血清清蛋白测定方法
答:临床血清蛋白的定量测定方法一般有凯氏定氮法、染料结合法和双缩脲比色法,这些方法具有操作简单、干扰物少、结果相对准确等优点。
1.凯氏定氮法:是目前国际上比较标准的检测蛋白质含量的方法。
其原理是将有机化合物和硫酸一起加热,使氮气受热转化为硫酸铵,并加入部分氢氧化钠进行蒸馏操作,使铵盐在此过程中会转化为氨,通过滴定确认最终的总氨量,最后的结果乘以规定的换算系数;
2.染料结合法:实验是基于蛋白质可以染色的原理。
在酸性条件下,蛋白质与一些染料发生反应,最后根据溶液的透明度得出蛋白质的含量。
但由于蛋白质变色反应的复杂性,对实验条件有一定要求;
3.双缩脲比色法:类似于染料结合法,在碱性环境下利用肽键与铜离子反应,最终生成一些有色产物。
在一定条件下,产品的颜色浓度与蛋白质成正比。
最后用分光光度法与标准溶液比较,从而知道其蛋白质含量。