生物化学期中试卷(含详细答案)————————————————————————————————作者：————————————————————————————————日期：成绩南京师范大学生命科学学院2009-2010学年第I学期生物化学期中试卷（含答案）班级__________ 任课教师___________学号___________ 姓名___________大题一二三四五六成绩一、选择题（从4个备选答案中选出1个唯一正确的答案，把答案代码填入题末括号内）(本大题分10小题, 每小题2分, 共20分)1、下列有关别构酶的说法，哪项是正确的？（A）别构酶的速度－底物曲线通常是双曲线；（B）效应物能改变底物的结合常数，但不影响酶促反应速度；（C）底物的结合依赖于其浓度，而效应物的结合则否；（D）别构酶分子都有一个以上的底物结合部位答（D ）2、下列哪种氨基酸是生酮氨基酸(C )（A）丙氨酸（B）异亮氨酸（C）亮氨酸（D）酪氨酸3、下列氨基酸中，哪个为破坏α螺旋结构的氨基酸残基之一（C）（A）谷氨酸（B）亮氨酸（C）脯氨酸（D）丙氨酸4、在pH7时带正电荷的氨基酸是（C）（A）谷氨酸(B) 丙氨酸(C) 精氨酸(D)天冬氨酸5、下列的pH值，何者代表天冬氨酸的等电点，pK1(α-COOH)1.88；pK2(β-COOH)3.65；pK3(-NH3)9.6（A）（A）2.77 (B) 6.63 (C) 5.74 (D) 3.56、蛋白质的溶解度（D）（A）加入中性盐后增加（B）在等电点时最大（C）变性后增加（D）加入乙醇后降低7、胶原蛋白组成中出现的不寻常的氨基酸为（B）（A）ε-乙酰赖氨酸（B）羟基赖氨酸（C）甲基赖氨酸（D）D-赖氨酸8、蛋白质糖基化往往与肽链中（C）残基的侧链结合（A）谷氨酸（B）谷氨酰胺（C）酪氨酸（D）天冬氨酸9、免疫球蛋白是属于（D）（A）核蛋白（B）简单蛋白（C）脂蛋白（D）糖蛋白10、将双链DNA溶液加热到温度恰好在Tm以下，然后在2分钟内使之冷却至室温时，其OD260值将发生下列哪种变化？（A）上升；（B）下降（C）不变；（D）先上升，后下降至接近原来的数值。
答（D）二、填空题(本大题共5小题，总计10分)1. 用紫外分光光度计测定核酸，用（260）nm波长，因为（核酸的嘌呤碱和嘧啶碱具有共轭双键在此波长下有吸收）；测定蛋白质时用（280）nm波长，因为（大多数蛋白还有芳香氨基酸，其中苯环的共轭体系在此波长范围有吸收）。
核苷酸。
2. Km值表示(酶与底物之间的亲和程度), 竞争性抑制作用时, Km值（变大）, 最大反应速度（不变）。
非竞争性抑制作用时, Km值（不变）, 最大反应速度（变小）。
3.蛋白质变性的表现为(生物活性丧失)、(溶解度降低)、(不对称性增高)。
4.盐析是指用高浓度的盐类破坏蛋白质的水化层，最常用的盐是(硫酸铵)。
三、判断题（答案填在题尾的括号内，正确的填“是”，错误的填“否”。
）(本大题分4小题, 每小题1分, 共10分)1. 蛋白质分子中所有氨基酸（除甘氨酸）都是左旋的。
（-）2. 维生素A的主要功能是维持上皮组织的健康及正常视觉。
（+）3. 生物催化剂都是蛋白质。
（-）4. DNA分子中每对碱基都可形成氢键, 大量的氢键是维持DNA结构的主要作用力。
( - )5. 天然氨基酸都具有一个不对称α-碳原子。
（-）6. 某一蛋白质分子，当其酸性氨基酸数目等于碱性氨基酸数目时，此蛋白质的等电点为7。
（-）7. DNA分子中, 嘌呤碱基数越多, 其Tm值越大。
( - )8. 等电点的数值越大,表示该物质所带电荷越多。
（-）9.自然界常见的不饱和脂肪酸多具有反式结构。
（-）10. 在水溶液中蛋白质溶解度到达最小时的pH通常是它的等电点。
（+）四、名词解释(本大题共５小题，总计２０分)1、(本小题４分)熔解温度（melting temperature,Tm）：双链DNA熔解彻底变成单链DNA的温度范围的中点温度。
２、(本小题４分)等电点（pI,isoelectric point）：使分子处于兼性分子状态，在电场中不迁移（分子的静电荷为零）的pH值。
（pH在等电点以下（酸性），分子带正电荷，pH在等电点以上（碱性），分子带负电荷）３、(本小题４分)夏格夫法则（Chargaff’s rules）：所有DNA中腺嘌呤与胸腺嘧啶的摩尔含量相等（A=T），鸟嘌呤和胞嘧啶的摩尔含量相等（G=C），既嘌呤的总含量相等（A+G=T+C）。
DNA的碱基组成具有种的特异性，但没有组织和器官的特异性。
另外，生长和发育阶段`营养状态和环境的改变都不影响DNA的碱基组成。
４、(本小题4分)必需脂肪酸（occential fatty acid）：维持哺乳动物正常生长所必需的，而动物又不能合成的脂肪酸，Eg亚油酸，亚麻酸。
５、(本小题4分)超二级结构（super-secondary structure）:也称为基元(motif).在蛋白质中，特别是球蛋白中，经常可以看到由若干相邻的二级结构单元组合在一起，彼此相互作用，形成有规则的，在空间上能辨认的二级结构组合体。
五、问答题(本大题共2小题，总计30分)1、(本小题１０分)试举出二种蛋白质主要的鉴定用化学反应。
①与茚三酮在弱酸性溶液中共热显紫色，为α-NH2反应（注意：伯胺也可使茚三酮显紫色），氨基酸、多肽均有此反应。
Pro为仲胺（亚氨基氨基酸），与茚三酮生成黄色物质。
茚三酮反应可用于定性、定量测定氨基酸和多肽。
②肽键的双缩脲反应：多肽，蛋白质中有肽键，有此反应，氨基酸没有此反应。
双缩脲：H2N-CO-NH-CO-NH2 ，P163。
双缩脲反应：含有两个或两个以上肽键的化合物（如双缩脲或二肽以上等多肽）在碱性溶液中能与CuSO4生成紫红色或紫蓝色复合物，可定性或定量测定蛋白质含量，颜色深浅与蛋白质浓度成正比。
2、(本小题2０分)简述Watson与Crick提出的DNA双螺旋结构模型的依据及要点。
为什么科学界将Watson 和Crick提出DNA双螺旋结构模型评为20世纪自然科学最伟大的成就之一？答：1953年Watson与Crick提出的DNA双螺旋结构模型，主要有三方面依据：核酸化学结构、核苷酸键长和键角数据以及DNA的X-射线衍射分析。
DNA碱基组成的Chargaff规则；同一物种不同组织和器官，DNA碱基组成具有生物种特异性。
且摩尔数为A=T，G=C，A+C=G+T。
DNA分子双螺旋结构模型要点如下：1、两条反向平向的多核苷酸链围绕同一中心轴相互缠绕，两条链均为右手螺旋。
2、碱基位于双螺旋内侧，核酸与核糖在外侧，彼此通过3‘，5‘-磷酸二酯键相连接，形成DNA分子骨架。
3、碱基平面与纵轴重直，糖环平面与纵轴平行。
4、多核苷酸链方向3‘→5‘为正向，形成一条大沟和一条小沟。
5、双螺旋平均直径为2nm，两个相邻碱基对之间相距高度为0.34nm，两核苷酸之间夹角为360，沿中心轴每旋转一周有10个核苷酸，每一转的高度（螺距）为3.4nm。
6、两条链被碱基之间形成的氢键连成一体，互相匹配，A与T配对，形成两个氢键，G与C配对，形成三个氢键。
7、碱基在一条链上的排列顺序不受任何限制，一条链序列确定后则决定另一条互补链序列。
遗传信息由碱基序列所携带。
因为DNA双螺旋结构模型的建立说明了基因的结构、信息和功能三者之间的关系，使当时分子生物学先驱者形成的三个学派（结构学派、信息学派和生化遗传学派）得到统一，并推动了分子生物学的迅猛发展。
六、分析计算(本题10分)在一组10ml的反应体系中，加入不同浓度的底物。
分别测反应初速度，得数据如下：不作图计算：(1)Vmax和Km。
(2)计算［S］=1.0× 10-5mol/L和［S］=1.0× 10-1mol/L时的v。
(3)计算［S］=2.0 × 10-3 mol/L或［S］=2.0 × 10-5 mol/L时最初5分钟内的产物总量。
(4)假如每一个反应体系中酶浓度增加至4倍时，Km，Vmax是多少？当［S］=5.0×10-5 mol/L 时，v是多少？答：(1)Vmax=0.25 μmol/min∵v=Vmax[S]/(Km+[S])∴Km=0.25×5.0× 10-5/0.20 - 5.0× 10-5 =1.25× 10-5(2) v=Vmax[S]/Km+[S]=0.25×1.0 × 10-5/(1.25× 10-5 +1.0× 10-5)=0.0185μmol/minv =Vmax=0.25 μmol/min(3) [S]=2.0 × 10-3 v=0.25μmol/min，p=0.25×5=1.25μmol[S]=2.0 × 10-5 v=0.25×2.0×10-5 /(1.25×10-5+2.0×10-5)=0.033μmol/minp=0.033×5=0.17μmol(4)∵Km与[E]无关，∴Km不变.∵V=Vmax[S]/(Km+[S]),[E]增大4倍∴Vmax增大4倍=0.25×4=1.0μmol/minV=1.0×5.0×10-5 /(1.25 × 10-5+5.0×10-5)=0.8μmol/min。