阿司匹林中杂质分析方案
一、工作目标
1.知道阿司匹林杂质分析的主要内容
2.掌握阿司匹林杂质分析的方法原理
3.掌握阿司匹林的杂质分析的相关操作步骤
4.知道高效液相色谱法相关参数的最佳条件的选择
5.巩固HPLC的相关操作流程
二、工作内容
1.对工作内容有一个全面的了解，并确定一个初步的分析方案
2.对方案的可实施性进行探讨，并最终确定实验方案
3.经讨论列出准备单（仪器、试剂）
4.杂质水杨酸的测定
5.游离水杨酸的测定
6.精密度的试验
7.水杨酸的线性关系
8.结束工作（仪器的清理与归还）
9.数据的处理、问题讨论与总结
三、工作安排
四、工作步骤
1.实验步骤
1)色谱条件的选择
2)色谱柱：C18（200×4.6mm，5μm）
3)流动相：水：乙腈：磷酸=300：200：1
4)检测波长：303nm
5)流速：1.0ml/min
6)柱温：25℃
2.溶液的配制
1)水杨酸对照样品：
精密称取水杨酸对照样品0.01001g，置于100ml容量瓶中，加乙腈—甲酸（99：1）溶液使之溶解并稀释至刻度，摇匀，为浓溶液。

精密吸取此溶液5.0ml，置于50ml容量瓶中，加乙腈—甲酸（99：1）溶液稀释至刻度，摇匀，备用。

2)阿司匹林对照品溶液：
精密称取阿司匹林对照品0.1012g，置于100ml容量瓶中，加乙腈—甲酸（99：1）溶液使之溶解并稀释至刻度，摇匀，备用。

3)水杨酸与阿司匹林混合溶液：
精密吸取上述水杨酸对照品的浓溶液5.0ml，置于50ml容量瓶中，用上述阿司匹林对照品溶液稀释至刻度，摇匀，备用。

4)试样溶液：
精密称取本品0.15g，置于50ml容量瓶中，加乙腈—甲酸（99：1）溶液适量，振摇溶解并稀释至刻度，摇匀，备用
3.样品的测定
分别移取乙腈—甲酸（99：1）溶液（空白）、水杨酸对照样品、阿司匹林对照品溶液、水杨酸与阿司匹林混合溶液、阿司匹林试样溶液各20μl，分别
注入液相色谱仪，记录色谱图。

4.检查游离水杨酸：
将试样溶液取20μl注入液相色谱仪，记录色谱图；另精密称取水杨酸对照品10mg，置于100ml容量瓶中。

加乙腈—甲酸（99：1）溶液适量，振摇溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取3.0ml，置于100ml容量瓶中，加乙腈—甲酸（99：1）溶液稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液，同法测定。

按外标法以峰面积计算，即得。

试样中水杨酸含量不得超过0.1%。

5.精密度试验：
取检查游离水杨酸的对照品溶液，照检查游离水杨酸的方法，重复进样6次，得到水杨酸的一组峰积分面积，计算RSD。

6.水杨酸的线性关系：
精密称取水杨酸对照品0.0101g，置于100ml容量瓶中，加乙腈—甲酸（99：1）溶液使之溶解把那个稀释至刻度，摇匀，精密量取5.0ml，置于50ml容量瓶中，用乙腈—甲酸（99：1）溶液稀释至刻度，摇匀。

精密量取0.25、0.5、1.0、2.0、3.0、5.0、10.0ml分别置于10ml容量瓶中，各加乙腈—甲酸（99：1）溶液稀释至刻度，摇匀，作为标准溶液。

分别取20μl注入液相色谱仪，照检查游离水杨酸的方法吃的顶。

记录色谱图、以浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，进行回归处理。

7.仪器试剂准备单
1)试剂
2)仪器
8.注意事项
1)阿司匹林的稳定性差，所以测定的溶液应即配即用。

（时间过长，峰面积会
相应增加，放置约1.5h时，水杨酸的峰面积增加近一倍。

）
2)溶液的配制一定要精确称量，配制标准溶液的浓度一定要准确。

3)每一次进样前都应对紫外检测器进行校零，方能进行测定。

4)检测波长可以在测定时根据不同型号的仪器进行最佳比波长的扫描
5)流速在测定时可以根据分离效果的好坏进行相应的调整，以求达到最佳的
分离效果
6)流动相可以在线混合，选择最佳的流动相配比。

五、问题与讨论
1.溶解样品的溶剂和流动相不同，为什么不可以用流动相直接配制样品？
2.需要测定水杨酸的最低检出限吗？
3.测定水杨酸的回归性有什么作用及意义？
六、工作评价标准。