三、马铃薯组织培养参考资料
取材和培养一般多采用在室内发芽，芽经热处理 （ 38℃ ） 2周。然后取顶芽或侧芽 1厘米的茎尖，在自 来水下冲洗干净，无菌条件下先用 70％的酒精浸润组织 15-20秒， 再用 2％的次氯酸钠溶液浸泡 4--5min， 然后用无菌水冲洗 3次。把消毒好的芽放在解剖镜下仔细 剥离，逐层剥去幼叶，露出圆滑的生长点，可以留 1-2个 叶原基,0.2— 0.3毫米，随即接种于 MS液体培养基上，每升加 0.1mgNAA, 0.2mgGA3,0.5BA,2%蔗糖,p H 值 5.8。培养条件,21~25℃,20003000 lx,12h/d。 2-3周愈伤,4-5周绿点,3--6月长成 2-3厘米小芽，越慢越好， 出芽很快的扔掉。
继代、生根培养
• 继代和生根培养成功的马铃薯脱毒苗，经 ELISA （试剂盒）鉴定后（试管苗应每 3月检测一次， 每年 4 次） 鉴定后，采用固体、液体培养基相结合方法 扩繁。取试管苗单节切段扦插在 （或平放）固体培养基上，每瓶可插 20 个左右茎段，经 20d左右发育成 5~10cm 高小植株，继续进行切段繁殖，此法速度快，每 月可繁殖 5~8倍，试管苗多节接种在液体培养基 上，进行浅层静止液体培养。
马铃薯的组织培养
生物工程学院 生物技术及应用12043班
李江涛
目录
一、马铃薯的简介 二、马铃薯的生ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ学习性 三、马铃薯组织培养参考资料 四、我的设计方案
一、马铃薯的简介
马铃薯是茄科属植物，多年生草本植物，但 作一年生或一年两季栽培。地下块茎呈圆、卵、 椭圆形等，有芽眼，皮红、黄、白或紫色。地上 茎呈棱形，有毛。奇数羽状复叶。聚伞花序顶生， 花白、红或紫色。浆果球形，绿或紫褐色。种子 肾形，黄色。多用块茎繁殖。性喜冷凉高燥，对 土壤适应性较强，但以疏松肥沃的砂质土为佳。 在中国各地，马铃薯的称呼又有不同，东北称土 豆、华北称山药蛋、西北称洋芋。
驯化
• 驯化 为增强试管苗对温室内环境条件的适应能力， 移植前对试管苗要进行光、温锻炼。 炼苗期温室内的温度：白天 23~27℃,夜间不低于 14℃ 。炼苗的具体方法是：移植前 7d左右， 将长有 3~5片叶、高 2~3cm的试管苗，在不开瓶 口的状态下，从培养室移至温室排好。为防止强 光、高温灼伤试管苗，在温室顶上加盖一层黑色 遮阳网。 滨州职业学院
继代和生根培
继代和生根培养成功的马铃薯脱毒苗，经 ELISA （试剂盒）鉴定后（试管苗应每 3月检测一次，每年 4 次） 鉴定后，采用固体、液体培养基相结合方法扩繁。 取试管苗单节切段扦插在 （或平放）固体培养基上，每瓶可插 20 个左右茎段，经 20d左右发育成 5~10cm 高小植株，继续进行切段繁殖，此法速度快，每月可繁殖 5~8倍，试管苗多节接种在液体培养基上，进行浅层静止 液体培养。 滨 州 职 业 学 院培养基,MS+NAA0.2-0.5+D-泛酸钙 10,3%蔗糖,20-25度,30004000LX,14-16小时光照，每 3周继代一次，单芽茎段约 1 厘米，可插也可平放，原则试管苗用 2年 — 3年。 滨 州 职 业 学 院滨 州 职 业 学 院
我的设计方案
• 外植体的选择处理 • 初代培养基的选 • 继代、生根培养基的选择及培养 • 驯化
外植体的选择与处理
取材一般多采用在室内发芽，芽经热处理 （ 38℃ ） 2周。然后取顶芽或侧芽 1厘米的 茎尖，在自来水下冲洗干净，无菌条件下先 用 70％的酒精浸润组织 15-20秒，再用 2％ 的次氯酸钠溶液浸泡 4--5min，然后用无菌水 冲洗 3次，消毒好的芽放在解剖镜下仔细剥离， 逐层剥去幼叶，露出圆滑的生长点，可以留 1-2个叶原基,0.2—0.3毫米。
继代、生根培养基的选择
• ,MS+NAA0.2mg-
NAA
0.5+D-泛酸钙
10,3%蔗糖,20-25
0.2
度,3000-
4000LX,14-16小时
0.3
光照，每 3周继代 一次，单芽茎段约
0.4
1厘米，可插也可平
0.5
放，原则试管苗用
2年 — 3年。
驯化
• 炼苗期温室内的温度：白天 23~27℃,夜间 不低于 14℃ 。炼苗的具体方法是：移植前 7d左右， 将长有 3~5片叶、高 2~3cm的试管苗，在 不开瓶口的状态下，从培养室移至温室排 好。为防止强光、高温灼伤试管苗，在温 室顶上加盖一层黑色遮阳网。
• 马铃薯具有很高的营养价值和药用价值， 一般新鲜薯中所含成分：
• 淀粉9～20％，蛋白质1.5～2.3％， 脂肪0.1～1.1％，粗纤维0.6～0.8％。 100g马铃薯中所含的营养成分：热量 66～113J，钙11～60mg，磷15～ 68mg，铁0.4～4.8mg，硫胺素0.03～ 0.07mg，核黄素0.03～0.11mg，尼克 酸0.4～1.1mg 。除此而外，马铃薯块 茎还含有禾谷类粮食所没有的胡萝卜素 和抗坏血酸。从营养角度来看，它比大
米、面粉具有更多的优点，能供给人体
大量的热能，可称为“十全十美的食
二、马铃薯的生物学习性
马铃薯性喜冷气候，不耐高温和霜冻，解除 休眠的块茎 4℃ 下发芽，发芽适温为 12~18℃ 。 地上茎叶生长温度为 17~21℃,25℃ 以上时生长 不良，叶变小， 超过 30℃ 和 7℃ 以下茎叶停止生长,-1℃ 时受冻。 块茎形成要求昼温 14~24℃,夜温 12~14℃,土温 16~18℃ 。土温 20℃ 以上时块茎形成缓慢，而 且容易引起退化，高温下养分多用于芽和匍匐茎 生长不易形成块茎,25~30℃ 时已经长成的块茎也 变成细长茎，结薯期要求 12h左右的短日照和疏 松、湿润、肥沃以及通气良好的土壤条件。土壤 板结，薯块表面粗糙和薯形不整。
初代培养基的选择 与培养
• MS液体培养基上，每 升加 0.1-
0.3mgNAA,0.2-
0.4mgGA3,0.40.6BA,2%蔗糖,p H 值 5.8。 培养条 件,21~25℃,20003000 lx,12h/d。
NAA GA3 BA 0.1 0.2 0.4 0.2 0.3 0.5 0.3 0.4 0.6