四.正常血细胞分化发育过程中免疫标志变化特点及 白血病细胞免疫标志特点 (一）. 正常B细胞标志：
CD19 TdT CD34 CD10 CD20 FMC7 CD22 CD23 I期 ： + + + II期： + + -/+ III期： + + + + Ⅳ期： + + + + + 泛B标志：CD19，HLA-DR，cCD79a/cCD22 幼稚B标志：CD34，TdT， CD10， 成熟B标志：CD22，CD23，FMC7
+ + -
+ +/-
+ +/-
泛T：CD2，CD5，CD7， cCD3 幼稚T：CD34，TdT，CD1a, CD4/8， 成熟T：CD3，CD4，CD8
T-ALL的分型
分型 急性早期T前体细胞白血病 early T precursor ALL CD7 + CD2 TdT CD3c/m + +
急性T细胞白血病 T-ALL
B-ALL的分型
亚型 CD19 CD34 TdT CD10 CyIg SmIg
急性早期B前体细胞白血病 + early B-precursor ALL 普通型B 细胞白血病 + Common B-ALL 急性前B细胞白血病 + Pre B-ALL 急性B细胞白血病 + B-ALL
+
+/-
+
+
+
-
-
CD19 CD19
CD11b CD11b
CD7
Side scatter Side scatter
CD117 CD5 CD5
CD45 CD45
CD13 CD13
CD34 CD34
CD64 CD64
CD64
CD19
CD11b CD11b
CD117 CD117
Side scatter
Side scatter
CD13
CD117
cCD13
CD34
HLA-DR
CD11b CD11b
CD117 CD117
Side scatter scatter
HlA-DR HLA-DR
CD5 CD5
CD45 CD45
CD64
CD34
CD64
CD19 CD19
CD11b
CD117 CD117
Side scatter
CD11b
三.免疫分型的作用：
1.区分ALL、AML：形态、组化难以诊断的病例（不典型、 治疗后） 2.将ALL分为B、T细胞及根据细胞发育阶段分为几种亚型 3.对M0、M6 、M7具有诊断意义： M0：形态似ALL、组化（-), MPO(+), 髓标志+, T,BM6：GlyA+，CD71+ M7：CD41+，CD61+（Iib/IIIa）
AML M0 M1 M2 M3 M4 M5 M5a M5b M6 M7
二.急性白血病的MIC分型：1985-1986提出
MIC：Morphology Immunology Cytogenitics 80年代免疫学研究的进展，单克隆抗体的大量涌现， 利用特异的单抗可以明确区分ALL、AML及进一步 鉴定亚型，对研究白血病的生物学特性，指导临床 治疗及判断预后起着重要的作用
-/+
-
+
-
+
-
+
-/+
+
意义：Common B-ALL 预后相对较好，CD34+B-ALL比CD34预后好，但CD34+患者伴Ph1+预后差。B-ALL预后相对 差，但随化疗方案改进，预后有所改善。
(二）.正常T细胞标志：根据在胸腺内发育阶段分4期
CD7 CD2 CD5 CD34 CD1a CD3c/m CD4 CD8 I期 ： II期： III期： Ⅳ期： + + + + + + + + + + + + + -/+ -/+ +/+ +/+
CD117 CD11 7
CD45
CD64 CD64
CD34 CD34
CD64 CD64
CD34 CD34
CD79a
cMPO
CD11b CD11b
CD117 CD117
Side scatter Side scatter
HlA-DR HLA-DR
CD5 CD5
CD45 CD45
CD64
CD34
CD64
正常BM各系细胞比率： 淋巴：20-30%：T：70%，B：20%，NK：10%； 单核：2-6%±；粒细胞：40-60%；有核红：<50%
FCM的主要测定指标：FSC，SSC，FL1，FL2，FL3（FL4） FSC：反应细胞的大小。SSC：反应细胞内颗粒的多少。 FCM设门法： FSC/SSC： 缺点： 不能将淋巴、单核及幼稚细胞区分开 CD45/SSC：CD45是WBC抗原，RBC、Plt为阴性。 CD45在成熟细胞表达强，幼稚细胞表达弱， 在淋巴、单核及粒细胞表达强度不同。 优点：能将淋巴、单核及幼稚细胞区分开。特异分析 白血病细胞免疫表型 FCM标记方法： 单标：一种单抗/tube: FL1,FSC,SSC(三参数） 双标：(两种单抗/tube/)：FL1,FL1,FSC.SSC（四参数） 三/四标：(三种单抗/tube)(四种单抗/tube)：FL1-FL3/4,FSC,SSC
+
+
-
+
T-ALL特点： 1. 幼稚T细胞数量增多：CD34+，TdT+ 2. 泛T标志丢失 3. CD4/8双+或CD4/CD8单阳
意义：儿童：ALL发病率占肿瘤的25%， B-ALL 预后比T-ALL相对好 成人：ALL 发病率20% T-ALL 预后比B-ALL 好。
(三).正常粒细胞标志
白血病免疫分型
北京大学血液病研究所
一.急性白血病FAB分型：1976年提出,以形态为基础。
ALL L1 以小细胞为主，大小一致 L2 以大细胞为主，大小不一 L3 以大细胞为主，大小一致 微小分化型急性髓细胞白血病, 原始细胞>30% 急性髓细胞白血病未分化型, 原始细胞》90% 急性髓细胞白血病部分分化型，原始细胞30-89% 急性早幼粒细胞白血病，异常早幼粒细胞>30% 急性粒单核细胞白血病，原始细胞>30%，单核20-80% 急性单核细胞白血病，原单+幼单>30% 未分化型，原单细胞》80% 部分分化型，原单细胞<80% 急性红白血病，原始细胞>30%，有核红细胞>50% 急性巨核细胞白血病，原巨核细胞>30%
cMPO CD13 CD34 CD117 HLA-DR CD33 CD11b CD15 CD64 CD10
幼稚粒 成熟粒
+ +
+ +
+ -
+ -
+ -
+ -
+
+
+
+
全粒细胞标志：CD13， cMPO 幼稚粒细胞：CD34，CD117，HLA-DR，CD33 成熟粒细胞：CD15，CD11b，CD10，CD64
CD11b CD11b
CD5 CD5
CD45 CD45
CD64
CD34
CD64 CD64
CD19 CD19
GlyA GlyA
CD11b
CD117
CD45
CD11b
CD5
CD64
CD34
GlyA
CD64
CD19
CD41
干祖细胞标志：T祖细胞 CD34 + TdT + CD117 -/+ HLA-DR +/CD38 +
CD11b
CD117
CD45
CD11b
CD5
Side scatter
CD64
CD34
CD64
CD19
CD11b
CD7
Side scatter
HLA-DR
CD5
CD45
CD117
CD34
CD117
CD19
CD11b
CD7
CD45
CD11b CD10-,CD34CD117
CD7
Side scatter
B祖细胞 + + + +/-
髓祖细胞 + + + +
诊断白血病主要标志： B-ALL：CD34，HLA-DR，CD19，CD10+/-，cCD79 T-ALL： CD34，CD38, CD7,CD2+/-,CD5+/-,cCD3 AML： CD34，CD117，CD33，CD13，cMPO M3：CD34 -，HLA-DRM2：CD19+：t（8，21） M4/M5：CD14+ M6：GlyA+,CD71+ M7：IIb/IIIa(CD41,CD61)+
(四).正常单核细胞标志：
HLA-DR CD33 CD13 CD34 CD117 CD14 CD64
幼稚单 成熟单
+ +
+ +
+ +
+ -
+ -
+
+
全单核细胞标志：CD33，CD13，HLA-DR 幼稚单核细胞标志：CD34，CD117， 成熟单核细胞标志：CD14，CD64 (五).成熟粒、单核细胞主要区别： 成熟粒细胞：CD33- HLA-DR- CD14- CD64+dim 成熟单核细胞：CD33+ HLA-DR+ CD14+ CD64+st