1.2基因工程的基本操作程序（第1课时）
学习目标：
1、简述基因工程原理及基本操作程序。
2、尝试设计某一转基因生物的研制过程
学习重点：
基因工程基本操作程序的四个步骤。
学习难点：
1、从基因文库中获取目的基因。
2、利用PCR技术扩增目的基因。
课前案
自主学习【学法指导】 1．通读课本P8-P16，勾画重点。
2．再读课本，独立完成下列问题（要求：能准确写出关键词与句，以课本为准）
一、基因工程的基本操作程序简述
①目的基因的；②的构建；
③将目的基因；④目的基因的。
二、目的基因的获取：
1、目的基因：符合人们需要的，主要指编码蛋白质的，也可以是一些具有作用的因子。
2．获取目的基因的方法
（1）从基因文库中获取目的基因
①基因文库：将含有某种生物不同基因的许多，导人受体菌的群体中，各个受体菌
分别含有这种生物的不同基因，称为基因文库。
基因组文库：含有一种生物的基因
②种类
cDNA文库：含有一种生物的基因
③目的基因的获取
根据基因的有关信息：基因的序列、基因在上的位置、基因的产物mRNA、基因的产物蛋白质等特性获取目的基因。
（2）利用PCR技术扩增目的基因。
① PCR：是一项在生物体外特定DNA片段的核酸合成技术。
②条件：已知目的基因的序列。
③过程：目的基因DNA受热形成，与结合，然后在____的作用下进行延伸
形成DNA。
④方式：指数扩增=2n（n为扩增循环的次数）
（3）人工合成法：基因较，序列已知，可以人工合成。
三、基因表达载体的构建
1、表达载体的组成：目的基因+ + +标记基因等。
2、启动子：位于基因的，它是结合的部位，驱动基因转录产
生mRNA。
3、终止子：位于基因的，终止。
4、表达载体的功能：使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且给下一代；使目的基因
和发挥作用。
5、标记基因：受体细胞是否含有目的基因。
【自主小结】
1.基因工程的基本操作程序：
2.目的基因的获取方法：（1）（2）
（3）
3．基因工程实施的核心：
【预习自测】
1．下列正确表示基因操作“四部曲”的是（）
A．提取目的基因→目的基因导入受体细胞→基因表达载体的构建→目的基因的检测和鉴定
B．目的基因的检测和鉴定→提取目的基因→基因表达载体的构建→目的基因导入受体细胞
C．提取目的基因→基因表达载体的构建→目的基因导入受体细胞→目的基因的检测和鉴定
D．基因表达载体的构建→提取目的基因→目的基因导入受体细胞→目的基因的检测和鉴定
2．下列不属于获得目的基因的方法的是（）
A．利用DNA连接酶复制目的基因 B．利用DNA聚合酶复制目的基因
C．从基因文库中获取目的基因 D．利用PCR技术扩增目的基因
3．PCR技术扩增DNA，需要的条件是（）
①目的基因②ATP ③四种脱氧核苷酸④DNA聚合酶等⑤mRNA ⑥核糖体
A．①②③④ B．②③④⑤ C．①③④⑤ D．①②③⑥
4．下列哪项不是基因表达载体的组成成分（）
A．启动子 B．终止密码子 C．标记基因 D．复制原点
5. 在基因表达载体的构建中，所需要的酶是（）
①限制酶②DNA连接酶③解旋酶④DNA聚合酶
A．①② B．①②③ C．①②④ D．①②③④
6.不属于目的基因与运载体结合过程的是（）
A．用一定的限制酶切割质粒，露出黏性末端
B．用同种限制酶切割目的基因，露出黏性末端
C．将切下的目的基因插入到质粒的切口处
D．将重组DNA引入到受体细胞中进行扩增
7．下列获取目的基因的方法中需要模板链的是（）
①从基因文库中获取目的基因②利用PCR技术扩增目的基因③反转录法④通过DNA合成
仪利用化学方法人工合成
A．①②③④B．①②③C．②③④D．②③
【预习自测】参考答案1.C 2.A 3.C 4.B 5.A.6 D.7 D
1.2基因工程的基本操作程序（第1课时）
学习目标：
1、简述基因工程原理及基本操作程序。
2、尝试设计某一转基因生物的研制过程学习重点：基因工程基本操作程序的四个步骤。
学习难点：1、从基因文库中获取目的基因。
2、利用PCR技术扩增目的基因。
课中案
探究一、目的基因的获取
1、从基因文库中获取目的基因
①基因组文库和部分基因文库（如cDNA文库）
基因组文库 cDNA文库
思考：通过上图过程，这两种文库的构建过程的区别以及两种文库的具体区别。
②从基因文库中得到目的基因，可以根据一些信息，如根据基因的、
基因的、基因在染色体上的、基因的，以及基因
的等特性。
2、利用PCR技术扩增目的基因
①PCR是____________________________________技术，是的缩写。
②原理：____________________。
，
③前提：有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根据这一序列合成_________。
④条件：DNA模板、。
⑤扩增过程：
a．变性（℃）：目的基因DNA受热变性后接连为单链
b．退火（℃）：与单链相应互补序列结合
c．延伸（℃）：在的作用下进行延伸
Taq酶的特点是。
3、PCR技术与DNA复制的比较：
3、人工合成：适用于基因比较，核苷酸序列又。
典型例题1．有关基因工程的叙述中，错误的是（）
A．DNA连接酶将黏性未端的碱基对连接起来
B．限制性内切酶用于目的基因的获得
C．目的基因须由载体导入受体细胞
D．人工合成目的基因不用限制性内切酶
探究二、——基因工程的核心
1.基因表达载体= + + +
2.从位置、组成、功能等方面区别启动子、终止子、起始密码、终止密码？
3.将目的基因与运载体连接起来形成重组DNA分子需要哪些工具酶？
4.将目的基因与载体混合并用DNA连接酶处理后，若2个DNA片段之间进行连接会出现几种结果？
典型例题2．下列不属于
．．．目的基因与运载体结合过程的是（）
A．用一定的限制酶切割质粒露出黏性末端B．用同种限制酶切割目的基因露出黏性末端
C．将切下的目的基因的片段插入到质粒切口处D．将重组DNA导入受体细胞中进行扩增
课堂检测（根据个人实际，分层次完成）
【A级】1.哪项不是基因表达载体的组成部分（）
A．启动子B．终止密码C．标记基因D．目的基因
2．根据mRNA的信息推出获取目的基因的方法是（）
A．用DNA探针测出目的基因 B．用mRNA探针测出目的基因
C．用mRNA反转录形成目的基因 D．用PCR技术扩增mRNA
【B级】3.多聚酶链式反应(PCR)是一种体外迅速扩增DNA片段的技术。
PCR过程一般经历下述三十多次循环：95℃下使模板DNA变性、解链→55℃下复性（引物与DNA模板链结合）→72℃下引物链延伸（形成新的脱氧核苷酸链）。
下列有关PCR过程的叙述中不正确的是（）
A．变性过程中破坏的是DNA分子内碱基对之间的氢键，也可利用解旋酶实现
B．复性过程中引物与DNA模板链的结合是依靠碱基互补配对原则完成
C．延伸过程中需要DNA聚合酶、ATP、四种核糖核苷酸
D．PCR与细胞内DNA复制相比所需要酶的最适温度较高
4．科学家已经能够通过基因工程的方法，能使番茄果肉细胞中含有人奶蛋白。
以下有关该基因工程的叙述错误的是（）
A．采用反转录的方法得到的目的基因有启动子、终止子
B．用同种限制酶处理质粒和含目的基因的DNA，可产生相同的黏性末端而形成重组DNA分子
C．番茄的叶肉细胞可作为受体细胞
D．启动子对于目的基因在番茄的叶肉细胞中的表达是不可缺少的
5.下图是利用基因工程技术生产人胰岛素的操作过程示意图，请据图作答。
（1）能否利用人的皮肤细胞来完成①过程？为什么？。
（2）过程②必需的酶是酶，过程③必需的酶是
酶。
（3）与人体细胞中胰岛素基因相比，通过②过程获得的目的基因不含有非编码区和。
（4）若A中共有a个碱基对，其中鸟嘌呤有b个，则③④⑤过程连续进行4次，至少需要提供胸腺嘧啶个。
（5）在利用AB获得C的过程中，必须用切割A和B，使它们产生，再加入，才可形成C。
（6）为使过程⑧更易进行，可用（药剂）处理D。
参考答案
典例1 A 典例2 D
课堂检测
1.B
2.C
3.C
4.A
5.。