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纸片法和速率法测定胆碱酯酶的比较

纸片法和速率法测定胆碱酯酶的比较
【关键词】 CHE;纸片法;速率法
[摘要]目的:了解胆碱酯酶(CHE)纸片法和速率法两种方法的相关性,便于临床上对有机磷中毒患者的疗效观察和预后估计。

方法:在日立7060全自动生化分析仪上测得CHE减少的标本(其中包括有机磷中毒患者、肝病患者、低蛋白血症等各类患者标本),采用美国国家临床实验室标准化委员会(NCCLS)EP9A文件方案,每天再从其中随机选取8份标本,并分别用纸片法和速率法按顺序1周~8周同时进行测定,再按相反顺序8~1重复测定,共测定5 d,记录结果,然后对两种方法得出的结果进行单位比较。

结果:纸片法的结果只有几个单位值,受主观因素影响,而速率法是国际单位数值大且较精确,要做统计学比较是不现实的,只能从数值上做粗略的估计。

纸片法的0 u~8 u应该是速率法的1 000 u以下,纸片法的15 u~19 u 应该是速率法的1 000 u~2 000 u,纸片法的23 u~26 u应该是速率法的2 200 u~3 500 u,纸片法的30 u~34 u应该是速率法的3 600 u~4 300 u。

结论:纸片法是目测的试验,比色板只有简单几个单位值,而且受主观因素影响较大,误差较大,准确性和不高,难以标准化。

速率法不受人为因素影响,而且准确性和重复性高,易于标准化。

两者要做统计学比较是不现实的,只能从数值上做粗略的估计。

建议临床上对有机磷和氨基甲酸酯类中毒的患者,进行疗效观察和预后估计时,动态观察CHE以速率法检测为准。

[关键词] CHE;纸片法;速率法
血清或血浆胆碱酯酶(CHE)是临床上对有机磷和氨基甲酸酯类中毒以及肝病患者的一项重要检测指标。

过去对有机磷和氨基甲酸酯类中毒鉴别和中毒程度鉴定常用方法是用纸片法测定CHE,现在由于全自动生化仪广泛应用,日常对有机磷和氨基甲酸酯类中毒以及肝病患者测定CHE多采用速率法,但是夜间为了对有机磷中毒患者鉴别和中毒程度鉴定,测定CHE还多采用纸片法。

由于两种方法采用单位不同,这就给临床上观察有机磷中毒患者的疗效观察和预后估计造成一定困难。

目前还没有对速率法和纸片法相关性的报道,为了解这两种方法的相关性,分别用这两种方法同时对临床上各种CHE减少的患者进行检测。

1 材料和方法
1 仪器
日立7060全自动生化分析仪,37 ℃恒温箱,计时器。

2 试剂
速率法用山东3 V试剂公司生产的CHE试剂盒,纸片法用潍坊市康华公司生产的CHE试纸。

3 原理
纸片法:血清中CHE与含有氯化乙酰胆碱和溴麝香草酚蓝混合液的纸片作用,生成胆碱与醋酸,由于醋酸可使pH下降,纸片由深蓝变成黄绿色,经一定时间后,取出纸片与比色板对照可得CHE活性。

速率法:丁酰硫代胆碱+Н2О。

表1 纸片法和速率法结果比较(略)注:i为标本号,X1、X2、分别为速率法两次测定结果和平均值,Y1、Y2、分别为纸片法两次测定结果和平均值。

纸片法如果值太低延长一
倍时间后再观察结果。

以上单位已做舍去小数点后数字处理。

纸片法是目测方法,参考值为30 u~80 u,结果只有0、8、15、23、30、38、45、60、80几个单位值,受主观因素影响,误差较大,精确度不高。

速率法的参考值为4 300 u~13 200 u,单位是国际单位数值大且较精确,两者要做统计学比较是不现实的,只能从数值上做粗略的估计。

从表1估计,纸片法的0 u~8 u应该是速率法的1 000 u以下,纸片法的15 u~19 u应该是速率法的1 000 u~2 200 u,纸片法的23 u~26 u应该是速率法的2 300 u~3 500 u,纸片法的30 u~34 u应该是速率法的3 600 u~4 300 u。

4 讨论
人体CHE可分为二种,一种是乙酰CHE(AcCHE),由神经细胞和骨髓新生细胞所制造,主要存在于中枢神经系统灰质和红细胞中,其生理作用主要是水解乙酰胆碱为胆碱和醋酸;另一种是丁酰CHE(BuChE),由肝细胞制造,主要存在于血浆、肝脏和神经系统白质中,生理作用除了水解乙酰胆碱还作用于其他胆碱酯类。

临床常用的血清CHE测定主要是BuCHE的测定,CHE的测定是临床上对有机磷和氨基甲酸酯类中毒以及肝病患者的一项重要检测指标。

由于CHE减少也可见于营养不良、重症贫血、严重结核病、晚期血吸虫病等,所以鉴别有机磷和氨基甲酸酯类中毒,应排除以上因素。

过去对有机磷和氨基甲酸酯类中毒鉴别和中毒程度鉴定常用方法是用纸片法测定CHE,由于有机磷和氨基甲酸酯类中毒患者要动态观察CHE的变化,而纸片法的结果只有0、8、15、23、30、38、45、60、80简单几个单位值,很难。

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