平板：50个/班
▪
涂布器：10个/班
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三角瓶：30个/班
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试管：190支/班
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5mL移液管：10个/班
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1mL移液管：20个/班（每种菌各一支，但要做好标记）
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镊子：10个/班
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接种环/针：10个/班
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滤纸：4盒
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无菌生理盐水
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酒精棉球：10瓶/班
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3种药敏试纸
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固体培养基：750mL/班
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半固体培养基：200mL/班
▪ 紫外线：平板 ▪ 平板：2个*10=20 ▪ 涂布器：1个*10=10 ▪ 滤纸：2—3张 ▪ 固体培养基：15mL*2*10=300mL ▪ 不用药物:固体平板 ▪ 平板：3个*10=30 ▪ 5mL移液管：1支*10=10 ▪ 1mL移液管：2支*10=20 ▪ 固体培养基：15mL/*3个*10=450mL ▪ 镊子：1支*10=10
3、pH对微生物生长的影响
▪ （1）配制pH为3.0、7.0、9.0的牛肉膏蛋白胨液 体培养基，做好记号，高压备用。
▪ （2）将大肠杆菌和金黄色葡萄球菌按1﹪的量分 别接种与（1）的肉汤中，每种接种两支。留1只 做对照。
▪ （3）将接种后培养基置37℃振荡培养24h观察结 果。根据菌液的浑浊度判断大肠杆菌和金黄色葡 萄球菌生长繁殖的最适pH值。
▪ （6）将平板倒置于37℃恒温箱中，培养24h后观察结果，测量 并记录抑菌圈的直径，根据其直径的大小，可初步确定测试药 品的抑菌效能。
五、注意事项
▪ 1、试验过程中应注意无菌操作。 ▪ 2、培养温度应根据需要调整。 ▪ 3、正确标记各种试验用的培养基，防止培养物培养过程源自和他人的混淆。六、结果与分析
▪
液体培养基：750mL/班
▪
（pH=7.0 450mL/班；pH=9.0 150mL/班；pH=3.0 150mL/班）
▪ O2：不用摆斜面 固体试管 ▪ 试管：4支/组 4*10=40 ▪ 接种环：1支/组 1*10=10 ▪ 半固体培养基：5mL/支*4支*10=200mL ▪ 需要大肠杆菌斜面菌种：最少5支 ▪ 金色葡萄球菌斜面菌种：最少5支 ▪ 温度：液体试管 ▪ 试管：6支/组 6*10=60 ▪ 移液管：1mL*2支*10=20支/1mL ▪ 液体培养基：5mL*6支*10=300 mL ▪ 需要大肠杆菌菌液：最少5支 ▪ 金黄色葡萄球菌菌液：最少5支 ▪ pH: 液体试管 ▪ 三角瓶：3个*10=30个 ▪ 试管：9支*10=90支 ▪ 移液管：1mL*2支*10=20支/1mL ▪ 液体培养基：5mL*9*10=450mL ▪ 需要大肠杆菌菌液：最少5支 ▪ 金黄色葡萄球菌菌液：最少5支
▪ （3）将上述各管分别按不同温度进行震荡培养24h 观察结果，根据比浊法测定微生物数量的原理，菌 液的比浊浓度越大，微生物越多，该温度就越适应 微生物的生长，从而可以判断大肠杆菌和金黄色葡 萄球菌生长繁殖的最适温度。
▪ （4）以“—”表示不生长，“+”表示生长，并以 “+”、“++”、“+++”表示不同生长量。记录结果。
环境因素对微生物生长的影响
项目二 环境因素对微生物生长的影响
2、温度对微生物生长的影响
▪ （1）取6支装灭过菌的牛肉膏蛋白胨培养液试管， 每管装5mL，分别标明20 ℃、37 ℃、45 ℃三种温 度，每种温度2管。
▪ （2）向每管接入培养18~20h的大肠杆菌菌液 0.1mL，混匀。
▪ （4）以“—”表示不生长，“+”表示生长，并以 “+”、“++”、“+++”表示不同生长量。记录结
4、紫外线对微生物生长的影响
▪ （1）取牛肉膏蛋白胨培养基平板2个，分别标明大 肠杆菌、金黄色葡萄球菌等试验菌的名称。
▪ （2）分别用无菌移液管取培养18~20h的大肠杆菌 和金黄色葡萄球菌菌液0.1mL加到相应的平板上， 再用无菌涂棒涂布均匀，然后用无菌纸遮盖部分平 板。
▪ 1、实验结果以绘图或表格的方式，报告 各种因素对微生物的影响的结果
▪ 2、对各种实验结果进行分析讨论
七、思考题
▪ 1、紫外线照射时，为什么要除掉皿盖？ ▪ 2、化学药剂对微生物所形成的抑菌圈内
未长菌部分能否说明微生物细胞已杀死。
实验所需仪器与试剂
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移液管：1mL*2支*10=20材料 仪器
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▪ （3）紫外灯预热10~15min后，把盖有滤纸的平板 置紫外灯下，打开培养皿，紫外线照射20min，取 去纸，盖上皿盖。
▪ （4）37℃培养24h后观察结果，比较并记录两种菌 对紫外线的抵抗能力。
5、不同药物是杀菌试验
▪ （1）取培养18~20h的大肠杆菌和金黄色葡萄球菌斜面各1支， 分别加入4mL无菌生理盐水，用接冲环将菌苔轻轻刮下，振荡， 制成均匀的菌悬液。
▪ （2）取3个无菌培养皿，每个皿底写明菌名及测试药品名称。 ▪ （3）分别用无菌滴管加4滴菌液与相应的无菌培养皿中 ▪ （4）将融化并冷却至45~50℃的肉膏蛋白胨培养基倾入皿中约
15ml，迅速与菌液混合，冷凝，制成含菌平板。 ▪ （5）用镊子取分别土霉素、氯霉素、庆大霉素等的药敏试纸
片各一张，置于同一含菌平板。