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选择性培养基

葡萄糖肉浸液肉汤Dextrose Meat Infusion Broth用途:用于溶血性链球菌的增菌培养配方:(g/L)牛肉粉3.0 氯化钠5.0 蛋白胨10.0 磷酸氢二钾2.0 葡萄糖10.0 pH 值7.5 ±0.1 25℃原理:蛋白胨、牛肉粉提供氮源、维生素和生长因子;氯化钠维持均衡的渗透压;磷酸氢二钾为缓冲剂;葡萄糖提供碳源。

用法:称取本品30.0g,煮沸溶解于1000ml 蒸馏水中,121℃高压灭菌15 分钟,备用。

质量控制:在36± 1℃培养24 小时。

质控菌株溶血性链球菌单增李斯特氏菌大肠杆菌沙门氏菌27853 25922 14028 生长情况(10-8)+++ (10-8)+++ +/+/匹克氏肉汤基础A Pick’s Broth BaseA用途:用于溶血性链球菌的增菌培养配方:(g/L)胰蛋白胨10.0 牛心浸粉20.0 叠氮钠0.065 结晶紫0.002pH 值7.3-7.5原理:25℃胰蛋白胨、牛心浸粉提供碳氮源、维生素和生长因子;脱纤维兔血(或羊血)为溶血性链球菌提供大量生长因子;结晶紫和叠氮钠为选择性抑菌剂。

用法:称取本品30.0g,加热溶于1000ml 蒸馏水中,分装, 121℃高压灭菌15 分钟, 冷至50℃左右时,加入脱纤维羊血,混匀。

质量控制:在36± 1℃培养18-24 小时。

肉浸液肉汤培养基Meat Infusion Broth用途:用于溶血性链球菌、蜡样芽孢杆菌和金黄色葡萄球菌的增菌培养(GB 标准)配方:(g/L)牛肉粉3.0氯化钠5.0蛋白胨12.0 磷酸氢二钾2.0pH 值7.5 ±0.1原理:蛋白胨和牛肉粉提供氮源、维生素、氨基酸和碳源;磷酸氢二钾为缓冲剂;氯化钠可维持均衡的渗透压。

用法:称取本品20.0g,溶解于1000ml 蒸馏水中,121℃高压灭菌15 分钟,备用。

质量控制:在36± 1℃培养18-24 小时。

25℃质控菌株溶血性链球菌金黄色葡萄球菌大肠埃希氏菌沙门氏菌菌株编号ATCC32210 ATCC25923 ATCC25922 ATCC14028生长情况+++ +++ +++ +++ 浑浊浑浊浑浊浑浊叠氮钠葡萄糖肉汤Azide Dextrose Broth用途:用于链球菌的增菌培养配方:(g/L)胰蛋白胨15.0 牛肉浸粉4.5 氯化钠7.5 葡萄糖7.5叠氮钠0.2 pH 值7.0 - 7.4原理:胰蛋白胨和牛肉浸粉提供氮源、维生素、氨基酸和碳源;葡萄糖提供碳源;叠氮化钠可抑制革兰氏阴性菌。

用法:称取本品34.7g,加热搅拌溶解于1000ml 蒸馏水中,分装,121℃高压灭菌15 分钟,备用。

质量控制:在36± 1℃培养18-24 小时。

质控菌株肠球菌大肠埃希氏菌粪肠球菌金黄色葡萄球菌ATCC25922 ATCC29212乙基紫叠氮钠肉汤用途:用于链球菌的增菌培养配方:(g/L)酪蛋白胨13.5 酵母浸粉6.5 葡萄糖5.0 氯化钠5.0 磷酸氢二钠2.7 磷酸二氢钠2.7 叠氮钠0.4 乙基紫0.00083 pH 值7.0± 0.2原理:酪蛋白胨和酵母浸粉提供氮源、维生素和生长因子;葡萄糖提供碳源;叠氮化钠可抑制革兰氏阴性菌;氯化钠维持均衡的渗透压;磷酸氢二钠和磷酸二氢钠做缓冲剂;乙基紫作为指示剂。

用法:取本品35.8g,溶解于1000ml 蒸馏水中,121℃高压灭菌15 分钟,备用。

质量控制:25℃KF 链球菌琼脂KF Streptococcus Agar用途:用于链球菌的选择性分离及计数(GB、SN 标准)配方:(g/L)月示蛋白胨10.0 酵母粉10.0甘油磷酸钠10.0 氯化钠5.0 麦芽糖20.0 乳糖1.0 叠氮钠0.4 琼脂13.0 溴甲酚紫0.015 pH 值7.2± 0.2原理:月示胨和酵母粉提供氮源、维生素和生长因子;麦芽糖和乳糖为可发酵糖类;氯化钠维持均衡的渗透压;叠氮化钠可抑制革兰氏阴性菌;琼脂是培养基的凝固剂;溴甲酚紫为指示剂染料。

用法:称取本品69.4g,加热溶解于1000ml 蒸馏水中,121℃高压灭菌15 分钟,冷却至50-60℃时,加入无菌1%TTC 溶液10ml, 混匀,倾入无菌平皿,备用。

质量控制:在36± 0.5℃下培养48h。

菌名菌号生长状况良好被抑制培养特征红色或粉红色中心粪性链球菌大肠埃希氏菌CMCC(B)32223 ATCC25922肠球菌琼脂(胆盐-七叶苷-叠氮钠琼脂) Enterococcus Agar(BileEsculin Azide Agar)用途:用于食品和水中肠球菌的计数货号:HB0133-3 配方:(g/L)牛肉浸粉3.0 胰酪蛋白胨17.0 酵母粉5.0牛胆粉10.0 氯化钠 5.0七叶苷1.0 柠檬酸铁铵0.5 叠氮化钠0.25 柠檬酸钠1.0 琼脂13. pH 值7.1 ±0.2原理:胰酪蛋白胨和牛肉浸粉、酵母粉提供氮源、维生素和生长因子;氯化钠维持均衡的渗透压;细菌水解七叶苷与柠檬酸铁铵中铁离子反应形成黑色的6,7-二羟基香豆素;柠檬酸钠、牛胆粉和叠氮化钠为选择性抑菌剂,抑制非链球菌的细菌;琼脂是培养基的凝固剂。

用法:称取本品56.3g,加热溶解于1000ml 蒸馏水中,121℃高压灭菌15 分钟,冷至45± 1℃,倾入含1ml 样品液平皿中约15ml 培养基,混匀,凝固。

35± 2℃倒置培养基培养24± 2h。

注:从保温开始至做成平板时间不要超过4h。

质量控制:在36± 0.5℃培养24 小时。

菌名菌号生长状况良好被抑制被抑制培养特征棕黑色,具有棕色晕轮————粪链球菌金黄色葡萄球菌大肠埃希氏菌CMCC(B)32223 ATCC6538 ATCC25922CATC 琼脂CATC Agar用途:用于食品和饮料肠球菌的分离培养配方:(g/L)胰酪蛋白胨15.0 酵母浸粉5.0 磷酸二氢钾5.0 柠檬酸钠15.0 吐温80 1.0 碳酸钠2.0 叠氮钠0.4红四氮唑(TTC)0.1 琼脂15.0 pH 值7.0±0.2原理:胰酪蛋白胨、酵母浸粉提供氮源、维生素和矿物质,磷酸二氢钾是缓冲剂。

琼脂是培养基凝固剂。

用法:称取本品58.5g ,加热溶解于1000ml 蒸馏水中,121℃高压灭菌15 分钟,冷至50~55℃时,倾入无菌平皿,备用。

质量控制:25℃胆盐七叶苷琼脂Bile Esculin Agar用途:用于肠球菌和肠道致病菌的分离培养配方:(g/L)蛋白胨8.0牛胆盐20.0 柠檬酸铁0.5 七叶苷1.0琼脂15.0 pH 值7.1 ±0.2原理:蛋白胨提供氮源、维生素和生长因子;细菌水解七叶苷与柠檬酸铁中铁离子反应形成黑色的6,7-二羟基香豆素;牛胆盐为选择性抑菌剂,抑制非链球菌的细菌;琼脂是培养基的凝固剂。

用法:称取本品44.5g,加热溶解于1000ml 蒸馏水中,121℃高压灭菌15 分钟,备用。

质量控制:在36± 1℃培养22-24 小时。

质控菌株肠球菌大肠杆菌金黄色葡萄球菌25922 25923 生长情况(10-7)+++ (10-7)+++ 黑色+ /哥伦比亚血琼脂基础Columbia Blood Agar Base用途:营养非常丰富,用于各种细菌的基础培养基配方:(g/L)酪蛋白胰酶消化物10.0g 心胰酶消化物3.0g玉米淀粉1.0g 肉胃酶消化物 5.0g 酵母浸出粉5.0g 氯化钠5.0g 琼脂10.0g PH 值7.3± 0.2原理:酪蛋白胰酶消化物、肉胃酶消化物、心胰酶消化物和酵母浸出粉提供碳氮源、维生素和氨基酸;淀粉能促进奈瑟氏菌的生长和增强链球菌的溶血特性;氯化钠维持均衡的渗透压;琼脂是培养基的凝固剂。

用法:称取本品39 克,加热溶解于1000ml 蒸馏水中,分装,121℃高压灭菌15 分钟,冷至45-50℃左右时,加入相当于20mg 庆大霉素的无菌硫酸庆大霉素,混匀,倾入无菌平皿。

质量控制:在30-35℃培养18-24 小时。

质控菌株金黄色葡萄球菌单增李斯特氏菌大肠埃希氏菌沙门氏菌铜绿假单胞菌菌株编号ATCC 25923 ATCC 19114 ATCC 25922 ATCC 14028 CMCC 10104 生长情况良好良好良好良好良好有黄色色素无色透明小菌落无色透明大菌落无色大菌落有绿色色素其它特征LIM 培养基LIM Medium用途:用于链球菌的分离培养(Japan 方法)配方:(g/L)牛肉粉10.0 胰蛋白胨20.0 葡萄糖2.0碳酸氢钠2.0 氯化钠2.0 磷酸氢二钠0.4 pH 值7.8 ±0.1原理:胰蛋白胨和牛肉粉提供氮源、维生素和生长因子;葡萄糖提供碳源;氯化钠维持均衡的渗透压磷酸氢二钠作为缓冲剂。

用法:取本品36.4g,溶解于1000ml 蒸馏水中,121℃高压灭菌15 分钟,待培养基冷至45-50℃时,加入多粘素E10mg 和萘啶酮酸15mg ,混匀质量控制:25℃BETA-SSA 琼脂BETA-SSA Agar用途:用于链球菌的选择性分离培养配方:(g/L)蛋白胨15.0 大豆蛋白胨5.0 氯化钠5.0麦芽糖0.25 琼脂13.0 抑菌剂0.0262 pH 值7.1 - 7.5原理:蛋白胨和大豆蛋白胨提供氮源、维生素、氨基酸和碳源;氯化钠可维持均衡的渗透压;琼脂是培养基的凝固剂。

用法:取本品38.3g,溶解于1000ml 蒸馏水中,115℃高压灭菌20 分钟,冷至50℃左右时,无菌加入5-10%的脱纤维羊血,混匀,倾入无菌平皿。

质量控制:25℃粪肠球菌琼脂Enterococcus faecalis Agar用途:用于粪肠球菌的选择性分离配方:(g/L)月示胨0.1 麦芽糖13.0 酵母浸粉10.0 甘油磷酸钠20.0 氯化钠10.0 乳糖10.0溴甲酚紫 5.0叠氮钠1.0 TTC0.015 琼脂0.4 pH 值7.2 ±0.2原理:月示胨和酵母浸粉提供氮源、维生素、氨基酸和碳源;乳糖是大肠菌群可发酵的糖类;叠氮化钠可抑制革兰氏阴性菌;溴甲酚紫和TTC 作为指示剂;琼脂是培养基的凝固剂。

用法:取本品70.0g , 加热溶解于1000ml 蒸馏水中,煮沸5 分钟,冷至50℃左右,倾入无菌平皿,备用。

质量控制:25℃缓冲蛋白胨水Buffered Peptone Water用途:用于阪崎杆菌前增菌培养(GB2008 标准)配方:(g/L)蛋白胨10.0 氯化钠 5.0磷酸氢二钠(含12 个结晶水)9.0 磷酸二氢钾1.5 pH 值7.2 ±0.2 25℃原理:白胨提供碳源和氮源满足细菌生长的需求;氯化钠可维持均衡的渗透压;磷酸二氢钾和磷酸氢二钠是缓冲剂用法:称取本品20.0g ,加热溶解于1000ml 蒸馏水中,121℃高压灭菌15 分钟备用。

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