乳胶凝集
革兰染色
初代平板接种 （CAP和BAP）
次代培养（CAP和BAP）
图4 脑脊液的操作程序（美国CDC）
表型分型主要包括血清分型和青霉素结合蛋 白分型
血清分型一般采用“荚膜肿胀”试验，按其 抗原性不同可分为90个不同的血清型
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肺炎链球菌分型（二）
由于青霉素结合蛋白的变异，肺炎链球菌对 β-内酰胺类抗生素产生耐药而形成青霉素结 合蛋白分型。
此外，还有肺炎链球菌表面蛋白A分型等一 些其他方法。
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危害性及研究现状（三）
1967年在澳大利亚首次分离出耐青霉素G肺炎 链球菌
儿童中流行的最常见的耐药血清型是6、14、 19和23
2岁以下儿童和65岁以上老年人中的发病率是 最高的
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危害性及研究现状（四）
其他重要的危险因素有慢性心脏病和肺部疾 病、吸烟、脾切除
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肺炎链球菌概念
肺炎链球菌（Streptococcus pneumoniae，S.p） 广泛分布于自然界，常寄居于正常人的上呼 吸道，一般不致病，为条件致病菌。
仅少数有致病力，约95%的大叶性肺炎是由 肺炎链球菌引起的。
此外，肺炎链球菌还可引起中耳炎、鼻窦炎、 脑膜炎及菌血症等多种严重疾病。
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中国CDC传染 病所呼吸道室
图1 肺炎链球菌的形态
肺炎链球菌在血液琼脂平板上可形成细小、灰色、有光泽的 扁平菌落，菌落周围有草绿色α溶血环。
内容提要
链球菌分类 肺炎链球菌概念 危害性及研究现状 肺炎链球菌分型 病原学特点 肺炎链球菌的分离与鉴定 菌株保存
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肺炎链球菌的分离和鉴定
发展中国家，肺炎链球菌性脑膜炎的病死率 高达40 %~50 %
2020/4/23Fra bibliotek10危害性及研究现状（二）
我国肺炎链球菌引起肺炎和脑膜炎的病死率 分别为16.4%、16.0%
WHO最新公布，肺炎链球菌引起的呼吸道感
染在全世界每年有70~100万儿童，是导致
发展中国家5岁以下儿童死亡的主要因素
现在已有23价荚膜多糖疫苗和7价多糖蛋白结 合疫苗
近来针对于小儿科又研制了新型疫苗
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内容提要
链球菌分类 肺炎链球菌概念 危害性及研究现状 肺炎链球菌分型 病原学特点 肺炎链球菌的分离与鉴定 菌株保存
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肺炎链球菌分型（一）
可分为表型分型和基因分型两部分
❖ 革兰染色 ❖ 奥普托欣敏感性 ❖ 胆汁溶解试验
❖ Sp和α溶血性产毒链球菌鉴别
❖ 乳胶凝集试验 ❖ 荚膜肿胀试验
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送到实验室<1小时
脑脊液
送到实验室>1小时
<1小时 2000rpm离心20分钟
2000rpm离心20分钟
上清
沉淀物
>1小时 接种TI培养基 在35℃有CO2的条件下培养
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内容提要
链球菌分类 肺炎链球菌概念 危害性及研究现状 肺炎链球菌分型 病原学特点 肺炎链球菌的分离与鉴定 菌株保存
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危害性及研究现状（一）
引起细菌性脑膜炎病原菌构成的变化
在2002~2003年，美国每年细菌性脑膜炎发生 4000多例，其中肺炎链球菌占引起细菌性脑 膜炎病原菌的61%，脑膜炎的总病死率达16%
链球菌属中对人类致病的主要是A群链球菌和 肺炎链球菌。
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1.根据溶血现象
❖ 甲型溶血性链球菌：菌落周围有1-2mm宽的草绿色 溶血环，称甲型溶血或α溶血，因而这类细菌被称 为草绿色链球菌。
❖ 乙型溶血性链球菌：菌落周围有2-4mm宽，界限分 明，完全透明的无色溶血环，称乙型溶血或β溶血， β溶血环中的红细胞完全溶解。这类细菌致病力强， 常引起人类和动物的多种疾病。
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肺炎链球菌分型（三）
基因分型方法，如青霉素结合蛋白基因DNA指 纹、核糖分型、ERIC-PCR、BOX-PCR、脉冲 场凝胶电泳（PFGE）、限制性片段末端标记方 法（RFEL）、多位点序列分型（MLST）等。
各种分型技术的评价标准，通常是根据它的工 作能力和便利性
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在咳痰或脓汁中，有单个存在、成双或短链状排 列，在液体培养基中常呈短链。在机体内形成荚 膜，革兰染色阳性。
兼性厌氧，营养要求高，在含有血液或血清的培 养基中才能生长。最适温度37.5℃，最适PH为 7.4～7.8，初次培养需要CO2箱，因5～10%肺炎 链球菌菌株需要较高浓度的CO2。
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❖ 丙型链球菌：不产生溶血素，菌落周围无溶血环， 一般不致病，常存在于乳类和粪便中。
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2.根据抗原结构
➢ 按链球菌细胞壁中多糖抗原不同，可分成A，B， C，D，E，F，G，H，K，L，M，N，O，P， Q，R，S，T，U，V，共20群。
➢ 对人致病的链球菌菌株，90%左右属于A群，B， C，D，G群少见。
➢ 同一群的链球菌又分成若干型。
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3.根据对氧的需要
分为需氧，兼性厌氧和厌氧链球菌三类。
前两类对人有致病性，后者主要为口，消化 道，泌尿生殖道正常菌群，在特定条件下致 病。
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内容提要
链球菌分类 肺炎链球菌概念 危害性及研究现状 肺炎链球菌分型 病原学特点 肺炎链球菌的分离与鉴定 菌株保存
肺炎链球菌的研究进展
内容提要
链球菌分类 肺炎链球菌概念 危害性及研究现状 肺炎链球菌分型 病原学特点 肺炎链球菌的分离与鉴定 菌株保存
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链球菌分类
链球菌属细菌是化脓性球菌的另一大类常见的 革兰阳性球菌，排列成双或长短不一的链状。
病原性链球菌引起人类的有各种化脓性炎症。 另一些引起人类肺炎，猩红热等重要疾病。
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内容提要
链球菌分类 肺炎链球菌概念 危害性及研究现状 肺炎链球菌分型 病原学特点 肺炎链球菌的分离与鉴定 菌株保存
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病原学特点
肺炎链球菌呈球形或椭圆形，直径0.6~1.07µm。 常呈矛头状，成双排列，故又名肺炎双球菌 （Diplococcus pneumoniae）。