答：药品需要色谱纯的；配制好的溶液需要抽气处理——这步操作有些高效液相色谱能自动完成。
2、利用高效液相色谱进行定量和定性分析的依据有哪些？
答：定性分析根据相同色谱系统下同一物质的保留时间相同；定量分析的依据是在一定浓度范围内，浓度与峰面积(或峰高)成正比。
（六）数据记录与结果处理
确定样品内的物质，确定样品中甲苯的浓度。
三、主要仪器和试剂
主要仪器：安捷伦1260液相色谱仪，配有紫外检测器，Phenomenex ODS柱]；1自动进样器。
试剂：色谱纯甲苯、苯、丙酮、甲醇、超纯水；
未知样品1、2、3、4。
教学内容及过程
（一）检查实验预习报告
（二）上次实验存在的问题
（三）高效液相色谱操作
（四）实验内容及步骤
A、溶液配制
1配制标准系列溶液
三组分混标液：每mL溶液分别含5 uL苯、甲苯和丙酮。
分别准确移取0、2.50、5.00、10.00和20.00 uL甲苯容易溶于1.00mL甲醇中。
2流动相的配制、过滤和除气。
标准苯测试液。
未知样品1号、2号、3号和4号。
B、上机测定
1更换流动相。
2按操作规定开动仪器，排气后让色谱柱平衡（流动性为80%甲醇，速度1.0 mL/min）。
3设置色谱工作站参数。
Agilent HPLC仪
色谱柱：
流动相：甲醇：水=8：2
流速：1.0 mL/min
检测波长：254nm
进样体积：10μL
4进样、采集色谱图。
1）三组分混标液
2）标准溶液系列
3）未知样品
5色谱数据分析，打印色谱图及分析报告。
6更换甲醇流动相，清洗色谱柱。
7关闭仪器。
（五）提问
1、高效液相色谱溶液配制需要注意哪些操作？
1）定性分析实验记录
2）定量分析实验记录
丙酮浓度（ul/mL）
峰面积（uV*s）
标样1
50
1875145
标样2
75
2876718
标样3
100
3750275
标样4
125
4607851
丙酮标样标准曲线
课后小结：
本次仪器分析实验高效液相色谱混合物的定量和定性测定，学生通过仪器分析实验，基本了解高效液相色谱的性能及操作，掌握高效液相色谱分析的基本原理，学习高效液相色谱混合物的定量和定性分析，为以后从事仪器设备开发和设计工作，打下良好的基础。
仪器分析实验课程教案
实验名称：高效液相色谱混合物的定量和定性测定
实验类型
验证性
教学时数
7
每组人数
8
一、实验目的及要求：
1．掌握高效液相色谱定性和定量分析的原理及方法；
2．了解高效液相色谱的构造、原理；
3．学习高效液相色谱仪2、色谱工作站参数的设定。
3、定量定性分析方法
教学难点：
(1)、学习高效液相色谱的使用方法、了解该仪器的结构；
(2)、定量定性分析方法
二、实验原理
高效液相色谱由储液器，泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成，储液器中的流动相被高压泵打入系统，样品溶液经进样器进入流动相，被流动相载入色谱柱内，由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数，在两相中作相对运动，经过反复多次的吸附—解吸的分配过程，各组分在移动速度上产生较大的差别，被分离成单个组分依次从柱内流出，通过检测器时，样品浓度被转换成电信号传送到记录仪。