染色部位。 8. 加 95%酒精数滴，并轻轻摇动进行脱色至染色处没有明显颜色。 9. 蒸馏水冲洗载玻片，用吸水纸吸去多余水分。不要让水流直接冲洗载玻片上
染色部位。 10.滴加 50µl 蕃红染色液，室温下静置 2 分钟后，蒸馏水冲洗载玻片，用吸水纸
吸去多余水分。不要让水流直接冲洗载玻片上染色部位。 11.镜检。100X 油镜下观察，肺炎链球菌革兰氏染色阳性，呈矛头状，常成对或
中国疾病预防控制中心
传染病预防控制所呼吸道传染病室
肺炎链球菌相关实验技术操作手册
革兰氏染色
（Gram Stain）
试验步骤： 1. 用移液器在载玻片上滴加 50µl 生理盐水或 PBS buffer。 2. 用无菌取菌环挑取可疑单个菌落溶于步骤 1 的液体中，制成均匀菌悬液。 3. 晾干载玻片。载玻片上的菌液必须完全干燥，才能进行下列操作。 4. 滴加 50µl 结晶紫溶液于载玻片上菌液干燥处，室温下静置 1min。 5. 蒸馏水冲洗载玻片。不要让水流直接冲洗载玻片上染色部位。 6. 滴加 50µl 碘液于染色处，室温下静置 1min。 7. 蒸馏水冲洗载玻片，用吸水纸吸去多余水分。不要让水流直接冲洗载玻片上
成短链排列。
图中箭头处为肺炎链球菌革兰氏染色后镜下观察结果。Leabharlann 本手册仅供实验室内部使用 版
2011 年第 1