比色法测定总皂苷含量
1、仪器
紫外分光光度计、电热恒温水浴锅、电子分析天平、旋转蒸发器、大孔树脂柱(内径0．8 cm，长20 cm)。

试剂
无水甲醇、无水乙醇、正丁醇、冰醋酸、高氯酸和香草醛等均为分析纯；大孔树脂 DM-301、对照品、洋金花药品。

2、方法
2.1 对照品溶液的制备
取对照品 10 mg,加甲醇溶解定容至 10 ml，制成 1 mg／ml对照品溶液。

2.2供试品溶液的制备
取药材粉末(过4号筛)约0．2 g，准确称定，置于150 ml具塞锥形瓶中。

精密加入50 ml 甲醇后，准确称重。

浸泡60 min，超声提取30 min，再次称重，补加甲醇至超声前重量。

过滤，精密移取续滤液25 ml于蒸发皿中，水浴蒸发至干，用5 ml水溶解残留物，所得溶液缓缓通过已处理好的大孔吸附树脂柱(径高比1：5)，以水50 ml洗脱，弃去水液，之后再以50 ml 95％乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，蒸干。

用20 ml水分次将残留物溶解转移至60 ml分液漏斗中，用水饱和的正丁醇萃取(4×20 ml)，合并正丁醇层，减压蒸干。

残留物用70％甲醇溶解转移至10 ml量瓶中，定容，摇匀，即得。

2．3测定波长的选择
精密移取1．5 ml的对照品及l ml供试品溶液，于70℃水浴蒸发至干，加入5％香草醛一冰醋酸(临用新配)0．2ml，高氯酸0．8 ml，于60℃水浴显色15 min后流水冷却 lO min。

加冰醋酸5 ml，摇匀。

立即在紫外分光光度计于400～800 nm波长下扫描，同时空白溶液作参比。

对照品及供试品的最大吸收波长均在475 nm，故选取475 nm为检测波长。

2．4线性关系考察
精密量取对照品溶液0．60，1．50，2．40，3．30，4．20 ml，置具塞试管中，于70℃水浴蒸发至干，加入5％香草醛-冰醋酸(临用新配)O．2 ml，高氯酸0．8 ml，于60℃水浴显色15min后流水冷却10 min。

各加冰醋酸5 ml，摇匀，以同法平行处理的空白溶剂为空白，在475 nm处测定吸光度。

以对照品质量c(mg)为横坐标，吸光度A为纵坐标，使用软件OriginPro 7．0进行回归分析，得到回归方程为：A=0．007 4+1．120 83c, r=0．999 97。

在0．096—0．672 mg内线性关系良好。

2．5精密度试验
精密吸取对照品溶液1．5 ml，依“2．4”项下方法显色测定吸收度，连续测定5次，结果RSD为0．254％，说明仪器的测试性能良好。

2．6稳定性试验
取对照品和样品溶液，依“2．4”项下方法操作，按不同时间测定吸光度，结果见表1。

2．7样品含量测定
取供试品溶液6份，每份精密吸取80 μ L，按“2．3”项的方法显色后，在540nm测定吸光度，计算样品含量。

2．8加样回收率试验
取供试品溶液8份，每份精密吸取80μL，加入0．2mg／mL齐墩果酸溶液50 u I。

，按“2．3”项的方法显色后，在540hm测定吸光度，计算加样回收率。