙酮等有机溶剂。
生物：抗肿瘤，抗病毒
3 产品的功能
SephadexG-200
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天津市科密欧化学试剂开发中心 北京益利精细化学品有限公司 天津市科密欧化学试剂开发中心 天津市科密欧化学试剂开发中心
比旋度 取本品，置五氧化二磷干燥器中，减压干燥至恒重，精密称取适量，加 0.5mol/L 氢 氧化钠溶液溶解并定量稀释制成每 1ml 中含 10mg 的溶液，依法测定（中国药典） ，范围在+2～+15 之间。
鉴别： （1）取含量测定项下的溶液 2ml，加蒽酮溶液（取蒽酮 35mg 置 100ml 量瓶中加硫酸溶解， 并用硫酸稀释至刻度，即得，临用配制）5ml，振摇混匀，置水浴中加热，应显蓝绿色。
蒽酮硫酸溶液的配制 取蒽酮（分析纯）35mg 置 100ml 量瓶中加硫酸溶解，并用硫酸稀释 至刻度即得，临用配制。
作用与用途：抗癌辅助用药。
二 追根求源
1 诞生与发展过程
1968 年日本千原吴郎首先利用热水从香菇子实体中浸提 出6 种胞外LNT5 1970 年Chihard 和Sasaki 用热水浸提结合有机溶剂沉淀 从香菇中提取到另外4 种多糖。 1986年获日本厚生省批准生产并外销。 1988年我国卫生部批准进口，现今我国已有几家国产 LNT上市(如南京振中和福州梅峰等)。香菇多糖由于是单 一组分，质量易于控制，且具有疗效高，剂量低，毒副 作用小等优点，受到医生的青睐。 近年来，LNT的广泛药理作用研究取得了很大进展。
脱色 活性炭为黑色细微粉末，无臭、无味。具有无毒，脱色、脱臭 效果良好的特点，可以反复使用，成本低，适合工业化生产的 需要。粉末活性炭具有惊人的比表面积(800"--'2000 m2／g)[62]， 当被脱除的有色物质的分子直径小于或等于活性炭孔的入口直 径时，可被活性炭吸附而起到脱色的效剽631。活性炭的脱色 效率高、速度快、成本较低，但也存在一些问题，如再生困难、 多肽和氨基酸损失率较高。吸附剂是酶解液脱色的主要影响因 素，虽然从液体中脱除颗粒活性炭比粉术活性炭容易得多，但 考虑到精制的需要，选择粉末活性炭并优化其脱色工艺。