毕业设计（论文）设计(论文)题目：活苗喷雾免疫与饮水免疫对鸡群抗体的影响差异分析学生姓名：严鹏指导教师：吴结革二级学院：龙蟠学院专业：动物医学班级：M11动物医学（专转本）学号：********** 提交日期：2013年5月11日答辩日期：年月日目录1 绪论 (1)2 免疫程序准备工作 (2)2.1 鸡群选择 (2)2.2 疫苗选择 (2)3 鸡群饮水免疫 (3)3.1 饮水免疫概述及注意事项 (3)3.2 饮水免疫具体要求 (3)4 鸡群活苗喷雾免疫 (4)4.1 喷雾免疫概述及注意事项 (4)4.2 喷雾免疫具体要求 (4)5 免疫效果的测定 (5)5.1 随即抽样 (5)5.2 鸡群抗体的测定 (5)5.3 测定结果的判定 (5)5.4 结果 (5)6 结论 (7)参考文献 (8)致谢 (9)活苗喷雾免疫与饮水免疫对鸡群抗体的影响差异分析摘要鸡场的免疫程序非常复杂，工作量大，目前比较简易的免疫方法是喷雾和饮水，但这两种方法哪一种效果更好，目前国内没有相关的报道。

所以想在同一个鸡场采用不同的免疫方法，观察和检测免疫效果，得出最佳的免疫方法。

选择好鸡群同一时间内采用两种不同的方法进行免疫，然后随机抽样采血测其抗体，记录相关的内容，在实验的基础上科学分析，得出结果。

根据两个鸡群抗体测定的结果，在实际生产中对大批鸡群进行免疫接种时，最适宜的方法是饮水免疫。

关键词：鸡群饮水免疫；鸡群活苗喷雾免疫；抗体差异分析The live vaccine spray immunization with drinking water, immunization flocks antibody variance analysisAbstractFarms immunization program is very complex, heavy workload, relatively simple immune spray and drinking water, but the two methods which is better, there is no domestic related reports. I would like the same farms using different immune method, observation and detection of immune effects, come to the best immune. Choose good chickens at the same time using two different methods for immunization, then random sampling blood test antibody to record the contents of the scientific analysis on the basis of the experiments, the results. According to the results of two flocks antibody assay, when the immunization is carried out on a large number of flocks in the actual production, the most suitable method is drinking immunization.Key words:Chickens drinking water immunization; The chickens live vaccines spray immunization; Antibody difference analysis1 绪论作为鸡群的两种主要免疫方法，活苗喷雾免疫与饮水免疫对鸡群抗体的影响都有着举足轻重的地位。

对于活苗喷雾免疫，可以有效增加疫苗的吸收量，能在气管和支气管黏膜表面产生局部黏膜抗体，从而建立免疫屏障，有效防止和减少病原体从呼吸道的侵入。

喷雾免疫具有省时、省事、应激小等优点，只要操作得当，不仅可以收到良好的免疫效果，而且产生免疫力的时间比其他方法要快，尤其是对呼吸道有亲嗜性的疫苗。

对于饮水免疫法，是大群鸡常用的免疫方法，如果应用得法，有诸多优点，如不用逐个抓鸡免疫，节省大量人力和时间；不干扰鸡群正常生理活动就可进行免疫等等。

二者在有着各自不可替代之优点的同时，又有着难以避免的弊端。

在不同的实践情况中，及时的选择最佳免疫方式，是保证免疫效果，预防疾病，保证产量的先决条件。

所以对二者进行比较分析有着一定的研究意义。

对于这两种主要免疫方法，活苗喷雾免疫与饮水免疫对鸡群抗体的影响都有着不可忽视的地位。

二者在有着各自不可替代之优点的同时，又有着难以避免的弊端。

在不同的实践情况中，及时的选择最佳免疫方式，是保证免疫效果，预防疾病，保证产量的先决条件。

所以需要在同一个鸡场采用不同的免疫方法，观察和检测免疫效果，得出最佳的免疫方法。

2 免疫程序准备工作2.1 鸡群选择根据嘉兴海宁市当地农户的实际情况，本次实验将选用雪山草鸡（母鸡）作为免疫鸡群。

雪山鸡是国内唯一的慢速型青脚麻羽配套系，其外观亮丽，青脚细腿，鸡冠大而红且直立。

雪山鸡饲养周期长，采用半放牧半圈养生态高效养殖模式。

雪山草鸡（母鸡）外貌：鸡冠大而红且直立，颈羽呈黄色，其余部分呈麻羽，尾羽呈黑色，青脚，体型清秀。

将两个鸡舍的鸡作为研究对象，分别命名为A鸡群和B鸡群，两个鸡群各100只母鸡。

A鸡群将进行饮水免疫，B鸡群则进行活苗喷雾免疫。

2.2 疫苗选择2.2.1 鸡新城疫概述鸡新城疫（ND）是一种具有高度传染性的病毒性疾病。

各种品种、年龄、性别的鸡都易感，发病率和死亡率在90%以上，是严重危害养鸡生产的最主要疾病之一。

近年来，西方发达国家采取以扑杀强毒感染群为主的方法，已经基本控制疾病。

在我国，由于经济发展水平的限制以及强毒感染的普遍存在，主要通过应用疫苗进行免疫接种来控制ND的发生。

由于ND疫苗种类繁多，疫苗使用方法不一，往往会因疫苗的选择和使用不当造成免疫失败，给养鸡生产带来极大的经济损失。

因此，选择正确的疫苗和免疫方法是极其重要的。

2.2.2 疫苗的种类1）中等毒力的疫苗包括：H株、Roakin株、Mukteswar株和Komorov株等，我国主要使用Mukteswar 株（即Ⅰ系）。

2）弱毒疫苗包括Ⅱ系（B1株）、Ⅲ系（F株）、IV系（Lasota株）、V4和克隆株等3）灭活疫苗来源于感染性尿囊液，用β-丙内脂或福尔马林杀灭病毒后再用氢氧化铝胶吸咐，或制成灭活油佐剂疫苗，目前以油乳剂灭活苗应用较多。

根据鸡场实际条件，本次实验将使用禽流感-新城疫重组二联活疫苗进行饮水免疫及活苗喷雾免疫。

3 鸡群饮水免疫3.1 饮水免疫概述及注意事项常用免疫接种方法有：滴鼻与点眼免疫、皮下及肌肉注射免疫、饮水免疫、活苗喷雾免疫。

对于本次研究课题，现仅对鸡群进行饮水免疫和活苗喷雾免疫。

饮水免疫适用于大批鸡群的免疫，具有简便易行不惊扰鸡群的效果。

将疫苗混于水中，鸡群通过饮水而获得免疫。

免疫前鸡群应停水，根据季节不同停水时间不同，夏季停水2小时左右，冬季停水4小时左右，使鸡产生渴感。

饮水免疫最好用深井水或不含漂白粉的水。

疫苗稀释好后应迅速喂饮，最好在1小时内饮完。

由于鸡的饮水量有多有少，所以疫苗的用量应加倍，饮水免疫用水量参考：4天至2周龄每只鸡8－10毫升；2－4周龄12－15毫升；4-8周龄20毫升；8周龄以上40毫升。

3.2 饮水免疫具体要求首先要保证足够的饮水器，并把饮水器清洗干净，无抗菌、消毒药物残留。

饮水免疫前停水2~4小时，疫苗水中不含金属离子和氯离子，可使用凉开水或蒸馏水，最好使用去离子水，并在其中加入2~3%鲜牛奶或0.2~0.3%脱脂奶粉，以稳定病毒活性。

然后按要求加入疫苗，混匀后给鸡饮服。

特别注意疫苗的用水量，一般为鸡日饮水量的30%。

疫苗用量高于平均用量的2~3倍，保证所有的鸡同时喝到疫苗水，并在0.5~1小时内饮完。

如饮水量少，只能让一部分鸡饮上疫苗，造成免疫不均匀，饮水量太多，很长时间饮不完，造成疫苗效价降低。

对A鸡群进行饮水免疫，具体程序如下：把疫苗稀释进水中，让鸡群正常饮水即可。

稀释疫苗可用深井水或凉开水，饮水中不能含有氯、锌、铜、铁等对疫苗有影响的离子。

此外饮水器要洁净，没有残留消毒剂和洗涤剂等。

疫苗用量一般应高于其它方法免疫用量的2~3倍。

4 鸡群活苗喷雾免疫4.1 喷雾免疫概述及注意事项活苗喷雾免疫指的是，稀释好的疫苗用喷枪喷成雾化粒子，均匀地悬浮于空气中，在鸡自然呼吸时，将疫苗吸入体内而达到免疫。

活苗喷雾免疫一般选择能关闭门窗的鸡舍进行，黎明、傍晚、阴天多云时是气雾免疫的良好时机。

雏鸡气雾免疫易发生应激反应，最好在1月龄以上鸡群中进行。

活苗喷雾免疫主要在大群免疫时应用，但不适宜于30日龄内的雏鸡和存在慢性呼吸道病的鸡群，以免诱发呼吸道系统疾患。

气雾免疫时，将疫苗按规定稀释好，用喷雾器或空压机将疫苗液喷成气雾粒子。

一般对6周龄以内的雏鸡气雾免疫，气雾粒子为50μm，而对12周龄雏鸡气雾免疫时，气雾粒子取10~30μm为宜。

在鸡头上为约1.5米左右喷雾，喷完后要最大限度地降低通风换气量，以保证气雾免疫效果，同时也要防止通风不良而造成窒息死亡，一般喷雾后密闭鸡舍10~20分即可。

4.2 喷雾免疫具体要求对B鸡群进行活苗喷雾免疫，具体程序如下：喷雾免疫时应将鸡群赶到鸡舍的一侧，由鸡舍的一端开始，喷枪距鸡群1ｍ远，水平喷向鸡群或向下倾斜呈45°，不要直接喷向鸡的体表，匀速缓慢行进，往返喷雾2～3遍，使鸡舍内形成良好的局部雾化区。

喷雾免疫保证雾化粒子的大小适中是关键：雏鸡免疫时雾滴直径通常为50～200μｍ，以使雾滴进入眼睛和鼻孔等上呼吸道而获得免疫。

喷雾操作人员的行进速度尤为关键，喷雾免疫的行进速度决定着疫苗分布的均匀程度和鸡只获得疫苗的剂量，是确保免疫效果的关键环节，必须提前确定。

在喷雾结束20min后才能开启所有门窗和通风换气设备，因为喷出的雾粒大约需要20min才会降落至地面，并且在此时鸡群才能获得足够的免疫剂量。

5 免疫效果的测定5.1 随即抽样分别对A、B两个鸡群进行随机抽样，各随机抽取10只健康母鸡，作为试验样本。

5.2 鸡群抗体的测定5.2.1 诊断试剂96孔酶标板5个，标准阴性﹑阳性血清各1.9 ml，样品吸释液235ml，酶标抗体50ml，TMB底物液60ml，终止液60ml。

5.2.2 被检血清的采集和处理收集来自A、B两个鸡群的20份血清，均从消毒过的翅静脉采集，每份3-4ml，自然凝固后分离血清。