葡萄球菌属检验文件编码（GHTU-UITID-GGBKT-POIU-WUUI-8968）
1．概述
葡萄球菌属是一类触酶试验阳性的革兰阳性球菌，包括金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、腐生葡萄球菌、中间型葡萄球菌等35个种，17个亚种。

金黄色葡萄球菌是最重要的致病葡萄球菌。

2.标本类型
血液、尿液、脑脊液、穿刺液、脓液等标本。

3.鉴定
3.1形态与染色革兰阳性球菌，成单、双、短链或不规则葡萄状排列。

3.2培养特性金黄色葡萄球菌在血琼脂平板上的典型菌落为金黄色，周围有明显的?溶血环，部分菌落也可呈灰白色或柠檬色。

在高盐甘露醇平板上呈淡橙黄色菌落。

表皮葡萄球菌在血琼脂平板上菌落为白色或柠檬色，多数不溶血。

3.3生化反应金黄色葡萄球菌触酶试验阳性，分解葡萄糖、麦芽糖、蔗糖和甘露醇，不分解棉子糖和水杨苷，明胶、血浆凝固酶和DNA酶试验阳性，七叶苷试验阴性。

3.4鉴别要点
3.4.1本菌属特征革兰阳性球菌，呈葡萄状排列，触酶试验阳性。

金黄色葡萄球菌在血琼脂平板上菌落呈金黄色或白色，DNA酶和血浆凝固酶试验均阳性，发酵苷露醇。

3.4.2与微球菌属的鉴别葡萄球菌属葡萄糖O/F试验为发酵型，镜下以葡萄状排列为主，菌体较小，而微球菌属为氧化型或无反应，镜下以四联排列为主，且菌体较大。

3.4.3与链球菌属的鉴别葡萄球菌属O/F试验为发酵型，触酶试验阳性，链球菌属葡萄糖O/F试验为氧化型，触酶试验阴性。

3.4.4凝固酶试验阳性葡萄球菌的鉴别见下表1。

表1凝固酶阳性葡萄球菌鉴别的关键性试验
菌名凝固
酶
触
酶
溶
血
硝酸
盐
海藻
糖
半乳
糖苷
酶
金黄色葡萄球菌金黄色
亚种
+++++-
金黄色葡萄球菌厌氧亚
种
+-+---
施氏葡萄球菌聚集亚种++++-ND
中间葡萄球菌++d+++
海豚葡萄球菌++++-ND
S.lutrae++++++
猪葡萄球菌d+-++-
注：“+”为90%以上菌株为阳性，“-”为90%以上菌株为阴性，“d”为11%-89%阳性，“ND”为无资料。

3.5操作步骤
3.5.1涂片、染色观察菌落特征，在血平板上挑取可疑菌落，涂片染色镜检。

3.5.2触酶试验参见《触酶试验标准操作规程》。

3.5.3凝固酶试验参见《凝固酶试验标准操作规程》。

3.5.4鉴定从血琼脂平板上挑取纯菌落，用微生物鉴定仪或传统生化反应进行细菌鉴定。

4.药敏
参见《药物敏感性试验标准操作规程》及CLSIM100-S20最新版本文件。

5.质量控制
参见《质量管理程序》。

6.检验结果解释与分析
6.1由于葡萄球菌分布广泛，从临床标本中分离到金黄色葡萄球菌时，将其定为致病菌时应慎重。

应根据凝固酶试验进一步确认。

对可疑菌株的鉴定，最好利用商品化的鉴定系统根据生化图谱进行确定。

表皮葡萄球菌分离自导管相关血流感染时，通常视为致病菌。

溶血性葡萄球菌从泌尿感染病人分离得到时，尤其是细菌量较大或作为优势菌时，通常被视为致病菌。

6.2甲氧西林耐药的金黄色葡萄球菌（MRSA）对多种广谱强效抗菌药物呈多重耐药性。

如果检测出耐甲氧西林的葡萄球菌菌株则报告耐所有青霉素、头孢菌素、碳青霉烯类和?-内酰胺药/?-内酰胺酶抑制剂类抗生素，对氨基糖苷类和大环内酯类抗生素常协同耐药。

若葡萄球菌属对四环素敏感，则对多西环素和米诺环素敏感。

某些菌对四环素中介或耐药，而对多西环素和米诺环素敏感。

临床感染葡萄球菌的病人用喹诺酮类治疗3-4日后，原来敏感的葡萄球菌易产生耐药。

所以对这类葡萄球菌需多次反复进行药敏试验。

大环内酯类耐药葡萄球菌包括固有耐药和诱导耐药。

所以临床试验室须进行“D”试验以检测克林霉素诱导性耐药，根据“D”试验结果来报告克林霉素的耐药性。

7.临床意义
葡萄球菌属在自然界分布很广。

存在于空气、水、尘埃及皮肤上的葡萄球菌大多数无致病性。

金黄色葡萄球菌主要引起局部组织的化脓性感染（疖、痈和创伤感染）、菌血症、心内膜炎等全身感染等，也可引起骨髓炎、化脓性关节炎、肺炎和深部脓肿等。

腐生葡萄球菌引起尿道感染、前列腺炎、外伤和菌血症等。

溶血葡萄球菌引起心内膜炎、菌血症、腹膜炎、尿道感染、外伤、骨折和关节炎等。

MRSA的治疗：轻度感染可选用SMZ-TMP和喹诺酮类，严重全身感染选用万古霉素或其他糖肽类药物。

8.鉴定流程
[1]
[2]2007
[3]3版.南京：东南大学出版
[4]MurrayPR.ManualofCinicalMicrobilogy.9thed.Washington:ASMPress,2007
[5]ISO15189：2007医学实验室-质量和能力认可准则.2007。