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刚地弓形虫_遗传筛选与DHFR_TS相连的融合蛋白
检 纤 维 支气管镜检 和支 气管肺泡 灌洗
(B A L )
BA L
, 。
,
分子 量 可 筛 选 出 相 应 的 阳 性 克 隆
S E 凡犯 2 7
一
。
用 间 接 荧 光 染 色 和 PC R 方 法 检 查
PC
3 5 2 区域 的 免疫 原 性 很 差
,
不能通
t
中 包囊 或
。
特异性
D NA
。
对
PC P
P C
患 者更 多 见 呼 吸 困 难 之
PC P
症状
P
但 仅依 据 临 床标 准 区 别
。
与非
,
r r a e 氏肺 抱 子 虫 肺 炎 [ 英 ] 旧a g e v
J N
… /
,
是困 难的
该研 究 尽 管使用 了高 剂 量
,
r n T a
s
R
S犯
o T I- P M e d
H
路
(4 )一4 0 2 一 4 0 7
,
P
P C
与 其 它原 因 所 致 的 慢
。
。
PC R 和
乳 h m 杂交 分析转染 e
u
t
PC P
的 治疗预 后
TB
寄生虫 的整 合 基 因 时 发 现 在 没 有 乙 胺 嚓 陡
的 环境 下 连 续 传 代 培 养 的 转 染 寄生 虫 的整
,
根 据 马 拉维 国家 略 确定 涂片 阴性
, ,
控 制 中 心 制定 的 策
-
,
具 有 高 水 平 的 乙 胺 吻 吮抗
弓形 虫 结合 和 人侵几 乎 所有 的 哺 乳 类 细
,
性 因 此 已作 为 多种 转染 载 体 的 阳 性 选 择标 记
。
胞 人 侵时 虫 体 必 须 首先 与 宿 主 细 胞 表 面 分
子 识别 而 在 宿 主 细 胞 表 面 和 细 胞 介 质 普 遍
BK …
r 连 的 融 合 蛋 白 〔 ] 班又 lp e 英
P
a r
S i v ia l
/
E
即
,
P
(3 )
一 13 4 一 14 4
s r a
t iol
一2 0 0 1
,
98
s t a i l o
一2 0 0 1
n o r 从
…
/
,
9 8 (3 )
短 暂 和稳 定转染 载 体是 研究胞 内寄生 虫 刚地 弓形 虫 速殖子 的重要 分子 工 具 之 一
,
SE RA
氨 基 末端 的
SE 4 7 区 域 能
当速 殖子 与 肝素 于 3 ℃ 共 同 孵 育后 荧 7
,
诱 导产 生 抗 体 从 而 抑 制 寄生 虫 的发 育 现 有
刚地 弓形 虫表达 系 统均未 能成功短 暂或稳 定 表达
光很 快集 中为 较 大 的光 点 并 随 着 时 间延 长 其光 强 度 直径 和 数 目 不 断 增 加
于 D HFR
D H FR
,
一 16 7 一 17 0
已 有研 究 表 明 弓形 虫 和 疟 原 虫均 可 通
,
。
由
过 特定 的细 胞 器摄 取 营 养 物 质 是 否 存 在 特 异 的 受体介 导 的 (R M )细 胞 内 吞 作 用 尚不 清 楚
。
内包 含
一
2
个氨基 酸突变 的
n
它
3 S m T
,
在非洲
传变 异 〔 〕 e 英 朋b
P a a ito r s l
JP .
二
/ A n
n
T r p Me o d
医 院 内死亡 的 H IV 阳性 尸 检 中 仅 发现 2 %
9 %
一2 0 0 1
州m
o
,
95 ( 5
)
患有
,
P
,
P C
。
作者 采用 随机扩增 多 态 性 D
PC P 的 研究 集 中在 急
,
NA
片段 (S R A 1 7
1 10 )
xl l
一
和 (S 凡犯 2 7
2
-
镜观察 双 标 速殖 子 发 现 肝 素 定 位 于 虫 体 细
胞膜 并 迅 速 转 移 至 膜 下 包 被 于 泡状 结 构 内 穿 过 若 干光 学 截 面
, 。
,
分别 克隆到载体
一
D H 下R
3 m
一
FL G T S -
,
此 衔接 区 主 要 起 连 接 D
H FR 和 FL A G
S T
的作 用
。
将胞 外 活 性 速殖 子与 异 硫氰 酸 荧光 素标
记的肝 素 (H F )于 0 ℃ 共 同孵 育 后 在虫 体 近
顶 点 的 区 域 发 现 较 小 的点 状 荧 光 表 明 肝 素 可 以 结 合 于 虫 体 而 且 可 能 的 结 合 受 体 主要
例 接受 了 支 气管 镜 检 和
P CR
, 。
经 间接
,
免 疫荧 光染色 和
(徐 文 岳 摘
检测 诊 断 1 例 (9 % ) 7
黄复生 校 )
PC P P
患者
。
临床症 状分 析结 果发 现 与 非
,
10 2
马拉 维 地 区 涂 片 阴 性 肺 结 核 患 者 的 卡
s
P C P C
患者 相 比
P
PT B
。
在
1995
一
19 6
年 间 的不 同季节 从 津 巴
1 4
.
,
B
感 染 者被 误 认 为 是
布韦 东北 地 区 的 一 个曼 氏血 吸 虫 病 流 行 区吉
i 尔歇 (C h
26 1
.
本文 作 者 选 择 马 拉 维 首 都 利 隆 圭 这 一
H IV 严 重 流 行 区 为 研 究 地 区
,
S T S T
,
;
然后 分 别转 染
~
1〕 FR H
一
一
S T
、
D H FR FL G
一
-
H 和 1〕 F R S E R A T S 到 刚 地 弓 形 虫 R H
随着 孵 育 时 间 的 延 长 特异 性 结 合 和 内 化 聚
株 在 乙 胺嗜 陡 存 在 下 检 测 已 转 染 寄 生 虫 裂 解
上 构 建 了 载 体 D H F R r 己m 3
1 10 T S
F L G S R A 17
一
此 时 链 霉 蛋 白酶 部
, , 。
和
D HFR
n
论 m 3 FL G S R 八2 2 7 3 2 5
一 -
-
分消 化速 殖 子 表面 蛋 白 对 荧 光 无影 响 可 能
是 肝素及 其 受体 被 细胞 内环 境保 护 的 缘故
论m 3 F L G S 凡犯 2 7
和 D HF
Rr己
3 n r
F - LG S R A 1 7
-
一
11 0
一
力 明 显 低 于 前 两 组 转 染 寄生 虫 数 目增 倍 的 时 间延 长
,
,
S T
的裂 解 细 胞 能
PC P
所 占比例 2 是否 可 以 根据 临 床 或 放射 )
,
线 图 像检 查 鉴 别 性 咳嗽疾 病 3 )
,
。
结果 共 检 查 3 5 例 患 者 H IV 阳 性 率 2
%
因此 本实 验 为 分 析 弓 形 虫 等胞 内 寄 生 虫 外 源基 因 功 能 提 供 了 一 种 新 的 快 速 稳 定
的 转染 载 体
。
3 3 (2 7 8 / 1 )
该组 患 者 因 各 种 原 因 只
BA L
,
8 1 6
荧光 多糖 已 被虫 体 内 化
,
、Байду номын сангаас
,
,
。
这些 荧 光
,
E S
RA
功 能区
一
点在不 同 的 显 微 镜 位 面 经 常可 以 见 到 提 示
。
7 氨基 末 端 1
作者 首先将 编码 S R A E 11 和梭基末 端 22 一 35 氨 0 7 2
。
一
激光 共 聚焦 扫 描 电
,
基 酸的 D
352 )
一
D H F R FL G T S 一
组和
D H FR -
组两 项 指 标 均 无 区 别 提 示 F LG A 的插
,
两 条 多 肤 在 凝 胶 上可 增 加
,
3
一
4
倍 但不
,
I〕 F R H
-
和
S T
一
的酶活 性; 但 是 5 3
2 TS
一
能结 合 于 未 交联 的 凝 胶树 脂 表 明 它 们 的 结
。
千米 的 8 个 不 同地 点 采集 螺 标 本
D NA
。
~
he
)高 原 草 地 彼 此 相 距
一
。
从
调 查研究 了
PT 1 3
螺 头足 部顶 端 提取 基因组
用 2 对随 9
,
) l 该 地 区 被 登 记 为 涂 片 阴性
患者中
机 寡 核 昔 酸 引 物 进 行 凡锣 D
PC R
2 其中 1