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④过程
专题1 基因工程
第一步：加热至 90～95 ℃，__D__N_A__解__链___； 第二步：冷却至 55～60 ℃，_引__物___结合到互补 DNA 链； 第三步：加热至 70～75 ℃，__热___稳__定__D_N_A__聚__合__酶___(Taq 酶)从
引物起始进行互补链的合成。
(2)受体细胞：原核细胞(使用最广泛的是大肠杆菌细胞)。
(3)原核生物的特点：繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少等。
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专题1 基因工程
四、目的基因的检测与鉴定(阅读教材 P13～P15) 1.分子水平检测 (1)检测转基因生物的 DNA 上是否插入了目的基因。 方法：___D__N_A_分__子__杂__交_____技术。 (2)检测目的基因是否转录出 mRNA。 方法：___分__子__杂__交_____技术。 (3)检测目的基因是否翻译成蛋白质。 方法：_抗__原__—__抗__体_____杂交技术。 2.个体生物学水平鉴定：抗虫、抗病、抗逆性状的有无及程度。
启动子
终止子
标记基因
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专题1 基因工程
基因表达载体的组成 两子启动和终止；目的基因在中间；标记基因来筛选。
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专题1 基因工程
3．基因表达载体的功能：通过基因表达载体将__目__的__基__因____导 入受体细胞。 三、将目的基因导入受体细胞(阅读教材 P11～P13) 1.转化的概念：目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内 _维__持__稳__定__和__表__达_____的过程。 2.将目的基因导入植物细胞 (1)__农__杆__菌__转__化____法：将目的基因导入双子叶植物和裸子植物。 (2)基因枪法：将目的基因导入单子叶植物常用的方法。 (3)__花__粉__管__通__道____法：我国科学家独创的一种方法。
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2.目的基因的获取方法
专题1 基因工程(1)从基因中获取①基因：将含有某种生物不同基因的许多 DNA 片段，导入 _受__体__菌__的__群__体___中储存，各个受体菌分别含包：含包一含种一生种物生所物__有的__的__一__基_部_因_分_基因
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类型
(1)
专题1 基因工程
(2)
(3)
(4)
过程
获取 方法
_基__因__组__文__库___
_部__分__基__
人__工__合__成__
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专题1 基因工程
探究 2 比较 PCR 技术与 DNA 复制的不同点
项目
DNA 复制
PCR 技术
解旋方式
__解__旋__酶____催化
DNA 在____高__温____作用下 变性解旋
场所
___细___胞__内____(主要在细 __细__胞__外____(主要在扩增仪
胞核内)
内)
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专题1 基因工程
项目
DNA 复制
PCR 技术
__解__旋__酶____、普通 __耐__热__的__D__N_A__聚__合__酶___(Taq 酶
③提取依据：基因的核苷酸序列、基因的功能、 __基__因__在__染__色__体__上__的__位__置__、基因的转录产物 mRNA，以及基因
的表达产物蛋白质等特性。
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专题1 基因工程
(2)利用 PCR 技术扩增目的基因 ①PCR 的含义：是一项在生物体外复制__特__定__D_N__A_片__段____的核 酸合成技术。 ②目的：短时间内大量扩增目的基因。 ③原理：_D__N_A__双__链__复__制____。
的 DNA 聚合酶等 酶)
温度条件 细胞内_温__和__条件 需控制温度，在较高温度下 进行
(4)目的基因导入双子叶植物一般采用农杆菌转化法。( √ )
(5)基因工程常用的受体细胞都是动植物的体细胞。( × ) (6)(2018·西宁高二期末)基因工程是否成功需进行个体生物学水
平上的鉴定。( √ )
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专题1 基因工程
目的基因的获取 探究 1 目的基因获取的方法 结合下面过程，探究获取目的基因的方法：
专题1 基因工程
1．2 基因工程的基本操作程序
专题1 基因工程
1．掌握目的基因获取的常见方法。(难点) 2.学会基因表达载 体构建的方法和要求。(重、难点) 3．理解目的基因导入受体 细胞的具体过程。(重点) 4.掌握目的基因检测与鉴定的具体操 作。
专题1 基因工程
一、目的基因的获取(阅读教材 P8～P11) 1.目的基因：主要是指编__码__蛋__白__质__的基因，也可以是一些具有调 控作用的因子。
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3.将目的基因导入动物细胞
专题1 基因工程
(1)方法：__显__微__注__射__法____。 (2)常用受体细胞：_受__精__卵_______。
4．将目的基因导入微生物细胞
(1)方法 ① 用 __C__a_2_＋___ 处 理 细 胞 ， 使 细 胞 处 于 一 种 能 吸 收 周 围 环 境 中 DNA 分子的生理状态(这种细胞称为___感__受__态__细__胞_____)。 ②感受态细胞吸收__重__组__表__达__载__体__D_N__A_分__子______。
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连一连
专题1 基因工程
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判一判
专题1 基因工工程操作程序的核心步骤是目的基因的获取。( × )
分析：核心步骤为基因表达载体的构建。
(3)标记基因的作用是为了鉴别受体细胞中是否含有目的基因，
从而将含有目的基因的细胞筛选出来。( √ )
如果目的基因较小，核苷酸序列又已知，可通过 DNA 合成仪用
_化__学__方__法___人工合成。
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专题1 基因工程
二、基因表达载体的构建(阅读教材 P11) 1．构建基因表达载体的目的 (1)使目的基因在受__体__细__胞__中稳定存在，并且可以遗__传__给下一代。 (2)使目的基因能够表__达__和发挥作用。 2．基因表达载体的组成