《植物生理生化实验》复习习题一、名词解释：用标准溶液制成的曲线。

先配制一系列不同浓度的标准溶液，在溶液最大吸收波长下，逐一测定吸光度，然后用坐标纸以溶液浓度为横坐标，吸光度为纵坐标作图，若被测物质对光的吸收符合光的吸收定律，必然得到一条通过原点的直线，即标准曲线。

:又称lowry法，它结合了双缩脲试剂和酚试剂与蛋白质的反应，是双缩脲方法的进一步发展，可利用其在650nm波长下的特定吸收进行比色测定。

游离氨基酸与茚三酮共热时，能定量生成紫色的二酮茚-二酮茚胺。

其吸收峰在570nm，而且在一不定期范围内吸光度与游离氨基酸浓度成正比，因此可用分光光度法测定其含量。

茚三酮溶液与氨基酸共热，生成氨。

氨、茚三酮与还原性茚三酮发生反应，生成紫色化合物。

该化合物颜色的深浅与氨基酸的含量成正比，通过测定570nm 处的光密度，可测定氨基酸的含量。

氮素及含氮的活体物质的同化、异化、排泄，总称为氮素代谢。

：水解淀粉和糖原的酶类总称指将叶片打孔放入注射器中，加水浸没，排出空气后用手指堵住前端小孔，同时把活塞向外抽拉，即可造成减压而排出组织中的空气，轻放活塞，水液即进入组织的方法。

根据物质颗粒在一个实用的离心场中的行为而发展起来的是1.分离细胞器和生物大分子物质的必备的手段之一，也是2.测定某些纯品物质的部分性质的一种方法。

差速离心法基于待测物质颗粒大小、密度、沉降速度的不同而得到分离。

各种生物大分子在一定pH条件下，可以解离成带电荷的颗粒,这种带电颗粒在电场作用下，向着与其电性相反的电极移动利用带电粒子在电场中移动速度不同而达到分离的技术称为电泳技术。

指催化同一种化学反应，但其酶本身分子结构和带电性质却有所不同的一组酶。

指带电颗粒在单位电场强度下的泳动速度。

溶液中带电粒子在电场中向着与它电性相反的电极移动，它的移动速度是电场和粒子的有效迁移率(m)的乘积，即：V=mE。

以丙烯酰胺为单位，由甲叉双丙烯酰胺交联成的，经干燥粉碎或加工成形制成粒状，控制交联剂的用量可制成各种型号的凝胶：又称酶活性，指酶催化一定化学反应的能力。

（酶活力单位/mg蛋白质）比活力的大小可以用来比较酶制剂中单位质量蛋白质的催化能力，衡量酶的纯度指种子潜在的发芽能力或种胚具有的生命力。

植物对逆境的抵抗和忍耐能力，简称为抗性。

单位时间、单位叶面积吸收CO2或放出O2的量。

单位时间鲜重或干重的植物组织或原生质释放的CO2或吸收O2的量土壤而用加有养分溶液的物料作为植物生长介质的栽培方法。

清除超氧阴离子自由基的酶。

,催化植物体内硝酸盐还原成亚硝酸盐的反应。

：又称适应酶，指植物体内本来不含有，但在特定外来物质的诱导下诱导生成的酶。

E.g.硝酸还原酶可为NO3-诱导生成。

二、填空：在测定植物可溶性蛋白质含量时，绘制标准曲线是以标准蛋白质浓度为横坐标，以吸光值为纵坐标。

常用的测定植物可溶性蛋白质含量的方法有：Folin-酚试剂法(Lowry 法) 、考马斯亮蓝法和紫外吸收法用滴定法测Vc含量时，若样品本身带有颜色，则需先将样品用__草酸__ 处理。

用茚三酮显色法测定植物组织氨基酸含量时，茚三酮溶液与氨基酸共热生成氨，氨__与茚三酮和还原性茚三酮反应，生成蓝紫色的二酮茚胺。

该化合物颜色的深浅与氨基酸的含量成正比，可通过测定570 nm处的光密度，求出氨基酸的含量。

在测定淀粉酶的活性时：α－淀粉酶不耐酸，β－淀粉酶不耐热。

在测定淀粉酶活性时，3，5－二硝基水杨酸试剂（DNS）的作用是1、与还原糖显色生成棕红色的3-氨基-5-硝基水杨酸 2、终止酶活性。

聚丙烯酰胺凝胶电泳分离过氧化物同工酶实验中，电泳存在三大效应，分别是浓缩效应、分子筛效应和电荷效应。

测定硝酸还原酶活性的方法有活体法和离体法。

用活体法测定硝酸还原酶的材料，取样前叶子需进行一段时间的光合作用，以积累光合产物，产生更多NADH ，加速硝酸盐的还原。

叶绿素吸收光谱有红光和蓝紫光区两个最强吸收区。

类胡萝卜素吸收光谱最强吸收区在蓝紫光，它不仅可以吸收传递光能，还具有保护叶绿素的作用。

叶绿素溶液在透射光下呈绿色，在反射光下呈暗红色。

缺N 和缺Fe 都能引起缺绿病，二者区别在于缺氮老叶病。

缺乏必需元素Mg、N 、Ka等，均可引起植物产生缺绿病。

缺钙(Ca)症首先会表现于植物的嫰叶上。

植物光合速率测定方法有红外线CO2气体分析法和改良半叶法等。

植物呼吸速率常用的测定方法有_红外线法CO2气体分析法和改良半叶法在研究植物矿质元素中,常用的植物溶液培养法有水溶液培养法、砂基培养法和气栽法。

常用水溶液培养法确定植物生长的必需元素。

水培时要选用黑色容器装营养液，这是为了防止藻类滋生。

在植物生理研究中常用的完整植物培养方法有 _______、 ______ 、______和________。

三、选择题：1、某蛋白质pI为7.5，在pH6.0 的缓冲液中进行自由界面电泳，其泳动方向为（ A ）A、向负极移动B、向正极移动C、不运动D、同时向正极和负极移动在7.5的时候，这个蛋白质为电中性，不带电而6.0的时候更酸，结合上的氢就多，于是呈正电性于是就向负极去了2、进行酶活力测定时（A ）A、底物浓度必须极大于酶浓度B、酶浓度必须极大于底物浓度，C、酶能提高反应的平衡点D、与底物浓度无关3、蛋白质分子中含有共轭双键的酪氨酸、色氨酸等芳香族氨基酸。

它们具有吸收紫外光的性质，其吸收高峰在（ D ）波长处A、260nmB、650nmC、540nmD、280nm4、Folin-酚试剂法(Lowry法)测定蛋白质浓度时，用（ B ）波长比色，测定光密度值。

A、260nmB、650nmC、540nmD、280nm5、不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳比一般电泳的分辨率高，是因为具有下列哪种效应？（ ABC ）A、浓缩效应B、电荷效应C、分子筛效应D、粘度效应6. 硝酸还原酶与亚硝酸还原酶 ( D )A.都是诱导酶B.硝酸还原酶不是诱导酶，而亚硝酸还原酶是C.都不是诱导酶D.硝酸还原酶是诱导酶，而亚硝酸还原酶不是7、酶的分离提纯过程中，不正确的操作是（C ）。

A、需在低温下进行，一般在0～5℃之间B、酶制剂制成干粉后可保存于4℃冰箱中C、需经常使用巯基乙醇以防止酶蛋白二硫键发生还原D、提纯时间尽量短8、在提取叶绿素时，研磨叶片时加入少许CaCO3，其目的是（D ）A.使研磨更充分B.加速叶绿素溶解C.使叶绿素a、b分离D.保护叶绿素10、一般而言，正常植物叶片的叶绿素与类胡萝卜素的比值为（B ）A.2:1B.3:1C.1 :2D.1:311、叶绿素卟啉环的中心原子是（ C ）A. CuB. FeC. MgD. Mn12、测定叶绿素总量时，分光光度计选用的波长是（ D ）A.663nmB.645nmC.430nmD.652nm13、在95%提取液中,叶绿素a在红光区的最大吸收峰为 ( D )。

A、 470 nmB、649 nmC、 656 nmD、665 nm14、植物的幼嫩部分，亏缺下列哪种元素时，缺素症首先表现出来。

（B ）A. KB. CaC. PD. N15、下列元素中，属于必需的大量元素有（B ）A、铁B、氮C、硼D、锌16、高等植物的老叶由于缺少某一种元素而发病，下面元素属于这一类的有（ A ）A、氮B、钙C、铁17、呼吸作用的底物为( A )。

A、有机物和O2B、CO2和H2OC、有机物和CO217、光合作用的底物为( B )。

A、有机物和O2B、 CO2和H2OC、有机物和CO219、小蓝子法测定呼吸强度生成的白色沉淀是( A )A、 BaCO3B、Ba(COO)2C、Ba(D、CaCO3Ba(OH)2 + CO2 BaCO3 + H2O20、TTC法测定种子生活力的试验中，活种子的现象为 ( A )。

A、种胚全部染成红色B、种胚全部未染色C、种胚全部染成黑色D、种胚非关键部位染色，而胚根和胚芽的尖端都不染色21、小篮子法测定呼吸强度中，若在滴定时，外界CO2进入呼吸测定装置内，会使测得的结果( A )。

A、偏大B、偏小C、不变D、不一定三、简答题1、怎样提高样品测定的准确性?答：①正确采集代表性样品②选择合适的测定方法③减少测定误差④正确记录和处理测定数据。

2、植物材料的取样有哪些方法？答：①原始样品的取样法：随机取样、对角线取样。

②平均样品的采样法：混合取样法、按比例取样法。

3、简述分光光度计的使用方法。

答：①检查721A型分光光度计的旋钮和开关，使其回复零点。

②按要求接通电源，按下“T键”，打开暗盒盖和电源开关，指示灯亮。

预热20分钟。

③调节波长旋钮至所需波长。

选定波长④取比色皿分别盛装B、S、U液，置入检测室（比色皿先用蒸馏水洗后，再用比色液润洗才能装比色液）。

B液对准光路。

⑤调节面板“零位细调”，使指示为00.0，即透射比“T”的零点，同时“一”号闪跃。

⑥合下检测室盖.调节“光量粗、细调”电位器，使指示为100.0，须反复5、6两点操作达到稳定。

⑦按下“A”键，指示为“.000”同时“一”闪跃，如果指示读数不是比值时，应调节“消光调零“电位器，使其达到要求。

⑧拉出或推入拉杆，使U、S液分别置于光路读取A值，然后移动拉杆，读B管A值，如为0，则前述A值有效。

⑨在稳定时，重复读数一次，并按下“T”键。

⑩打开检测室盖，取出比色皿，倾去比色液于水槽中，用自来水冲洗干净，倒置于表面皿（铺有滤纸）中。

（11）关上电源开关，拔出电源插头，取出比色皿架，检查检测室内是否有液体溅出，并擦净。

检测室内放入硅胶袋，合上盖，套上仪器罩。

预热仪器→选定波→固定灵敏度档→调节“0”点→调节T=100%→测定→关机4. 请介绍3种常用的可溶性蛋白质的测定方法。

答：….5、简述斐林－酚试剂法测定植物可溶性蛋白质的原理。

（188页）在碱性条件下，蛋白质中的肽键与铜结合生成复合物，Folin—酚试剂中的磷钼酸盐—磷钨酸盐被蛋白质中的酪氨酸和色氨酸残基还原，产生深蓝色（钼兰和钨兰的混合物）。

在一定的条件下，蓝色深度与蛋白的量成正比。

6、植物组织可溶性蛋白质含量的测定中，斐林－酚试剂法、考马斯亮蓝法两种方法各有何优缺点？7、Folin-酚试剂法测定植物可溶性蛋白质时受哪些因素的干扰？答： Folin-酚试显色反应是由络氨酸、色氨酸和半胱氨酸引起的，因此样品中若含有酚类、柠檬酸和巯基类化合物均有干扰作用。

此外，不同蛋白质音络氨酸、色氨酸含量的不同而使显色强度稍有差异。

8、用茚三酮显色法测定植物组织氨基酸时，加入Vc的作用是什么？答：防止还原型茚三酮在含氧量高的情况下再氧化9、茚三酮显色法测定植物组织氨基酸时为什么要除去蛋白质？用10%乙酸除去蛋白质的原理是什么？28、比较溶液培养和砂基培养的优缺点。

优点：不收水土和季节限制，易于调控缺点：溶液培养：无法给根系提供支撑作用；溶液PH值会发生变化，抑制根吸收矿质元素；容易造成污染，影响实验。