植物的胚胎培养教育课件
24.4±2.75 (11) 100.0 (19)
鱼雷形胚期 451-700
拐杖形胚及 700及更
成熟期
大
大量元素①+维生素③+2%蔗糖 大量元素①+2%蔗糖
胚柄的作用
在培养中胚柄的存在对于幼胚的存活是一个关键因素。
表8-3 红花菜 豆中胚柄对胚 在离体条件下 生长和发育的 作用(引自
Yeung等, 1979)
开始培养时期
①
(鲜重)
处理
鲜重±SE② (N)
离体培养的植物成熟胚和幼胚组织,在外源激素的 诱导下,可发生生物钟的强行逆转,经脱分化形成 愈伤组织或胚性愈伤组织,并经再分化形成完整植 株,如水稻、小麦等(图8-1)。
图8-1 小麦幼胚体细胞无性系(左)及其再生(右)
8.1.5 影响离体幼胚培养的其它因素
幼胚的发育时期
表8-1 荠菜胚胎不同发育时期对营养的需求(引自Torrey,19
4)胚乳看护培养
非常幼小的杂种胚,采用看护培养,即把发育不 全的杂种胚埋在从正常发育的胚珠中取出的胚乳 内,培养至幼苗期。
黄瓜远缘杂种幼胎培养
8.1.4 离体幼胚培养的生长发育类型
(1) 正常胚发育
离体培养的幼胚,在控制条件下,按照活体 内的发育方式发育,最终发育成成熟胚,进而萌 发形成小植株。这是幼胚培养胚拯救的正常发育 模式。
植物胚胎发生过程: 原胚-球形胚-心型胚-鱼雷胚-子叶胚
球 形 胚 前
球 形 胚
期
心
型 胚 前
鱼 雷 胚
期
(2)异常胚发育
A、早熟萌发 离体的幼胚在培养基上不仅能越过休眠期,而且还
常常终止进行此后的胚胎发育,直接长成弱小的幼 苗,而且这种幼苗只具有那些当胚离体时已具有的 结构,这种未完成正常的胚胎发育过程而形成幼苗 的现象叫做早熟萌发。 大麦未成熟胚离体培养中,CH能促进胚胎的继续 发育,抑制早熟萌发。 培养基中高浓度的蔗糖(12~18%)同样能抑制荠 菜胚的早熟萌发。
胚发育时期 胚长(μm)营养要求
球形胚早期 22-60 球形胚晚期 61-80
心形胚期 81-450
小于40 μm的胚对营养的需求不详
基本培养基(大量元素①+微量元素②+维生 素③+2%蔗糖)+IAA(0.1 mg/L)+KT (0.001 mg/L)+硫胺腺嘌呤(0.001 mg/L)
仅基本培养基
植物的胚胎 培养PPT讲
座
植物胚胎培养的概念
植物的胚胎培养是指对植物的胚、子房、胚珠和胚 乳等胚胎组织进行离体培养,使其发育成完整植株 或者离体研究植物胚胎发生机理的生物技术。
胚乳 胚 子房 胚珠
8.1 离体胚培养 8.2 植物胚珠和子房培养 8.3 离体授粉、受精与合子培养 8.4 胚乳培养
8.1 离体胚培养
8. 1.1 离体胚培养的概念 离体胚培养(embryo culture)指从植物种子中分
离出胚组织进行离体培养的技术。包括幼胚培养和 成熟胚培养。
幼胚
花生成熟胚
8.1.2 成熟胚培养(mature embryo culture) 是指对发育成熟种子胚的培养。 成熟胚培养主要是为了打破种子的休眠,并诱导形
形成植株的胚数占 (培养的胚数)百
分比
( 0.87±0.02mg
)
只有胚本身 胚连着胚柄
3.19±0.52 (10) 8.91±1.16③ (10)
胚与离体胚柄直接接触 6.22±0.78③ (10)
41.5 (89) 88.4 (95) 72.5 (51)
心形晚期 (
1.07±0.07mg )
子叶形早期 (3.92±0.19)
碳源:蔗糖是幼胚培养基中最好的碳水化合物。 不同发育时期的胚要求不同的Fra bibliotek糖浓度,往往胚龄越
小,糖浓度要求越高,成熟胚,2%;而幼胚,4%甚至更 高浓度的蔗糖。如曼陀罗的前心形期胚培养要求8%的蔗糖 含量,而鱼雷期要降到1.0%~0.5%。
氨基酸:谷氨酰胺是促进离体胚生长最有效的氨基酸; 酪蛋白水解物(CH),不同物种的离体胚对 CH的浓度要求不同 。
成小植株,因此,培养基相对简单,一般只需要大 量元素和糖即可,有些培养为了打破种子休眠也加 入一些植物激素。
水稻成熟胚培养
观赏与药用(紫杉醇) 种子有休眠特性
台湾红豆杉成熟胚培养
种子有休眠特性 (种皮与未完成 后熟的原因)
牡丹成熟胚的离体培养与快速繁殖
8.1.3 幼胚培养(immature embryo culture) 是指对发育早期胚或未成熟胚的培养,即供给一
胚乳提取物。一般认为,八分成熟的椰乳对幼胚培养作 用显著,而完全成熟的椰乳作用不明显。大麦胚乳提取物 可以促进大麦胚的生长 ,玉米胚乳组织的提取物能促进 离体玉米胚的生长 。
维生素,对发育初期的幼胚培养来说,则是必须的。 以不加植物生长调节剂为宜。
3) 培养
离体胚培养一般用固体培养基,大多数植物的 离体胚在25~30℃生长良好。一般离体幼胚 培养前期在散射光下培养,后期则要在2000 Lx光强度左右培养。
定的培养条件,使幼胚逐步发育成成熟胚,并进 一步发育成小植株的技术。 幼胚培养要根据幼胚发育的不同阶段,选用相应 的培养基、营养条件和培养条件。
远缘杂交杂种胚拯救 ,使胚发育不全的植株 获得大量的后代
1) 幼胚的分离
适当时期未成熟种子---消毒---解剖,剥取完整幼胚。
2)培养基
常用的培养基有Cox、 Rijven、Rappaport、 Ranaswamy、Norstog以及MS、B5、White、Nitsch等 培养基。
胚与加热杀死的 离体胚柄直接接触
胚距胚柄1cm 只有胚本身 胚连着胚柄 只有胚本身 胚连着胚柄
4.10±0.43 (5) 37.0 (43)
- 17.2±2.84 (5)
33.3 (30) 94.4 (18)
15.4±1.41 (6) 94.4 (18)
20.3±2.5 (7) 100.0 (18)
B、胚不完全发育
在一些植物中,植株上发育的种子并无胚根、 胚芽、和子叶的分化。
兰花种子球形胚是未分化的,在离体培养条件 下,胚即增大形成原球茎,最后由原球茎分化 出根和茎。
兔丝子属(Guscuta)
植物的成熟胚有胚芽, 但没有胚根,在离体培 养中很难诱导根的分化。
C. 胚脱分化和再分化