茶多酚的含量测定高锰酸钾直接滴定法
目的:掌握高锰酸钾直接滴定法测定茶叶中茶多酚含量的原理及操作
原理
茶叶中茶多酚易溶于热水,在用靛红作指示剂的情况下,样液中能被高锰酸钾氧化的物质基本上都属于茶多酚物质。
根据
消耗
1、
容至4~6h,
2、
30.630%草
的浓硫酸10mL
1
100mL,
,开动磁
五、结果计算
式中:X—茶多酚的含量,% ,B—空白消耗的高锰酸钾毫升数,mL A—样品消耗的高锰酸钾毫升数,mL ω--高锰酸钾的浓度,% ,m—样品的质量g,V1—测定用供测试液的体积,mL ,V2--供测试液的体积,mL
酒石酸铁比色法
原理:
茶叶中多酚类物质占茶嫩梢干重的20%~35%,由约30种以上的酚类物质所组成,通称茶多酚。
按其化学结构分为四类:(1)儿茶素类,属黄烷醇类;(2)黄酮及黄酮醇类;(3)花白素及花青素,即羟基-[4]-黄烷醇及其钾盐;(4)醋酸及缩酚酸类。
其中以黄烷醇类化合物最重要(占多酚的80%左右)。
纯儿茶素一般为白色无定形粉末,在空气中极易氧化成棕色物,能溶于水、乙醇、甲醇、丙酮、乙酸乙酯等有机溶剂中。
茶多酚能溶于水、乙醇、
甲醇、丙酮、乙酸乙酯,微溶于油脂。
对热、酸较稳定,2%的溶液加热至120 ℃并保持30min,
无明显变化。
在碱性条件下易氧化变质。
酒石酸铁能与茶多酚生成紫褐色络合物,络合物溶液颜色的深浅与茶多酚的含量成正比。
因此可以用比色方法测定。
该法可避免高锰酸钾滴定法所产生的人为视觉误差。
茶多酚的测定方法有高锰酸钾直接滴定法和酒石酸铁比色法,由于高锰酸钾直接滴定法操作比较复杂,且靠肉眼观察颜色判断终点,如果样品溶液颜色较深时,可能影响测定结果。
本实验将应用酒石酸铁比色法测定茶多酚的含量。
仪器与试剂
(l
540nm
1、、磷酸盐缓冲液在常温下容易生长霉菌,放冰箱中保存或临用时现配。
2、样品溶液制备中的注意事项:
(1)较透明的样液,如果味茶饮料,将样液充分摇匀后,直接取样测定
(2)较浑浊的样液,如果汁茶饮料、奶茶饮料等,称取充分混匀的样液25mL于50mL容量瓶中,加95%的乙醇15mL充分混匀,放置15min,用水定容至刻度,过滤。
(3)含有碳酸气的样液,如农夫汽茶,量取充分混匀的样液100mL于250mL的烧杯中,称取其总量,于电炉上加热至沸,在微沸状态下加热10min,以将二氧化碳排除,放冷,用水补足原来的质量,摇匀,
备用。
测定
准确吸取试液1 ml,注人2 5 m L的容量瓶中,加水4 ml和酒石酸亚铁溶液5 ml,充分混合,再加p H 7 . 5 磷酸盐缓冲液至刻度,用10mm比色杯,在波长540nm处,以试剂空白溶液作参比,测定吸光度( A) 高效液相色谱
采用高效液相色谱法测定绿茶中茶多酚的含量。
在色谱柱为KromasilC18、流动相为乙酸:甲醇:N,N-二甲基甲酰胺:水=1:1:40:58(V/V)、色谱柱温30℃、进样量10μL、检测器为紫外检测器、检测波长280.0nm的色谱条件下对绿茶中茶多酚含量进行测定。