稳定性试验总结复方双氢青蒿素片稳定性试验总结报告张美义、肖文中、林燕芳、詹利之摘要:复方双氢青蒿素片是由双氢青蒿素、磷酸派喹、甲氧苄啶三种主要成分组成。
本品经过强光照射试验、高温试验、高湿试验、室温空气放置试验等影响因素试验，以及加速试验、室温留样考察等试验，证明本品除在高温80℃下，双氢青蒿素不稳定外，其他成分在各种试验条件下均比较稳定。
关键词：稳定性影响因素加速试验室温放置一、试验材料与方法1.样品来源：复方双氢青蒿素片，批号：由重庆通和制药有限公司提供，批号：。
981020批、981021批、981022批共三批（影响因素试验使用981020批），按临床用药质量标准（草案）检验符合规定。
2.主要试验仪器：高效液相色谱仪：岛津LC-10AT色谱柱：YWG C18 10μm 250×46mm紫外可见分光光度计：TU-1901电子分析天平：SHINKO SH-210R智能溶出度试验仪：ZRS-6型3.试验方法：（1）影响因素试验样品除去外包装，样品在裸露条件下进行观察。
收集于网络，如有侵权请联系管理员删除①强光照射试验：将复方双氢青蒿素片置于平皿中，于室温3600Lx光下照射，并于5、10天各取样测定一次。
②高温试验：把复方双氢青蒿素片置于密闭器皿中，分别置于40℃、60℃、80℃的恒温箱中，在3天、5天、10天各取样测定一次。
试验前供试品先准确称重，样品取出时再准确称重。
③高湿试验：把复方双氢青蒿素片置于平皿中，放在相对湿度分别为75%及92.5%条件下的封闭干燥器中，恒温25℃，分别于5、10天取样观察和检测。
④室温空气放置试验：供试品置于室温空气中，第5、10天各取样测定一次。
（2）加速试验：将铝箔包装的复方双氢青蒿素片（模拟上市包装）3个批号的样品放置在40℃，相对湿度为75%的条件下三个月，每月每批样品检测一次（3）室温留样观察试验：将铝箔包装的复方双氢青蒿素片（模拟上市包装）3个批号的样品置于室温条件下，定期分别于0、3、6、12、18、24、36个月，按考察项目进行检测。
4.考察项目：①外观色泽；②片芯性状；③溶出度；④含量；⑤色谱检查分（降）解产物。
5.考察项目的检测方法：（1）、外观色泽、片芯性状用肉眼观察。
（2）、含量：双氢青蒿素取本品10片，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于双氢青蒿素0.1g）置研钵中，加适量无水乙醇充分研磨，使双氢青蒿素溶解，以无水乙醇约75ml将研钵中的供试品定量移入100ml量瓶中，超声振荡15分钟，放至室温，收集于网络，如有侵权请联系管理员删除加无水乙醇至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液10ml，置小烧杯中在60℃-70℃水浴上冷风吹干，残留物用乙醚分次提取并通过硅胶层析柱（用3g100-200目的青岛产层析硅胶，干法一次性装入内径约2.5cm的玻璃层析柱中，振摇，均匀下沉，不须预洗），用乙醚50-60ml，以吸管吸取乙醚液，分次洗脱双氢青蒿素，收集乙醚洗脱液在50℃-60℃水浴上冷风吹干，残物用无水乙醇定量移入100ml量瓶中，并稀释至刻度，摇匀，静置2小时后，精密量取5ml置50ml比色管中，加2%氢氧化钠溶液20ml，摇匀，置59℃±1℃的水浴中，加热30分钟，取出，立即冷却至室温，作为供试品溶液；另取经五氧化二磷减压干燥至恒重的双氢青蒿素对照品约100mg，精密称定，置100ml量瓶中，加适量无水乙醇，超声振荡使溶解，并稀释至刻度，摇匀，按供试品溶液制备项下自“精密量取续滤液10ml”起，同法操作，作为对照品溶液。
以无水乙醇—2%氢氧化钠溶液（1:4）混合液加热30分钟同法操作为空白，照分光光度法（中国药典1995年版二部附录IVA），在238nm的波长处分别测定对照品溶液和供试品溶液的吸收度，计算，即得。
磷酸哌喹精密称取上述研细的粉末适量（约相当于磷酸哌喹80mg），置100ml量瓶中，加0.1mol/L盐酸溶液约75ml，超声振荡20分钟，放至室温，加0.1mol/L盐酸溶液至刻度，摇匀，滤过。
精取续滤液2ml，置100ml量瓶中，加0.1mol/L 盐酸溶液至刻度，摇匀，作为供试品溶液。
另精密称取80℃真空干燥至恒重的磷酸哌喹对照品80mg，置100ml量瓶中，加0.1mol/L盐酸溶液约75ml，超声振荡20分钟，放置室温加0.1mol/L盐酸溶液至刻度，摇匀。
精取2ml置100ml量瓶中，加0.1mol/L盐酸溶液至刻度，摇匀，作为对照品溶液。
用0.1mol/L盐酸溶液为空白，照分光光度法（中国药典1995年版二部附录IVA），在345nm的波长处，分别测定对照品溶液和供试品溶液的吸收度。
计算，即得。
收集于网络，如有侵权请联系管理员删除甲氧苄啶照高效液相色谱法（中国药典1995年版二部附录VD）测定。
系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈—0.75%二乙胺（15:85混合后用磷酸调pH至2.5）为流动相，检测波长为271nm。
柱温为室温，理论塔板数按甲氧苄啶计算应不低于3000。
对照品溶液的制备精密称取经105℃干燥至恒重的甲氧苄啶对照品约25mg，置100ml量瓶中，加95%乙醇适量超声震荡30分钟溶解，放冷至室温，用95%乙醇稀释至刻度，摇匀。
精取5ml置25ml量瓶中，加流动相至刻度，摇匀，即得。
供试品溶液的制备精密称取上述研细的粉末适量（约相当于甲氧苄啶25mg），置100ml量瓶中，加入95%乙醇适量，超声波浴中震荡30分钟，使样品溶解，放冷至室温，用95%乙醇稀释至刻度，摇匀，滤过，精取续滤液5ml置25ml 量瓶中，加流动相至刻度，摇匀，作供试品溶液。
测定法：精取对照品溶液和供试品溶液各20μl注入液相色谱仪、记录色谱图，量取峰面积，按外标法计算供试品中甲氧苄啶的含量。
（3）溶出度：取样品，照溶出度测定法（中国药典1995年版二部附录XC第二法），以0.1mol/L盐酸溶液900ml为溶剂，转速为每分钟75转，依法操作，经30min，取溶液20ml，滤过。
精密量取续滤液2ml，置50ml量瓶中，加0.1mol/L盐酸溶液至刻度，摇匀，作为供试品溶液。
另精密称取经80℃真空干燥至恒重的磷酸哌喹对照品适量，用0.1mol/L盐酸溶液溶解并制成每1ml约含14μg/ml的溶液，作为对照品溶液照分光光度法（中国药典1995年版二部附录IVA）在345nm的波长处，分别测定吸收度，计算出每片中磷酸哌喹的溶出量。
收集于网络，如有侵权请联系管理员删除另精密量取上述续滤液5ml，置25ml量瓶中，加0.1mol/L盐酸溶液至刻度，摇匀，作为供试品溶液。
另分别精密称取经105℃干燥至恒重的甲氧苄啶对照品与经80℃真空干燥至恒重的磷酸哌喹对照品适量，用0.1mol/L盐酸溶液溶解并分别制成每1ml约含甲氧苄啶20μg，磷酸哌喹71μg的溶液，作为对照品溶液⑴，对照品溶液⑵。
照分光光度法（中国药典1995年版二部附录IVA）取对照品溶液⑵，以271nm 为测定波长(λ2)，在366nm波长附近（每间隔0.2nm）选择等吸收点波长为参比波长（λ1），要求△A=Aλ2-Aλ1=0。
再在λ2与λ1波长处分别测定供试品溶液与对照品溶液⑴的吸收度，求出各自的吸收度差值（△A），计算出每片中甲氧苄啶的溶出量（4）、色谱检查分（降）解产物方法如下：①精密称取本品细粉适量（约相当于双氢青蒿素50mg）加氯仿5ml搅拌使双氢青蒿素溶解，滤过，滤液作为供试品溶液；另精密称取双氢青蒿素对照品适量，加氯仿溶解使成每1ml中含双氢青蒿素10mg作为对照品溶液。
照薄层色谱法（中国药典1995年版二部附录VB）试验，吸取上述溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以苯—醋酸乙酯（8:2）为展开剂，展开后，晾干，喷以0.5%香草醛硫酸溶液[香草醛0.5g加入硫酸—水（4:1）混合液100ml使溶解]加热使杂质斑点显色。
各种稳定性试验的供试品与对照品斑点作比较。
②精密称取本品适量（约相当于磷酸哌喹80mg），加80%冰醋酸5ml搅拌溶解，滤过滤液作为供试品溶液；另精密称取磷酸哌喹、甲氧苄啶对照品适量，加80%冰醋酸使成每1ml中含磷酸哌喹16mg、甲氧苄啶4.5mg溶液作为对照品溶液，照薄层色谱法（中国药典1995年版二部附录VB）试验，吸取上述溶液各5μl分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以氯仿—甲苯—二乙胺（5:4:2）为展开剂，展开后，晾干，置紫外收集于网络，如有侵权请联系管理员删除灯（254nm）下检视，各种稳定性试验的供试品与对照品斑点作比较。
二、试验结果㈠影响因素试验强光照射试验结果结果详见表1，显示本品在强光照射下稳定。
色谱检查分（降）解产物见照片1-1、1-2（附后），5、10天与对照品比较未见改变。
表1 强光照射试验结果收集于网络，如有侵权请联系管理员删除㈡高温试验结果结果详见表2。
显示本品在40℃及60℃基本不变，80℃以上双氢青蒿素出现分解斑点，含量也随之下降。
色谱检查分（降）解产物见照片2-1、2-2（附后）。
收集于网络，如有侵权请联系管理员删除收集于网络，如有侵权请联系管理员删除㈢高湿度试验结果结果详见表3。
显示本品在RH 92.5% 10天质量稳定。
色谱检查分（降）解产物见照片3-1、3-2（附后）。
表3 高湿度实验结果收集于网络，如有侵权请联系管理员删除㈣室温空气中放置试验结果结果详见表4。
显示本品在室温空气中放置比较稳定。
色谱检查分（降）解产物见照片4-1、4-2（附后），5、10天与对照品比较未见改变。
（二）、加速试验复方双氢青蒿素片由重庆通和制药有限公司提供。
批号：981020、981021、981022。
考察项目包括：①外观色泽；②片芯性状；③溶出度；④含量；⑤色谱检查分（降）解产物。
【考察项目的检查方法】同影响因素试验。
【试验方法与结果】三批样品的检测结果详见表5、表6和表7。
色谱检查分（降）解产物见照片5-1、5-2、6-1、6-2、7-1、7-2（附后）。
表5 981020批号复方双氢青蒿素加速试验结果表6 981021批号复方双氢青蒿素加速试验结果（三）、室温留样考察结果结果详见表9、表10和表11。
色谱检查分（降）解产物见照片9-1、9-2、10-1、10-2、11-1、11-2（附后）。
表9 981020批号复方双氢青蒿素片室温留样观察结果表10 981021批号复方双氢青蒿素片室温留样观察结果表11 981022批号复方双氢青蒿素片室温留样观察结果三、结论复方双氢青蒿素片在强光、室温空气放置、高湿度试验，高温40℃、60℃、加速试验三个月以及室温放置6个月基本稳定，各项考察指标均在质量标准范围内，显示出复方双氢青蒿素片制剂工艺可靠，产品质量基本稳定。