体
抗体的传统生产方法
抗原
反复注射动物
该法制备抗体的缺点：
产量低、纯度低，且抗体的特异性差、 灵敏度低。
从动物的血清中分离抗体
单克隆抗体！
单克隆抗体的概念
读下面一段资料，找出单克隆抗体的概念
人们发现，在动物发生免疫反应的过程中，体内的B细胞 可以产生多达百万种以上的特异性抗体，但是每个B细胞只 分泌一种化学性质单一、特异性强的抗体。要想获得大量的 单一抗体，必须用单个B细胞进行无性繁殖，即克隆。
• 单克隆抗体：单个B细胞克隆产生的化学性 质单一、特异性强的抗体
1975年英国科学家米尔斯坦和柯勒的实验 设计方案：
一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体 骨髓瘤细胞能无限增殖
3.植物组织培养可以形成愈伤组织，下列有关愈
伤组织的叙述错误的是
A.愈伤组织是离体细胞经过脱分化形成的
B.形成愈伤组织的培养基不需含有机分子
C.愈伤组织可以形成具有生根能力的胚状结构
D.愈伤组织细胞的线粒体和核糖体可能发生碱基
互补配对
4.能刺激愈伤组织形成的诱导剂是
A.细胞分裂素和生长素 B.赤霉素
.
动物细胞融合过程
原理灭？ 活细的胞病膜毒的诱流导动细性 胞诱融导合的手的段原？理？灭活 的灭含活义病？毒、PEG、电激 等融合后细胞的类型？ 三种AA、AB、BB
AB杂种细胞遗传物质 有什么特点？
含两种生物的遗传物质
融合后的细胞进行有丝分裂，形 成完整的杂交细胞
比较动、植物细胞杂交技术
比较项 细胞融合
植物体细胞杂交技术 动物细胞融合技术
“太空婚礼”
2002年12月30日， 两场筹备了10年的“太 空婚礼”首次在神舟四号飞船上举行，植物细 胞“新人”—黄花烟草和革新一号烟草叶肉细 胞原生质体，动物细胞“新人”是小鼠B淋巴细 胞和骨髓瘤细胞，两批新人同时在 “产房”— 电融合仪内孕育新生命。 这两场“太空婚礼”实质是哪两项细胞工程技 术
Q4：结合植物组织培养过程，思考植物细胞全能性的表
达需要哪些条件？
(4) (5)
植物体细胞杂交
Q5：作为育种手段，相对于传统杂交育种，植物体细胞杂
交有何优势？
意义：克服远缘杂交不亲和的障碍、培育新品种
• 你认为两个来自不同植物的体细胞完成融合， 遇到的第一个障碍是什么？
(1)分离原生质体---酶解法 (2)原生质体融合---物、化法 (3)新细胞壁形成---杂交细胞形成标志 (4)植物组织培养---植物体细胞杂交的
(2)过程③在化学药剂__聚_乙__二_醇__的作用下会发生细胞融合；动物细 胞融合的方法与植物细胞不相同的是_可__以_使__用_灭_。活的病毒 (3)过程_____⑤_____属于脱分化，过程_____⑥_____属于再分化，细 胞发生分化的根本原因是__基_因__的_选__择_性_。表达 (4)过程⑤⑥⑦的细胞工程技术是_植__物_组__织_培__养_，其培养时选用的材 料通常是分生组织，原因是_全__能_性__高_，__易_脱。分化形成愈伤组织 (5)植物体细胞杂交的研究在________方面，取得了巨大突破。
人工种子
胚状体 人工种皮 人工胚乳
胚
自然种子 种皮
胚乳
胚状体包埋在胶囊内形成球状结构： •胶质化合物薄膜——种皮 •营养成分和植物激素
——人工胚乳 •胚状体——新植物的幼体 优点：
快速繁殖，解决作物繁殖 能力差、结子困难或发芽率低 等问题。保持杂种优势。
④培育转基因植物 （如抗虫棉等） (2)作物新品种的培育 ①单倍体育种：
应用： （1）生产细胞产品，如干扰素、疫苗、单克隆抗体；
动物基因工程技术中的受体细胞 （2） 检测并判断某毒性物质毒性的大小； （3）临床医学研究。
动物细胞核移植技术和克隆动物
教材 P48
• 动物细胞核移植：
是将动物的一个细胞核，移入一个已经去掉细胞 核的卵母细胞中，使其重组并发育成为一个新的 胚胎，这个新的胚胎最终发育为动物个体（克隆动物）
D.体细胞内不存在等位基因
回顾：植物细胞工程常用的技术手段：
植物组织培养、 植物体细胞杂交等
二、动物细胞工程
常用的技术手段： 动物细胞培养 动物细胞核移植
动物细胞融合 生产单克隆抗体等
动物细胞培养技术 是其他动物 细胞工程技术的基础。
动物组织块 幼龄动物的器官组织；动物胚胎
动 物
胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分 散成单个细胞
胚胎细胞核移植：细胞分化程度低，恢复全能性容易 分类：
体细胞核移植： 细胞分化程度高，恢复全能性困难
原理：动物细胞核的全能性
体细胞核移植技术的应用
1、畜牧业
2、保护濒危物种
3、医药卫生
体细胞核移植技术 存在的问题 P50 对于克隆人，中国政府的态度：
不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人实验， 不反对治疗性克隆。
温故而知新
（2012新课标卷）40、[生物—选修3现代生物科技专题]（15分） 根据基因工程的有关知识，回答下列问题： （1）限制性内切酶切割ＤＮＡ分子后产生的片段，其末端类型 有 黏性末端 和 平末端 。 （2）质粒运载体用EcoRⅠ切割后产生的片段如下：
为使运载体与目的基因相连，含有目的基因的DNA除可用 EcoRⅠ切割外，还可用另一种限制性内切酶切割，该酶必须 具有的特点是 切割产生的DNA片段末端与EcoRⅠ切割。
细
胞
加入培养液
无菌、无毒的环境；
培
充足的营养；
养 过
细胞悬液 适宜条件
适宜的温度和pH；
程
原代培养
适宜的气体环境
用胰蛋白酶等 处理贴壁细胞
传代培养
1.动物细胞培养的基本原理是什么？
离体的细胞在适宜的条件下可以增殖（ 细胞增殖）
2.动物细胞培养液的主要成分是什么？
通常含有葡萄糖、氨基酸、促生长因子、无机 盐、微量元素、动物血清等。
②作物脱毒： 利用植物分生组织(如茎尖、根尖)进行培养,可以使新长 成的植株脱除病毒。
③人工种子：
植物组织培养得到的胚 状体、不定芽、顶芽或腋芽, 包上人工种皮就可以形成人 工种子。右图是人工种子的 结构示意图。
注意
人工种皮中可以加入适量的养分、无机盐、有机碳 源以及农药、抗生素、有益菌等,以利于胚状体生长发育 成幼苗。
目
的原理
植物体 细胞膜的 细胞杂 流动性
交
动物细 细胞膜的 胞融合 流动性
细胞融合的 方法
纤维素酶、 果胶酶去除 细胞壁后诱 导原生质体 融合
用胰蛋白酶 使细胞分散 后诱导细胞 融合
诱导手段 用途
离心、电刺 克服远源 激、振动、 杂交不亲 聚乙二醇 和，获得
杂种植株
除应活病毒 单克隆抗
(4)
(5)
细胞的全能性
（1）概念
具有某种生物全部遗传信息的任何一个细胞，都具有发 育成完整个体的潜能。
起点：细胞 终点：完整个体
例：下列现象，能作为细胞具有全能性观点提供证据的是（ D ）
A.壁虎断尾后重新长出尾部 B.用体外培养的皮肤治疗烧伤病人 C.小鼠腺细胞的自我复制 D.花药离体培养获取单倍体植株
克服不同生物远缘杂交不亲和的障碍
(6) 在培养杂种苗的过程中，一般在 24~28小时后，大部分原生质体已经 再生出细胞壁。怎样鉴别细胞壁是否 再生？
植物细胞质壁分离和复原实验
双基自主落实
核心互动突破
高考真题集训
限时规范训练
植物组织培养技术有哪些应用？
⑴.植物繁殖的新途径 ①微型繁殖：
不仅可以保持优良品种的遗传特性,还可以高效快速 地实现种苗的大量繁殖。
产生的相同 （3）按其来源不同，基因工程中所使用的DNA连接酶有两类， 即 E.Coli DNA连接酶和 T4 DNA连接酶。
（4）反转录作用的模板是 mRNA（或RNA），产物是cDNA （。或 DNA）
若要在体外获得大量反转录产物，常采用 PCR 技术。 （5）基因工程中除质粒外， 噬菌体 和 动植物病毒等 也可 作为运载体。
3.进行动物细胞培养的材料一般有何特点？
一般取胚胎组织或幼龄动物的组织做动物细胞培养。 因为胚胎组织或幼龄动物的组织的细胞生命力旺盛， 分裂能力强。
4.哪些细胞会失去接触抑制？ 肿瘤细胞
5.在体外培养动物细胞需要什么物质和环境条件？
无菌无毒环境、充足营养（血清或血浆）、适宜 温度、PH、气体环境 （O2和CO2，C02的主要作用是维持培养液的PH）。
（6）若用重组质粒转化大肠杆菌，一般情况下，不能直接用 未处理的大肠杆菌作为受体细胞，原因是
未处理的大肠杆菌吸收质粒（外源DNA）的能力极弱
40、【生物－现代生物技术专题】
为扩大可耕地面积，增加粮食产量，黄河三角洲等盐碱地的开
发利用备受关注。我国科学家应用耐盐基因培育出了耐盐水稻
新品系。
（1）获得耐盐基因后，构建重组DNA分子所用的限制性内切酶
技术环节之一
【典例1】 如图所示为科学家利用番茄叶细胞和马铃薯叶细胞杂交培育 “番茄—马铃薯”植株的过程，请回答下列问题。
纤维素酶和果胶
(1)①②过程使用了__________酶，为使植物原生质体相互分离， 此处使用的溶液浓度较大，以保证植物细胞会发生__质__壁_分__离___， 以保护原生质体不被破坏；在动物细胞培养技术中，使细胞分离 开来的酶是___胰_蛋__白_酶___。
Q1:请简要说明植物细胞“新人”—黄花烟草和革新一号
烟草融合细胞的诞生过程？
(1)
(2)
(3)
(1) 黄花烟草和革新一号烟草融合细胞
Q2:若要将黄花烟草和革新一号烟草融合细胞培养为植株，
你将采用什么技术？请简述过程？
(3)
Q3:为什么用一个细胞就能培育出完整