1 目的
指导血清Anti-TPO含量的定量测定。

2 适用仪器
Roche Modular EE-170全自动免疫分析系统。

3 SOP使用和变动
该作业指导书适用于本专业人员，使用前应认真阅读该SOP，在专业组组长指导下执行。

因仪器设备和测定方法或试剂性能改变，应及时修订该SOP文件，可由任一使用该SOP的工作人员提出改动，并报专业组组长审核，经技术负责人批准，签字生效。

4 方法原理
电化学发光免疫分析：采用竞争法原理，样本和钌复合物标记的Anti-TPO一起孵育。

再添加生物素化的TPO和包被链霉亲和素的磁珠微粒，样本中的Anti-TPO与钌标记的Anti-TPO 竞争结合生物素化的TPO抗原。

抗原抗体复合物通过生物素、链霉亲和素之间的反应结合到微粒上。

将反应液吸入测量池中，通过电磁作用将磁珠微粒吸附在电极表面。

未与磁珠微粒结合的物质通过清洗液被去除。

给电极加以一定的电压，使复合体化学发光，并通过光电倍增器测量发光强度。

仪器通过2点定标校正试剂条形码包含的厂商定标曲线，自动计算得到检测结果。

5 标本采集、接收与处理
5.1标本采集
5.1.1标本类型：血清
5.1.2通常用真空采血管（含分离胶黄头管）采集静脉血，采集后贴上病人唯一性的条形码。

5.2标本接收:
5.2.1标本接收操作：可参照样品处理、清退和分离，详见样品处理SOP。

5.2.2标本拒收条件：严重溶血标本、加热灭活样本和使用叠氮化物作为稳定剂的样本
5.2.3标本保存和稳定性：血标本在2小时内离心分离，3000rpm×5min。

血清2~8℃下稳定3天，-20℃下稳定1个月。

仅可冻融1次，并确保测定前将患者样本存储于室温（20~25℃）中。

检测前离心去除样本中的沉淀。

5.2.4标本编号：将标本在标本接收程序中扫描编号，机器会自动打印样本编号，将号码贴到标本上，如遇到自动编号系统瘫痪，那么Anti-TPO编号从0301开始。

5.3标本生物危害性：所有标本按具有
潜在传染性的材料处理。

6 试剂
6.1试剂组分：
试剂货号：06368590190
注：有害物质，请勿吞咽。

如果皮肤与之接触，应立即用大量肥皂和清水冲洗。

包括：M、R1和R2。

6.2试剂存储和有效期
7操作程序
试剂装载、校准、样品和质控血清分析操作详见Roche Modular EE-170全自动免疫分析系统SOP文件。

8校准及校准验证
8.1校准品：
校准验证品：
8.2校准频率
8.2.1每批试剂必须用新鲜试剂（试剂经仪器注册24小时以内）定标一次。

8.2.2在下列情况下，Roche Modular EE-170 Anti-TPO测定项目需要进行两点校准:
8.2.2.1 使用同一试剂批号一个月（28天）后；
8.2.2.2在分析仪上使用同一试剂盒7天后；
8.2.2.3 当系统部件更换后；
8.2.2.4 当仪器进行了较大的维护和保养；
8.2.2.5 当质控结果经重复测定后仍然超出范围
8.3操作步骤：
8.3.1校准
8.3.1.1校准品预处理：将校准品用经过检定的移液管加蒸馏水5mL, 放置室温30min复融，混匀。

8.3.1.2 校准程序参见《Roche Modular EE-170作业指导书》
（Z2JYK-MY-YQSOP-001？？？）
8.3.2校准验证
8.3.2.1校准验证品预处理：将校准验证品放置室温30min复融，混匀。

8.3.2.2选择校准验证项目：在仪器程序中选择校准验证项目。

8.3.2.3校准验证品上机操作：使用具备唯一性的条码标记不同的校准验证品，将校准验证品放在样品架上与病人样本一样进行检测。

8.3.2.4校准验证结果确认：校准验证不符合实验室建立的质量标准需重新校准。

并填写《校准及校准验证记录表》包括重新校准的记录）。

具体标准详见《免疫检验室定量项目校准和校准验证标准作业指导书》
9 质控
9.1质控品：分装好的罗氏质控品存放于JYK-MY2201冰箱下层质控品层
69.2质控频率：每天常规标本测试前做质控
9.3质控程序：取用分装好的质控品，常温复溶后，混匀，打印质控项目条码，输入电脑程序
固定标本位，具体上机操作《免疫检验室室内质量控制作业指导书》
9.4质控判断：遵守Westgard多规则质控方法，参照《免疫检验室室内质量控制作业指导书》，如失控，进行失控分析处理，填写《失控处理表》文件号。

10测定基本参数
11 结果审核
11.1．复检要求：与临床不符的结果或室内失控时应复检。

11.2．可报告值范围：5-600IU/mL, 超出该范围，以<5IU/mL和>600IU/mL报告。

12危急值
此项目没有危急值
13 参考范围
血清 <34.00 IU/mL
14 方法特性
14.1分析范围：5-600IU/mL。

14.2批内变异系数小于7%，批间系数均小于10%。

14.3分析特异性：未检测到Anti-Tg（<394IU/mL）影响结果。

14.4干扰因素：接受高剂量生物素（>5mg/天）治疗的患者，必须在末次生物素治疗8小时后采集样本。

极少数病例由于存在高浓度的抗分析物特异性抗体、抗链霉素或钌的抗体会影响检测结果。

15主要临床意义
可用于自身免疫性甲状腺疾病的辅助诊断，Anti-TPO滴度升高可见于90%的慢性桥本甲状腺炎以及70%的突眼性甲状腺肿患者。

本试验与其他抗甲状腺抗体测定方法，如Anti-Tg、Anti-TSHR抗体同时测定可提高敏感性，但阴性不能排除自身免疫病的可能性。

高滴度抗体与疾病的程度无关系。

随着病程的延长或是缓解期，抗体滴度可转阴。

如在疾病的缓解期再度出现抗体，即有恶化的可能。