– 目的1：申报资料的真实性 – 目的2：GMP符合性检查
无菌生产工艺验证
FDA新药申报资料对无菌药品工 艺验证具体内容要求（1）
• A. 厂房和设施
• 布局图，包括洁区划分 • 设备分布图
• B. 总体生产流程介绍
• 产品过滤 • 溶液储存时间 • 关键操作
• C. 容器、密封部件、设备和器具的灭菌去热原过程
过滤器的选择
• 化学相容性
• 证明过滤介质不会把外来物质带进产品
• 证明无菌过滤介质不受产品的影响，削弱它 的强度和完整性
• 测试包括：
– 可氧化物质 – 溶剂系统中的重量变动 – 析出物分析，吸附分析 – 完整性试验 – 流量变化 – 外观物理变化 – 生物截留能力
无菌生产工艺验证
过滤器的完整性试验
艺验证的要求》 • 欧盟GMP附录1《无菌药品生产》
无菌生产工艺验证
美国FDA要求的新药申报资料
• 1. • 2. • 3. • 4. • 5. • 6. • 7. • 8. • 9. • 10. • 11.
适应症 药学和毒理学研究 化合物研究 生产工艺 标准和控制 微生物学研究 现场检查 样品测试 动物试验 临床研究 生物利用
无菌生产工艺验证
辅助区环境监测频率
洁净室
测试项目 监测频率
辅助区所有房间
空气悬浮粒子 每三个月一次 空气浮游菌 表面微生物
无菌生产工艺验证
微生物检测方法的特点
• 空气浮游菌
• 定量、准确、取样量大，但易干扰气流
• 沉降菌
• 取样时间长，不干扰气流，但非定量、检出率低
• 接触碟
• 光滑表面，方便，但需特殊的培养碟
• 以无菌保证为核心，在充分评估工艺各步骤微生物 污染风险的基础上，利用现有的科学技术，对风险 控制手段的有效性进行确认。
无菌生产工艺验证
过滤器及 安装操作 ，过滤前 溶液含菌 量
气体，容 器管道
环境，人 员操作， 转移
无菌冻干粉针剂生产工艺流程
配料
原料，辅料，配料器具，环境，人员操作
容器，WFI，配液器具，环境，操作
无菌生产工艺验证
如何制造出高质量的无菌药品？
• 对生产工艺的深刻理解 • 识别、评估各工艺步骤对无菌性，热原，微粒
等质量因素及其影响程度 • 在工艺过程中采取有效控制手段 • 对这些手段的有效性进行验证 • 遵循相关法规的要求
无菌生产工艺验证
二、无菌生产工艺验证原则与 申报资料要求
• 无菌生产工艺验证原则
• 最终灭菌工艺
• 先将药品的各个部件（产品，容器和密封件）在符 合要求的环境下组成最终的包装形式，最后让产品 在其最终容器中进行灭菌处理（通常使用热力学灭 菌或辐射灭菌）。
• 无菌生产工艺
• 药品的各个部件（产品，容器和密封件）分别经过 灭菌处理，再在高洁净度的环境中组装最终产品， 但产品装入其最终容器后不再进行灭菌处理。
胶塞，过滤器，灌 装部件，清洁工具 ，灭菌釜，清洁及 灭菌过程
冻干机密闭性
西林瓶，WFI，洗 瓶机，干热灭菌设 备
压盖前储存时间，转移，胶塞密 闭性，压盖后的密闭性
无菌生产工艺验证
无菌工艺无菌性的保证因素
原材料
生产过程
产品
•水 •原料药 •辅料 •气体 •容器/密封件
•设施
•容器、设备的清洗 灭菌
2类 – 口服制剂
3类 – 局部给药
– 手术、烧伤及严重创伤 – 眼部给药 – 耳、鼻及呼吸道吸入 – 阴道、尿道给药 – 直肠给药
4类 – 含动物组织的口服制剂 5类 – 兼用途径
无菌生产工艺验证
注射剂的风险
• 风险1 - 微生物污染 • 风险2 - 热原的污染 • 风险3 - 不溶性微粒 • 风险4 - 纯度
• 分别灭菌溶液的工艺过程 • 完整的批生产记录
无菌生产工艺验证
FDA新药申报资料对无菌药品工 艺验证具体内容要求（2）
• C. 培养基灌装的程序和标准
• 灌装房间 • 密封系统类型和尺寸 • 每个容器灌装体积 • 培养基类型 • 灌装数量 • 培养数量 • 阳性数量 • 培养条件 • 灌装日期 • 挑战条件叙述 • 环境监测 • 产品正常工艺和培养基灌装工艺的工艺参数
无菌生产工艺验证
三、无菌生产工艺验证的具体内 容和方法
• 厂房和设施（布局、空气净化系统包括HEPA， WFI系 统）
• 器具、容器的灭菌除热原过程
• 灌装部件、胶塞的灭菌过程 • 洗瓶、干热去热原过程 • 配液灌、储液罐及管道、冻干机灭菌过程
• 过滤除菌过程 • 灌装过程（环境、人员监测） • 容器密闭性 • 综合验证：培养基灌装试验（工艺模拟实验） • 实验室控制（微生物测试标准方法、无菌检查）
– 产品／水起泡点 – 扩散流
• 吸附
– 客户定制 – 流速 – 产量 – 操作温度
– 压力
– 系统尺寸大小
验证必须是以产品为介质，在最差的条件下进行
无菌生产工艺验证
过滤器的选择
• 工艺特性
• 所要求的流量 • 所要求的压差 • 可使用的灭菌方法 • 过滤介质的寿命
• 过滤器结构
• 筒式，平板式
无菌生产工艺验证
无菌生产工艺验证
过滤系统验证小结
• 过滤器的选择应符合工艺和产品的特性 • 过滤器的验证是一个技术复杂的过程 • 国外一般委托过滤器生产厂家进行选择和验证
无菌生产工艺验证
3.4 培养基灌装试验
• 采用正常的生产工艺，用培养基代替产品进行灌装，以考察生产 过程、设备和包装形式、人员操作等整个体系能始终如一地生产 出符合要求的无菌产品
无菌生产工艺验证
3.1 原辅料的控制
• 无菌原料药
• 其本身的生产工艺应按无菌生产工艺验证原则进行 • 包装和运输应是考察重点
• 非无菌原料或辅料
• 尽可能降低微生物负荷- < 50CFU/g • 生产的洁净环境 • 设备与其他物料及人员 • 生产用水
无菌生产工艺验证
非无菌原料或辅料关键控制点
• 精烘包阶段环境至少十万级以上 • 人员着装、人流物流控制，环境清洁规程 • 设备清洁规程，设定内控限度 • 预先采取高温或过滤是降低微生物污染的有效
FDA《无菌生产工艺指南》第五页
无菌生产工艺验证
制订环境监控方案的原则
• 明确监控的关键控制点
• 给产品构成最大风险的位置，如产品暴露位置、直接接 触表面
• 人员
• 科学建立控制标准和方案
• 标准应满足无菌生产微生物控制要求，并结合取样点位 置和生产操作的相互关系
• 建立警戒和纠偏标准 • 进行数据分析
• 目的是确定过滤系统不存在使液体不经过过滤 介质到达过滤器下游的通道
• 起泡点试验
压力表
• 前向流试验（扩散流）
滤芯
压力表
流量计
无菌生产工艺验证
无菌过滤器微生物挑战试验
• 目的：证实过滤器是有能力截获微生物，而且 超过了工艺物流自身最大的生物负荷
• 模拟实际工艺的压力流量等参数 • 菌种：缺陷型假单胞菌 • 数量：按过滤器面积107个/cm2 • 步骤
• 棉签法
• 不规则表面，操作稍复杂
无菌生产工艺验证
监测的实施
• 在生产过程中，无菌灌装线上沉降碟的放置应在所有操 作开始前完成
• 空气浮游菌的测试应根据生产情况开空气取样仪 • 灌装线上的表面微生物测试应在灌装结束后进行 • 监测人员根据生产和人员操作的情况，可随时要求进行
操作人员手套的微生物测试，操作人员在测试前不应喷 洒无菌酒精，在测试后应更换手套。对于无菌服的微生 物测试一般在操作人员退出B级区之前进行。 • 所有的样品在测试后都应装入灭菌袋中适当包裹，以 避免样品在转移途中受到污染。
其他风险： 安全性（组织的刺激性，毒性发应） 渗透压 pH
无菌生产工艺验证
注射剂风险控制手段
• 微生物污染风险 – 注射剂必须是无菌 • 热原污染 – 控制限度 • 不溶性微粒 – 控制限度 • 纯度 – 原料工艺
其他风险控制手段： 安全性临床实验 等渗，等张，pH调节
无菌生产工艺验证
无菌药品的制造工艺类别
无菌生产工艺验证
FDA新药申报资料对无菌药品工 艺验证的要求
• 原则：只有当药品的检验方法、生产设施、工艺流程、 包装等能确保药品的性质、含量、质量和纯度时，新药 申请才会被批准
• 资料要求：无菌药品的工艺验证必须包含在申报资料中 • 两级责任制：
• CDER负责资料的审核 • 地方药监负责现场核查
无菌生产工艺验证
无菌生产工艺验证
无菌生产工艺验证
3.3 过滤系统的验证
• 无菌过滤是截留微生物 • 具有一定的风险
• 制造过程中的不均一性 • 对过滤介质的化学腐蚀 • 机械缺陷 • 过高的压力
无菌生产工艺验证
过滤器验证
项目 化学性能
物理性能
生物性能
• 兼容性 • 析出物
• 完整性
• 微生物截留
无菌生产工艺验证
2020/11/16
Hale Waihona Puke 无菌生产工艺验证内容
1. 前言 - 药品的风险 2. 无菌生产工艺验证原则与申报资料要求 3. 无菌生产工艺验证的内容与方法 4. 无菌生产工艺的再验证 5. 小结
无菌生产工艺验证
一、前言
药品的风险取决于其给药途径
1类 – 注射剂 （静脉，肌内，皮内，皮下，脊椎腔，动脉 内…）
无菌生产工艺验证
人员控制
• 无菌服、头套、眼罩、人员操作行为 • 无菌灌装人数控制 • 人员资格认定
• 体检，操作培训，着装培训，着装测试
• 着装测试方法 • 年度资格再确认制度
无菌生产工艺验证
眼罩也为取样点