免疫球蛋白测定及应用
免疫胶乳比浊法 操作简便,快速、可自动化、敏 感度0.1mg/L,但胶乳试剂制备 较难,目前试剂盒品种较少、未 广泛应用 用于血清IgG、A、M、D定量
酶联免疫吸附法 方法简便,商品化试剂盒、敏感 度0.1mg/L,重复性好、变异系 数小,定量每次带标准检测,可 定量血浆Ig以外如体液中Ig 可用于尿、脑脊液、胸腹水Ig定 量及血清IgE定量
火箭电泳 敏感度较高,0.3mg/L,操作简 便省时,结果重复性好 可进行血清IgG、A、M定量
免疫比浊法 简便、快速,可自动化,敏感度 高,0.1mg/L,准确性好,批内 变异系数2%~4% 可进行血清IgG、A、M、D定量
放射免疫测定 主要用于微量分析,敏感度 10µg/L,试剂保存期短,放射性 核素污染 用于血清IgE定量
4.血清总IgE
寄生虫感染时IgE升高,特异性 哮喘,过敏性鼻炎等患者血清中 IgE含量升高与发病及缓解呈平 行关系。IgE骨髓瘤。SLE,类 风湿关节炎患者IgE含量升高。
(二)尿微量Ig定量临床意义 1、肾功能状态鉴定 2、SLE患者肾损伤程度判断 3、糖尿病患者肾损伤程度判断
(三)脑脊液微量Ig定量的临床 意义 CSF中IgG增高见于: ①中枢神经系统内源性合成增加 ②血中IgG增高 ③血脑屏障通透性增高。
三 、免疫球蛋白定量临床意义
(一)血清Ig定量临床意义 1.低Ig血症 (1)先天性低Ig血症 (2)获得性低Ig血症
2.高Ig血症
(1)非特异型多克隆免疫球蛋 白增高症 (2)特异型单克隆免疫球蛋白 增殖症
3.IgD 在疾病中的意义尚不明确。妊娠 末期及吸烟者IgD含量升高。IgD 型骨髓瘤患者血清中IgD水平比 正常人高10000倍,是惟一明确 可作为确诊的证据。
四、M蛋白的检测
M蛋白是B淋巴细胞或浆细胞单克 隆异常增殖所产生的一种在氨基酸 组成及顺序上十分均一的异常单克 隆免疫球蛋白(monoclonal Ig), 多见于多发性骨髓瘤,巨球蛋白血 症和恶性淋巴瘤。
(一)血清蛋白区带电泳 M区带的出现 区带的出现 (二)免疫球蛋白定量 某一类免疫球蛋白的显著增高 (三)轻链片段定量测定 单向免疫扩散法或ELISA 单向免疫扩散法或 (四)免疫电泳或免疫固定电泳 (五)本周蛋白测定
二、 免疫球蛋白定量方法学评价 及应用
依据存在于血清和其他体液内的各类 Ig含量不同,采用不同的方法进行测 定。
单相琼脂扩散实验 敏感度不高,30mg/L,检测时 间长,批内变异系数大,准确性 受诸多因素影响,抗血清用量大, 有商品化的检测板供应,操作简 便,不需特殊设备 可进行血清IgG、A、M定量
免疫球蛋白测定及应用
谷俊莹
一、免疫球蛋白定量检测方法
(一)单向琼脂扩散法 1.原理 2.操作方法 3.影响因素 抗血清,温度,标准曲 线,异常沉淀线
(二)免疫比浊法 透射比浊法 散射比浊法 1.原理 2.操作方法 3.影响因素 抗血清,缓冲液, 待测血清
(三)ELISA法 (四)放射Biblioteka 疫法 (五)免疫电泳及免疫固定电泳