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医学免疫学实验课件-实验五 中性粒细胞吞噬检测

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瑞氏染色:
血涂片干燥后,涂面上滴瑞 氏染液7~8滴,3分钟。
+勿使染液干涸
用水冲洗
平持玻片,在一端 加水,使染料“漂” 走。
待干,镜检。
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油镜观察结果:
可见中性粒细胞吞噬葡萄球菌。 如染色正确,可见细胞核及被吞噬细菌染成 紫色,而中性粒细胞的细胞浆则为淡红色。
——细胞免疫检测技术
天然免疫功能测定
检测机体天然免疫功能的状态,是评价机体 免疫功能的重要组成部分。
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天然免疫功能测定
常用方法:
中性粒细胞吞噬功能检测 巨噬细胞吞噬功能检测 溶菌酶的测定 补体参与的反应
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中性粒细胞吞噬功能的检测
中性粒细胞吞噬细菌的现象称为小吞噬现 象,可以通过体外实验观察其吞噬细菌的情 况并测定吞噬功能。
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四、显微镜的维护
1.精密仪器要注意爱护,勿随意拆卸和碰撞。 2.细调节器是显微镜最精细的部分,不能往返 连续回转。 3.显微镜使用过程中,如发现问题应及时向老 师报告并进行登记,以便检修。
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中性粒细胞吞噬功能的检测
吞噬细 菌的中 性粒细 胞
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光学显微镜油镜的使用和保护
一、油镜头的识别 镜头下缘有一圈白线,
并刻有100×、或oil字样。
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二、油镜的使用
检查染色标本时,光度宜强。 显微镜亮度开关调至最亮,光圈完全打开, 集光器上升与载物台相平。
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三、油镜的使用原理
光线通过玻片与油镜头之 间的空气时,因介质密度不 同发生折射,使物象显现不 清。
若在油镜与载玻片之间滴 香柏油,则物象明亮清晰。
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四、显微镜的维护
1.使用完毕,用擦镜纸1 拭去镜头的香柏油。 2.擦镜纸2 上滴乙酸乙酯,擦拭镜头。 3.干净的擦镜纸3 擦拭镜头的乙酸乙酯。
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中性粒细胞吞噬功能的检测
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材料:
1.抗凝人血 2.葡萄球菌18小时肉汤培养物 3.其他 玻片、注射器、瑞氏染色液、
pH6.8PBS(缓冲液)。
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步骤:
取肝素抗凝血2滴(约0.2ml)
+
取葡萄球菌培养物1滴(0.1ml,12亿/ml)
混匀,37℃10分钟 取少量置于载玻片上,推成薄血片,干燥。
瑞氏染色
油镜观察
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肝素抗凝血:
外周血2ml + 肝素少量
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推血片:
1.左手的拇指和中指夹持载玻片的边缘,血滴 在离载玻片一端中4~5毫米处。
2.另取一边缘光滑平整的玻片作推片,将推片 一角置于血滴,向下使之接触到载玻片,使血液 均匀分散在推片与载片的接触处。
3.使推片与载玻片呈30~40°角,向另一端平 稳地推出。
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