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生物实验:大肠杆菌的分离与培养


实验结果与分析
•加氨苄青霉素 •所加菌液:普通 •分离方法:划线 •现象:有菌,集中 分布,不均匀,相霉素 •所加菌液:混合 •分离方法:涂布 •现象:分布均匀, 数量较多,但有黄色 透明杂菌。
实验结果与分析
实验反思与总结
这次实验过程中,总的来说较上次在分工 方面有了显著的提高,故而实验做的比较有 序。 但美中不足的是实验结果依然与预期有不 同之处:①培养基被标记错误②杂菌较多, 无菌操作不够规范。 可能还是对实验的预习不够明确,所以在 实验时总是忘记要在酒精灯旁操作这一要求, 在下次试验中一定会多加注意。
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实验步骤及现象
2.大肠杆菌单克隆的分离与培养 ①设置对照组(6号培养皿)和实验 组(5号培养皿)。 ②向实验组培养皿中加入氨苄青霉素
实验步骤及现象
③用接种环划线 i.将接种环放在火焰上灼烧,直到其烧红。 ii.在火焰旁冷却接种环,同时打开离心管。 iii.在火焰旁将已冷却的接种环伸入普通大肠杆菌 菌液中,蘸取一环菌液,盖上试管。 iiii.左手将皿盖打开一条缝隙,右手将沾有菌种的 接种环迅速伸入平板内,划三至五条平行线,盖 上皿盖。 iiiii.灼烧接种环,待其冷却后,从第一区域划线 的末端开始往第二区域内划线,重复这一操作, 在三、四、五区域划线。
4号 混合 涂布
6号 普通 划线
实验步骤及现象
1.筛选分离含有重组DNA的受体细胞 ①设置对照组(2、4号)和实验组(1、3 号); ②向实验组培养皿中加氨苄青霉素 ③向1、2号加含有重组DNA的大肠杆菌 向3、4号加混合大肠杆菌(既有普通的, 也有转基因的)
实验步骤及现象
④用涂布器涂布 i.用酒精灯灼烧涂布棒(靠近涂布端的手柄也 要灼烧)静置冷却(以防温度过杀死微生物)。 ii.用移液枪取50μl的大肠杆菌加至培养基上。 1000μl=1ml iii.用涂布棒将其均匀涂布于平板上。 iiii.静置5min,倒置培养于37°C的培养箱中。 ⑤在培养皿壁上写、姓名、实验名称,一天后 调查统计各个处理菌落数目。
实验结果与分析
•未加氨苄青霉素 •所加菌液:混合 •分离方法:涂布 •现象:分布均匀, 但有杂菌。
实验结果与分析
•未加氨苄青霉素 •所加菌液:普通 •分离方法:划线 •现象:无大肠杆菌, 但有几个黄色杂菌。
实验结果与分析
•加氨苄青霉素 •所加菌液:转基因 •分离方法:涂布 •现象:分布均匀, 相对较多。
实验二 大肠杆菌的分离与培养
实验时间:2011.5.23
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实验原理 实验器材与药品
实验步骤及现象
实验结果与分析 实验反思与总结
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实验原理
1.利用液体培养基可以扩大培养大肠 杆菌; 2.利用固体培养基对大肠杆菌进行划 线分离、培养,目的是获得单菌落; 3.利用附加抗生素的培养基筛选含有 重组DNA的受体细胞。
实验步骤及现象
⑤划完线在培养壁上写班级、性名、实验 名称,放在37°C培养箱中倒置培养,一天 后处理菌落数目。
3.配制LB固体培养基 ①1.28g固体培养基,40ml的水(一瓶加氨 苄青霉素,另一瓶不加) ②灭菌 ③倒平板
实验结果与分析
•未加氨苄青霉素 •所加菌液:转基因 •分离方法:涂布 •现象:分布均匀, 数量适中。
实验器材与药品
器材:高压灭菌锅,培养皿,恒温水浴锅, 恒温培养箱,摇床,酒精灯,涂布器,接 种环,移液枪,电子秤,锥形瓶;
药品:LB液体和固体培养基,去离子水, 70%酒精,氨苄青霉素,大肠杆菌,含有 重组DNA的大肠杆菌。
实验步骤及现象
1号 转基因 涂布
3号 混合 涂布
5号 普通 划线
2号 转基因 涂布
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