实验九 电位滴定法测定酱油中氨基酸态氮的含量
一、实验原理
根据氨基酸的两性作用,加入甲醛以固定氨基的碱性,使羧基显示出酸性,将酸度计的玻璃电极及甘汞电极(或复合电极)插入被测液中构成电池,用碱液滴定,根据酸度计指示的pH 值判断和控制滴定终点。
二、仪器与试剂
1、仪器 电位滴定仪 磁力搅拌器 烧杯(250mL ) 微量滴定管
2、试剂 pH=6.18标准缓冲溶液;20%中性甲醛溶液;0.05mol/L 左右的NaOH 标准溶液
三、实验操作方法
(1)样品处理
先根据实验四测出待测酱油的比重,然后吸取酱油10.00mL 于100mL 容量瓶中,加水定容。
吸取定容液20.00mL 于250mL 烧杯中,加水60mL ,放入磁力转子,开动磁力搅拌器使转速适当。
用pH6.18的标准缓冲液校正好仪器,然后将电极清洗干净,再插入到上述酱油液中,用NaOH 标准溶液滴定至酸度计指示pH8.2,记下消耗的NaOH 溶液体积。
(2)氨基酸的滴定
在上述滴定至pH8.2的溶液中加入10.00 mL 的中性甲醛溶液,再用NaOH 标准溶液滴定至pH9.2,记下消耗的NaOH 溶液体积V 1。
(3)空白滴定
吸取80mL 蒸馏水于250mL 的烧杯中,用NaOH 标准溶液滴定至pH8.2,然后加入10.00mL 中性甲醛溶液,再用NaOH 标准溶液滴定至pH9.2,记下加入甲醛后消耗的NaOH 溶液体积V 2。
四、实验计算
式中:
V 1——酱油稀释液在加入甲醛后滴定至pH9.2所用NaOH 标准溶液的100100
20V 014.0C V V %21⨯÷⨯⨯⨯-=酱油)(氨基酸态氮
体积mL;
V2——空白滴定在加入甲醛后滴定至pH9.2所用NaOH标准溶液的体积mL
C ——NaOH标准溶液的浓度mol/L
V——吸取的酱油的体积mL
0.014——氮的毫摩尔质量g/m mol。