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胆碱酯酶的测定

胆碱酯酶(CHE)的测定
一、原理:血清及组织中CHE使乙酰胆碱水解成胆碱和乙酸,未被水解的剩余乙酰胆碱与羟胺作用生成乙酰羟胺,再与铁离子在酸性溶液中形成棕色复合物,根据颜色深浅推算出酶的活力。

二、试剂:
1、试剂一:溶液60ml×1瓶,室温保存。

2、试剂二:乙酰胆碱粉剂×1支,-20℃保存,稀释液5ml×1瓶,4℃保存。

80μmol/ml 乙酰胆碱底物贮备液的配制:将一支乙酰胆碱碱粉剂倒入5ml稀释液中即成,4℃。

8μmol/ml 乙酰胆碱应用液的配制:贮备液:试剂=1:9稀释。

3、试剂三:甲粉剂×1支;乙液30ml×1瓶;丙液30ml×1瓶;室温保存。

试剂三应用液的配制:每次测试前将甲粉倒入乙液中,充分摇匀,根据需要量将甲乙混合液与丙液等量混合,充分混匀,配成试剂三应用液,现用现配。

4、试剂四:溶液30ml×1瓶,室温保存。

5、试剂五:溶液20ml×1瓶,室温保存。

6、试剂六:粉剂×1瓶,稀释液30ml×1瓶,测试前将稀释液倒入粉剂中,充分混匀,避光
4℃冷藏。

测各管吸光度值。

四、计算:
1、定义:血清中CHE的计算:每毫升血清在37℃和底物作用20分钟,分解1μmol乙酰胆
碱为1个活力单位。

2、计算公式:
血清中CHE活力。

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