HPLC法测定阿莫西林胶囊中阿莫西林的含量
【摘要】阿莫西林又名安莫西林或安默西林，分子式为C16H19N3O5S，是一种最常用的青霉素类广谱β-内酰胺类抗生素。
固定相为：依利特hypersil BDSC18色谱柱（4.6*250*5u ），乙腈-甲醇-0.1mol/L的磷酸二氢钾溶液-冰醋酸（10∶10：80：0.1）为流动相，检测波长为254nm；阿莫西林在100～350μg·mL-1范围内呈良好的线性关系。
阿莫西林的平均回收率为99.5%。
本法简便、重现性好、回收率高，可用于阿莫西林胶囊中阿莫西林的含量测定。
【关键词】阿莫西林胶囊；阿莫西林；测定
阿莫西林又名安莫西林或安默西林，分子式为C16H19N3O5S，是一种最常用的青霉素类广谱β-内酰胺类抗生素。
阿莫西林杀菌作用强，穿透细胞壁的能力也强，是目前应用较为广泛的口服青霉素之一。
阿莫西林适用于溶血链球菌、肺炎链球菌、葡萄球菌或流感嗜血杆菌所致中耳炎、鼻窦炎、咽炎、扁桃体炎等上呼吸道感染、溶血链球菌、葡萄球菌或大肠埃希菌所致的皮肤软组织感染、急性单纯性淋病、溶血链球菌或葡萄球菌或流感嗜血杆菌所致急性支气管炎、治疗伤寒、伤寒带菌者及钩端螺旋体病等。
本文用高效液相法对阿莫西林胶囊中的阿莫西林的进行了含量测定。
1.仪器与试药
KHW-D-1LC精密拉伸水浴锅（上海科恒实业发展有限公司）；UPLC 超高效液相色谱系统（沃特世科技（上海）有限公司）；R-1001-VN旋转蒸发仪（郑州长城科工贸有限公司）TU-1901 双光束紫外可见分光光度计（北京普析通用仪器有限责任公司）；QT3120K脱气可调型超声波清洗器（天津市瑞普电子仪器公司）；TGL-18C高速台式离心机（上海楚柏实验室设备有限公司）；XYG-H帕恩特痕量分析级超纯水机（北京湘顺源科技有限公司）；DOA-P504-BN无油隔膜真空泵（上海洽姆仪器科技有限公司）；瑞士梅特勒-托利多MS精密天平（梅特勒-托利多中国公司）。
甲醇（深圳市中原化工科技有限公司）、冰乙酸（衡阳市迅源化学试剂有限公司）、乙腈（盖州市鹏圣化工有限公司）、磷酸（南京盛庆和化工有限公司）、醋酸（山东高密高源化工有限公司）、磷酸二氢铵（深圳市中原化工科技有限公司）、盐酸（深圳市中原化工科技有限公司）。
2.含量测定
2.1色谱条件
依据查阅文献及考查的结果，确定色谱条件如下[1-11]。
色谱柱为依利特hypersil BDSC18色谱柱（4.6*250*5u ）；乙腈-甲醇-0.1mol/L的磷酸二氢钾溶液-冰醋酸（10∶10：80：0.1）为流动相；检测波长为254nm；流速1.0mL·min-1；柱温：30℃。
理论板数按阿莫西林峰计算应不得低于2000。
2.2供试品溶液的制备
取阿莫西林胶囊内容物适量，研细，精密称定至容量瓶内，加流动相适量超声溶解，放凉，流动相定容，过0.45μm的滤膜，即得。
2.3对照品溶液的制备
精密称取阿莫西林对照品约5mg，置5毫升棕色容量瓶中，用流动相超声波振荡溶解并稀释至刻度，摇匀，精密吸取1毫升，置10毫升棕色容量瓶中，用流动相超声波振荡溶解并稀释至刻度，摇匀，即得（每1mL溶液中含阿莫西林0.1mg）。
2.4阴性干扰试验
按方中比例取阿莫西林胶囊辅料，按照制备工艺方法制成阴性制剂，按2.3项下方法制成供试品溶液，按色谱条件测定。
结果表明：在选定条件下测得的阴性液吸收曲线在与阿莫西林相同保留时间处不存在吸收峰，说明此方法具有较强的专属性。
2.5标准曲线的制备
制备浓度为100、150、200、250、300、350μg·mL-1的对照品溶液，分别精密吸取10μL注入HPLC，记录色谱图。
以峰面积积分值A（μg）为横坐标，进样量为纵坐标，绘制标准曲线，计算回归方程。
试验表明，阿莫西林对照品在100～350μg·mL-1范围内线性关系良好。
2.6精密度试验
精密吸取阿莫西林对照品溶液10μL重复进样6次，测定峰面积积分值，对照品峰面积积分值的RSD为0.43%。
结果表明，本实验精密度良好。
2.7重现性试验
分别称取同批阿莫西林胶囊样品6份，分别制备成供试品，按色谱条件测定含量，并计算样品的RSD值为0.55%，结果表明，此含量测定方法的重现性良好。
2.8稳定性试验
取供试品溶液，分别在0，1，2，3，4h精密吸取供试品溶液注入液相色谱仪，进样测定，供试品阿莫西林峰面积积分值的RSD为0.53%。
结果表明阿莫西林至少在4h内稳定。
2.9回收率试验
采用加样回收试验，取已知含量的同一批供试品各6份，精密称定，分精密添加一定量的阿莫西林对照品，按供试品制备所述方法制备供试品溶液，测定含量（同时测定样品含量），计算回收率。
6次测定的平均回收率为99.5%，RSD 为0.69%。
2.10样品含量测定
依照上述含量测定方法，测定阿莫西林胶囊三批样品中阿莫西林的含量，结果三批样品的含量分别为标示量的100.2%、99.3%、99.8%。
3.讨论
分别考察乙腈-甲醇-0.1mol/L的磷酸二氢钾溶液-冰醋酸（10∶10：80：0.1），乙腈-甲醇-0.1mol/L的磷酸二氢钾溶液-冰醋酸（10∶20：70：0.1），甲醇-乙腈-水-冰醋酸（10：10：80：0.01），磷酸盐缓冲液（pH值6.0）-乙腈（80：20），0.2mol/L磷酸二氢铵溶液-乙腈-甲醇（60：25：15），甲醇-水-三乙胺（18∶85：0.1），磷酸二氢钾溶液-甲醇-冰醋酸（85：15：0.1）不同比例的流动相，结果以乙腈-甲醇-0.1mol/L的磷酸二氢钾溶液-冰醋酸（10∶10：80：0.1）为流动相，供试品各峰分离效果最好，故选用乙腈-甲醇-0.1mol/L的磷酸二氢钾溶液-冰醋酸（10∶10：80：0.1）为流动相。
本实验方法是一种简便、准确、安全的测定阿莫西林胶囊含量的方法。
阿莫西林胶囊中阿莫西林的含量为标示量的95-105%。
[科]
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