《分子生物学》（1）答案一、名词解释(每小题2分,共20分)1, 基因:能够表达和产生蛋白质和RNA的DNA序列,是决定遗传性状的功能单位.2, 操纵子:是指数个功能上相关的结构基因串联在一起,构成信息区,连同其上游的调控区(包括启动子和操纵基因)以及下游的转录终止信号所构成的基因表达单位,所转录的RNA为多顺反子.3, 顺式作用元件:是指那些与结构基因表达调控相关,能够被基因调控蛋白特异性识别和结合的特异DNA序列.包括启动子,上游启动子元件,增强子,加尾信号和一些反应元件等.4, 启动子:是RNA聚合酶特异性识别和结合的DNA序列.5. SD序列:转录出的mRNA要进入核糖体上进行翻译,需要一段富含嘌呤的核苷酸序列与大肠杆菌16S rRNA3,末端富含嘧啶的序列互补,是核糖体的识别位点.6. PCR:模拟体内DNA复制原理,在体外用一对外侧引物扩增含目的基因的特定片段7, DNA芯片:DNA芯片技术是指在固相支持物上原位合成寡核苷酸或者直接将大量的DNA 探针以显微打印的方式有序地固化于支持物表面,然后与标记的样品杂交,通过对杂交信号的检测分析,即可获得样品的遗传信息.由于常用计算机硅芯片作为固相支持物,所以称为DNA芯片.8. 癌基因:是细胞内控制细胞生长的基因,具有潜在的诱导细胞恶性转化的特性.当癌基因结构或表达发生异常时,其产物可使细胞无限制增殖,导致肿瘤的发生.包括病毒癌基因和细胞癌基因.对人体的状态和疾病作出诊断的方法和过程.9. 反义RNA和反义核酸技术:碱基序列正好与有意义的mRNA互补的RNA称为反义RNA.可以作为一种调控特定基因表达的手段; 反义核酸技术是通过合成一种短链且与DNA或RNA互补的,以DNA或RNA为目标抑制翻译的反义分子,干扰目的基因的转录,剪接,转运,翻译等过程的技术.10. 核酶:是一种可以催化RNA切割和RNA剪接反应的由RNA组成的酶,可以作为基因表达和病毒复制的抑制剂.二、填空题(每空1分,共15分)1．真核生物启动子中的元件通常可以分为两种：（核心启动子元件）和（上游启动子元件）。
2.半乳糖对细菌有双重作用；一方面（可以作为碳源供细胞生长）；另一方面（它又是细胞壁的成分）。
所以需要一个不依赖于(cAMP-CAP)的启动子S2进行本底水平的永久型合成；同时需要一个依赖于它的启动子S1对高水平合成进行调节。
3．DNA重组技术也称为（基因克隆）。
最终目的是（把一个生物体中的遗传信息DNA 转入另一个生物体）。
典型的DNA重组实验通常包含以下几个步骤：①提取供体生物的目的基因，酶接连接到另一DNA分子上（克隆载体），形一个新的重组DNA分子。
②将这个重组DNA分子转入受体细胞并在受体细胞中复制保存，这个过程称为转化。
③对那些吸收了重组DNA的受体细胞进行（筛选和鉴定）。
④对含有重组DNA的细胞进行大量培养，检测外援基因是否表达。
4. 大肠杆菌乳糖操纵子含Z,Y,A三个结构基因,分别编码(半乳糖苷酶),(透过酶)和半乳糖苷乙酰转移酶,没有乳糖存在时,I基因编码的(阻遏蛋白)结合于操纵序列O处,乳糖操纵子处于阻遏状态,不能合成分解乳糖的三种酶;有乳糖存在时,乳糖作为诱导物诱导阻遏蛋白变构,不能结合于操纵序列,乳糖操纵子被诱导开放合成分解乳糖的三种酶.所以,乳糖操纵子的这种调控机制为(可诱导的负调控);另外,在启动子上游有CAP结合位点,当大肠杆菌从以葡萄糖为碳源的环境转变为以乳糖为碳源的环境时,cAMP浓度(升高),与CAP结合,使CAP发生变构,CAP结合于乳糖操纵子启动序列附近的CAP结合位点,激活(RNA聚合)酶活性,促进结构基因转录.5、DNA引发酶分子与DNA解旋酶直接结合形成一个（引发体）单位，它可在复制叉上沿后随链下移，随着后随链的延伸合成RNA引物。
6、复制叉上DNA双螺旋的解旋作用由（DNA解旋酶），催化的，它利用来源于A TP水解产生的能量沿DNA链单向移动。
7、如果DNA聚合酶出现错误，会产生一对错配碱基，这种错误可以被一个通过甲基化作用来区别新链和旧链的特别（错配校正）系统进行校正。
8、多数类型的RNA是由加工前体分子产生的，真核生物前体tRNA的加工包括（）的切除和（）的拼接。
随着端部序列的切除，3’端加上了序列（）。
内含子；外显子；CCA三、不定项选择题( 每题2分, 共30分1、在真核生物细胞中，翻译的哪一个阶段需要GTP? ( )(a)加RNA的5’末端区的二级结构解旋(b)起始tRNA同核糖体的结合(c)在延伸的过程中，tRNA同核糖体的结合(d)核糖体的解体(e)5’帽子结构的识别2、下列关于原核生物转录的叙述中哪一项（那一些)是正确的？( )(a)核糖体的小亚基能直接同mRNA作用(b)IF-2与含GDP的复合物中的起始tRNA结合(c)细菌蛋白质的合成不需要ATP (d)细菌所有蛋白质的第一个氨基酸是修饰过的甲硫氨酸(e)多肽链的第一个肽键的合成不需要EF-G3、下面关于真核生物翻译的叙述中，哪一个（一些)是正确的？( )(a)起始因子eIF只有同GTP形成复合物才起作用(b)终止密码子与细菌的不同(c)白喉毒素使EF-1 ADP核糖酰化(d)真核生物蛋白质的第一个氨基酸是修饰过的甲硫氨酸，在蛋白质合成完成之后，它马上被切除，(e)真核生物的核糖体含有两个tRNA分子的结合位点4、下列叙述不正确的是：( )(a)共有20个不同的密码于代表遗传密码（b)色氨酸和甲硫氨酸都只有一个密码子（c）每个核苷酸三联体编码一个氨基酸(d)不同的密码子可能编码同一个氨基酸(e)密码子的第三位具有可变性5、核糖体的E位点是：( )(a)真核mRNA加工位点(b)tRNA离开原核生物核糖体的位点(c)核糖体中受EcoRI限制的位点(d)电化学电势驱动转运的位点6、下列关于核糖体肽酰转移酶活性的叙述正确的是：( )(a)肽酰转移酶的活性存在于核糖体大亚基中；（50s或60S) (b)它帮助将肽链的C末端从肽酰tRNA转到A位点上氨酰tRNA的，N末端(c)通过氨酰tRNA的脱乙酰作用，。
帮助氨酰照旧A的N末端从A位点移至P位点中肽酰tRNA的C末端(d)它水解GTP以促进核糖体的转位(e)它将肽酰tRNA去酰基7、哪些有关剪接位点的叙述是正确的? ( )（a）剪接位点含有长的保守序列(b)5’与3’剪接位点是互补的(c)几乎所有的剪接位点都遵从GT—AG规律(d)剪接位点被保留在成熟的mRNA中(e)内含子3’与5’剪接位点间的距离可以很大(f)一个内含子的5’剪接位点只能与同一个内含子的3’剪接位点作用，杂合内含子不能被剪接8、分支位点核苷酸( )（a）总是A （b）的位置在内含子内是随机的(c)位于一个非严格保守的序列内(d)通过与3’剪接位点作用起始剪接的第一步(e)在剪接的结于步完成后与内含子中另外三个核苷酸共价连接9、转酯反应：( )(a)不需要ATP (b)拆开一个化学键后又形成另一个化学键(c)涉及对糖磷骨架0H基团的亲核攻击(d)以上都正确10、选出所有有关snRNA的正确叙述：( )（a）snRNA只位于细胞核中(b)大多数snRNA是高丰度的(c) snRNA在进化的过程中是高度保守的（d）某些snRNA可以与内含子中的保守序列进行碱基配对(e)以上都正确11、细胞器DNA能够编码下列哪几种基因产物? ( )(a) mRNA (b) 大亚基rRNA (C)小亚基rRNA (d)tRNA （e）4.5SrRNA （f）5SrRNA12、Ⅱ型剪接与前体mRNA剪接的相似之处是( )(a)两种内含子具有相似的剪接位点：(b)它们都通过向样的机制进行剪接，其中涉及套索中间体(c)都由肋A催化进行(d)都需要Ul snRNP (e)都可以在没有蛋白的情况下进行(f)两种内含子都形成精细的二级结构13、tRNA中的内含子( )（a）通过两步转酯反应被切除(b)具有与反密码子互补的序列(c)都形成相似的二级结构(d)由蛋白酶(核酸内切酶和连接酶)切除(e)在5f和3P剪接位点的序列是保守的14、在前体mRNA上加多聚腺苷酸尾巴( )（a）涉及两步转酯机制(b)需要保守的AAUAAA序列(c)在AAUAAA序列被转录后马上开始(d)通过一个多组分复合物的逐步组装进行(e)由依赖于模板的RNA聚合酶催化15、可变剪接能增加转录产物，这些转录产物问的区别在于( )（a）mRNA的5’非转录区(b)mRNA的编码区(c)mRNA的3’非转录区(d)上述全是(e)上述全不是1、( b，c)2、(a，d，e )3、(a，e )4、(a )5、(b )6、(a，b，e )7、( c,e)8、(a,c,e )9、(d ) 10、(e)11、( a，b，C，d，e，f ) 12、(a，b，c) 13、(b，c，d )14、(b，d ) 15、(d )四、判断正误( 每题1分,共10 分1.高等真核生物的大部分DNA是不编码蛋白质的.2.假基因通常与它们相似的基因位于相同的染色体上。
3.在有丝分裂中，端粒对于染色体的正确分离是必要的。
4.在核酸双螺旋(如DNA)中形成发夹环结构的频率比单链分子低。
发夹结构的产生需要回文序列使双链形成对称的发夹，呈十字结构。
5.大多数看家基因编码低丰度的mRNA。
6.所有真核生物的基因都是通过对转录起始的控制进行调控的。
7.只有活性染色质转录的基因对DNaseI敏感。
8.如果DNA沿3’→5’合成，那它则需以5’三磷酸或3’脱氧核苷三磷酸为末端的链作为前体。
9.大肠杆菌DNA聚合酶缺失3’→5’校正外切核酶活性时会降低DNA的合成速率但不影响它的可靠性。
10.真核细胞中的RNA聚合酶仅在细胞核中有活性。
√××√√××√××五、简答题(从下列5道题中选作4道，先将不选的题目划掉，每题5分,共20分)1、简述原核基因组的特点:①为一条环状双链DNA;②只有一个复制起点;③具有操纵子结构;④绝大部分为单拷贝;⑤可表达基因约50%,大于真核生物小于病毒;⑥基因一般是连续的,无内含子;⑦重复序列很少.2、简述SANGER双脱氧链终止法的原理答:DNA链中核苷酸以3',5'-磷酸二酯键连接,合成DNA所用的底物是2'-脱氧核苷三磷酸. 2',3'ddNTP与普通dNTP不同,它们在脱氧核糖的3'位置缺少一个羟基.在DNA聚合酶作用下通过三磷酸基团掺入到延伸的DNA链中,但由于没有3'羟基,不能同后续的dNTP形成磷酸二酯键,因此,正在延伸的DNA链不能继续延伸.在DNA合成反应混合物的4种普通dNTP中加入少量的一种ddNTP,链延伸将与偶然发生但却十分特异的链终止竞争,产物是一系列的核苷酸链,其长度取决于引物末端到出现过早链终止位置间的距离.在4组独立酶反应中分别采用4种不同的ddNTP,结果将产生4组寡核苷酸,它们将分别终止于模板链的A,C,G或T位置.3、核酸分子杂交的原理答:具有互补序列的两条单链核酸分子在一定的条件下(适宜的温度及离子强度等)碱基互补配对结合,重新形成双链;在这一过程中,核酸分子经历了变性和复性的变化,以及在复性过程中个分子间键的形成和断裂.杂交的双方是待测核酸和已知序列.4、PCR的基本原理和过程答PCR是在试管中进行的DNA复制反应,基本原理是依据细胞内DNA半保留复制的机理,以及体外DNA分子于不同温度下双链和单链可以互相转变的性质,人为地控制体外合成系统的温度,以促使双链DNA变成单链,单链DNA与人工合成的引物退火,然后耐热DNA 聚合酶以dNTP为原料使引物沿着单链模板延伸为双链DNA.PCR全过程每一步的转换是通过温度的改变来控制的.需要重复进行DNA模板解链,引物与模板DNA结合,DNA聚合酶催化新生DNA的合成,即高温变性,低温退火,中温延伸3个步骤构成PCR反应的一个循环,此循环的反复进行,就可使目的DNA得以迅速扩增.DNA模板变性:模板双链DNA 单链DNA,94℃.退火:引物+单链DNA 杂交链,引物的Tm值.引物的延伸:温度至70 ℃左右, Taq DNA聚合酶以4种dNTP为原料,以目的DNA为模板,催化以引物3'末端为起点的5'→3'DNA链延伸反应,形成新生DNA链.新合成的引物延伸链经过变性后又可作为下一轮循环反应的模板PCR,就是如此反复循环,使目的DNA得到高效快速扩增.5、哪三个序列对原核生物mRNA的精确转录是必不可少的?答：-35(RNA聚合酶结合位点)、-10(RNA荣合酶起始位点)启动子序列和终止子；。