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实验动物学重点整理

实验动物学重点整理
1大小鼠年龄、体重、寿命的比较数据?
成年动物的年龄、体重和寿命比较
小鼠大鼠
成年日龄(天)65-90 85-110
成年体重(克)20-28 200-280
平均寿命(年)1-2 2-3
2动物实验的对照类型?
(一)空白对照:
不给任何措施的情况下观察动物自发变化的规律。

家兔白细胞数每天上下午有周期性的生物钟变化。

(二)实验对照:
采用与实验组相同操作条件下对照,如给药实验中的溶媒(Nacl),手术,注射以及观察时的抚摩等都可以对动物发生影响。

有人报告,针刺犬的人中穴对休克、心脏血液动力学有改变,但采用空白对照(不针刺)不够,应该设有针刺其它部位或穴部的实验对照。

(三)有效(标准)对照:
常用于药物研究。

对一新药疗效可用一已知有效药或能引起标准反应药物做对照,可考核实验方法可靠性,又可通过比较,了解新药疗效和特点(普鲁卡因---对皮肤黏膜穿透力弱,用纳塞卡因---穿透力强,作用快、持久)。

(四)配对对照:
同一个体不同眼睛比较对照期和实验期差异(左眼试验,右眼对照);同一种动物后代分成左右两部分进行对照和实验以比较差异,此法可大大减少抽样误差。

实验中可用同卵双胎或同窝动物。

(五)组间对照:
将实验对象分成两组或几组比较其差异。

这种对照个体差异和抽样误差比较大,可用交叉对照方法以减少误差。

观察某药物疗效可用两组犬先分别做一次实验和对照,再相互交换,以原实验组做对照组,原对照组做实验组重复第一次实验,观察疗效或影响,切记检查指标和条件要等同。

(六)历史对照与正常值对照:
此种对照要慎重,similar background ---条件、背景、指标和技术方法相同才进行对比,否则得出不恰当的甚至错误结论。

3转基因动物的概念、制备过程?
转基因动物:
用物理、化学、生物手段将确定外源基因通过生殖细胞或早期胚胎导入动物染色体,其基因组内稳定整合导入外源基因,能遗传给后代的一类动物,使其获得人类需要新功能。

技术程序:
(1)分离编码某一目的产物基因(HPL ApoA)或分离对动物表型有作用某一基因(OB基因)。

(2)制备DNA重组子(subset),使其能在选定组织中表达,从而饶过正常存在于动物机体代谢过程。

(3)将DNA重组子在体外转移到一个刚刚受精单细胞卵中。

(4)导入法:显微注射法;逆转录病毒感染法;精子载入法;胚胎干细胞介导法;电转移法。

不同方法,使动物基因组中包括一个外源性DNA片段,此特征一般遗传方法不能达到。

4实验动物按微生物学和遗传学控制原理的分类及概念?
按遗传学控制原理分类
Inbred strain animals(sib)近交系动物:
纯系动物。

繁殖方法采用兄妹交配、亲子交配连续繁殖20代以上而培育出纯品系动物(以小鼠为代表)。

20代后,基因中一般不存在暗藏的隐性基因(hiden)。

Mutant strain animals(突变系动物):
保持有特殊突变基因品系动物,正常染色体发生变异或碱基对改变,具有各种遗传缺陷(KM-Id,拐腿小鼠),没有明确遗传等位点,经淘汰选拔,仍能维持稳定的遗传物质。

Hybrid animals(杂交群动物):
杂交一代动物或系统杂交动物。

两个近交品系之间进行有计划的交配所获得第一代动物(简称F1动物)。

(C57BL/6雌X DBA/2雄—B6D2F1)
Closed colony animals(封闭群动物):
不从外部引进其它任何品种新血缘,由同一血缘动物以非近亲方式进行随意交配,在固定场所至少繁殖四代以上动物群。

(避免亲子、表兄妹之间相互交配,保持有一定遗传差异,既有群体一般遗传特性,又具备杂合性)。

按微生物学的控制原理分类:
Germ free animals(GF):体内外无任何寄生物(寄生虫、微生物)动物。

该动物在自然界并不存在,须用人为方法培育出来。

剖腹取胎,立刻转到无菌、恒温、恒湿条件下用无菌饲料饲养,可排除微生物潜在感染造成功能形态上改变。

Pasteur在1885年认为,动物没有肠道菌不能成活。

Nencki提出相反观点,学术界争论很大,分头做实验证实。

几年后,剖腹产得到无菌豚鼠,用无菌牛奶喂养成功。

Gnotobiotic animals(GA 悉生动物):
体内带已知微生物动物。

原是无菌动物,系人为将微生物丛投入到动物体内。

将有益的大肠杆菌定居于小鼠体内,检查只能查到大肠杆菌。

较无菌动物生活力强,分为单菌、双菌和多菌动物。

它是现代微生态研究的中心,基因在体内横向转化模型(细菌带抗药基因),现代医学通过悉生动物阐明其机理,研究分子免疫和黏膜免疫。

Specific Pathogen Free animals (SPF级动物):
机体内无特定微生物和寄生虫存在动物(非特定微生物和寄生虫允许存在)。

SPF祖先为无菌动物,目前国外使用最广泛动物,饲养在屏障系统内,只有不致病细菌丛,无致病病原体。

Clean animals(CL):
较积极微生物学控制,不带对动物危害大、对科研干扰大病原菌,饲养在屏障卫生环境里动物,称最低限度疾病动物。

特点:比普通动物排除微生物和寄生虫多,比SPF动物少。

国际上认为清洁级动物仅适合短期或部分实验。

根据国内具体情况,清洁级动物在我国得到广泛应用—较普通级动物健康,又较SPF 级动物易达到质量标准,在动物实验中可免受动物疾病的干扰,敏感性及重复性亦较好。

根据国情,目前适合于我国大多数科学研究,国内科研工作中主要应用标准级别动物(种系清楚,不杂乱)。

Conventionl animals(CV)普通级动物:
教学和示教动物,不带人蓄共患病病原体及体外寄生虫(结核杆菌、痢疾、沙门氏菌、肝炎病毒、出血热和螨虫等)。

5克隆动物的过程?
1996年7月英国爱丁堡罗斯林研究所WILMUT研究小组宣布:成功克隆出“DOLLY”。

步骤如下:
(1)、用药物促使母羊排卵,然后将未受精卵取出放置一个离心管底部,用特殊微注射管将羊卵膜刺破,吸出卵中所有染色体,得到了具活性但无遗传物质卵空壳;
(2)、从一只6岁母羊乳腺中取出一个普通细胞,使乳腺细胞与卵空壳融合,电流刺激使两者融合成一个含有新遗传物质卵细胞。

卵细胞在试管中开始分裂,形成胚胎。

当胚胎长到一定程度时;
(3)、将其植入另一只母羊子宫中,使母羊人工怀孕产下小羊。

Wilmut非常喜欢英国的一个著名乡村歌手,歌手名为Dolly(多莉),小羊取名Dolly。

Dolly 有三个母亲:为它提供乳腺细胞;提供卵空壳;为它怀胎。

从遗传角度来看,提供乳腺细胞的母羊才有亲缘关系。

6急慢性动物实验的概念、各自优缺点?
(一)急性动物实验:
大多数急性动物实验是用活体解剖方法,把失去知觉动物(全麻或局麻下)某一功能系统,器官,组织暴露于直视之下或置于实验仪器准确控制之下;或用适当方法,取出到动物体外,置于人工环境中,给予人工处理,观察其反应与活动,研究其功能,或对某种加予因素反应及反应机制一些动物实验的总称。

1、特点:在短时间内可获得较多有价值分析性资料。

把研究的器官、组织,放在眼前或仪器准确控制之下,直接观察并记录它的活动与反应,可排除一些复杂因素影响,从而使所观察某一因素、某几个因素起作用。

2、缺点:动物在急性实验中处于失常状态,全身麻醉,失去知觉,失去高级神经系统对机体整体的调节作用,必然会导致失去调节器官或组织功能状态发生变化,从而使它对某些因素反应反常。

其次,动物在实验中遭受手术创伤、失血等损伤。

急性动物实验不能完全说明整体动物在生理条件下功能活动规律。

(二)慢性动物实验:
无菌条件下,给动物施行一定的实验外科手术(各种瘘管,脏器的切除或移植),待其恢复健康后再行实验或观察;把一定物理性、化学性、生物性等致病因素作用于动物,复制成各种疾病模型,详细研究和观察疾病的发生,发展规律;在动物模型制成后细致研究和观察各种实验性措施的效果。

1、特点:保持了实验动物机体的完整性与外界环境统一性。

动物处于比较接近自然的生活状态,所观察到结果较符合客观实际,
比较正确可靠。

2、缺点:观察时间长,实验设备和技术要求高,费人力较多,不宜进行大量的实验性研究。

因观察需要较长时间,必须时刻注意实验条件的控制,要很好的饲养和护理动物,以免影响结果。

7“三R”是指的什么?
动物实验中“三R”:
1、Reduction:要求提高动物质量,尽可能减少实验动物数量,以获取同样多的信息。

2、Refinement:尽可能改进实验程序,减少动物在实验过程中的痛苦和不安。

例:使用新的有效的镇静剂。

3、Replacement:通过使用其他方法或模型替代动物。

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