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高中生物《单克隆抗体的制备》
目标
【堂堂清】
1.单克隆抗体的优点是 ________________________________ 特异性强、灵敏度高、可大量制备 杂交瘤细胞的优点是 ________________________________ 既能无限增殖(迅速大量繁殖)又能产生专一的抗体 2.单克隆抗体具有特异性强、灵敏度高的原因是
植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较
比较项目 植物体细胞杂交
细胞膜的流动性 细胞的全能性
动物细胞融合
细胞膜的流动性 使细胞分散后诱导 细胞融合
物理、化学方法 (同左) 灭活的病毒 主要用于制备 单克隆抗体
原理
细胞融合的步骤
去除细胞壁后诱导 原生质体融合
物理(离心、振荡、 电刺激) 化学(聚乙二醇) 获得杂种植株
为何要进行克隆化培养和专 一抗体检测,多次筛选
大量增殖杂交瘤细胞获得单 抗的方法
比较项目
第一次筛选
克隆化培养和多 次筛选
原理
在选择性培养基中添 抗原—抗体的特 加某种药物,特异性 异性结合,进行 杀死未融合细胞和融 抗体检测 合的同种核细胞
选出杂交瘤细胞 选出既能无限增 殖,又能产生特 异性抗体的杂交 瘤细胞
_________________________________ 每一种B淋巴细胞只能分泌一种特异性抗体
效应B细胞(浆细胞) 3.产生抗体的细胞是_______________
杂交瘤细胞 产生单克隆抗体的细胞是__________
诱导方法 用途1、抗体Fra bibliotek1.1 概念: 抗体是机体受抗原刺激 后产生的、并能与该抗原发 生特异性结合的具有免疫功 能的球蛋白 。 1.2 来源: 浆细胞(B淋巴细胞)
传统血清抗体的制备
特异性差、纯度低; 产量低、反应不够灵敏 抗原 刺激 动物体 浆细胞 抗体 抗体不纯
抗原不纯
每个浆细胞(B淋巴细胞)只能分泌一种抗体,由一 个B淋巴细胞增殖产生的细胞群分泌的抗体化学成份是单 一的。
如何获得化学性质单一、特异性强的抗体?
体外培养单个B淋巴细胞,提取分泌的抗体 体外培养淋巴细胞能无限增殖吗? 怎样解决这个问题?
二、单克隆抗体
设计方案: 一个B淋巴细胞--只分泌一种特异性抗体
小鼠骨髓瘤细胞--能无限增殖
杂种细胞
注射抗原的目的是什么
诱导其融合的方法有哪些?
融合后培养液中有几种细胞