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植物学实验的基本研究方法


3)低倍镜观察(双眼同睁) (1)调节粗准焦螺旋下降载物台使物像清晰。 (2)调节细准焦螺旋(前后半圈)。 (3)观察部位于视野中央。 (4)左眼观察,右眼画图。
4)高倍镜观察
(1)侧面观察转换到高倍物镜(不跨油镜) (2)调节光源亮度旋钮 (3)调细准焦螺旋 (4)使观察物在中央,画图
5)更换载玻片 (1)载物台降到最低。 (2)转换到最低物镜。 (3)换新载玻片。 (4)低倍镜观察。
2. 了解光学显微镜的基本结构和工作原理,并 掌握其使用方法。
3. 了解常用的植物制片技术。 4. 掌握生物绘图的基本方法。
二、实验仪器 光学显微镜、刀片、镊子、解剖针、载玻片、盖 玻片、培养皿、滴管、蒸馏水
三、实验材料 洋葱鳞叶、洋葱表皮细胞永久封片
四、实验内容 (一)光学显微镜的结构和使用
1. 光学显微镜的结构
植物学实验的基 本研究方法
课程性质:园艺专业必修课 学分:2分 (实验)总学时:3×18=54学时 教材:《植物学实验指导》,2012年3月 参考书: 1、王全喜,张小平主编,《植物学》,北京:科学出版社,2004年9月 2、赵遵田,苗明升主编,《植物学实验教程》,北京:科学出版社,2004年 3、叶创兴,冯虎元主编,《植物学实验指导》,北京:清华大学出版社,2006 4、贺学礼主编,《植物学实验实习指导》,北京:高等教育出版社,2004年 上课要求: 实验前必须做好实验预习工作,认真实验并写出实验报告 考核方式:闭卷 总评成绩=期末考试成绩(70%)+ 平时成绩(30%)
2. 光学显微镜的使用方法
1)安置 (1)右手拿镜臂,左手托镜座;偏左侧放在距桌边 3—4厘米。 (2)插电源,开电源开关。 (3)旋转物镜转换器,低倍镜就位。 (4)虹彩光圈调到最大,聚光器转到最高,适当调节 光源亮度调节器。
2)标本放置
(1)放载玻片。 (2)从左侧观察移动载物台调节轮,使观察物于光束中央 (3)双手调节粗准焦螺旋使载物台升至最高。 (4)调节目镜间距。
反光镜/集光器: 简单光学显微镜,依靠反光镜反射自然光或灯光来提供光源; 高级光学显微镜,自身配备集光器,内有电光源,可通过调节电流的强弱来 调节光线的强弱。
遮光器/聚光器: 简单光学显微镜,遮光器上面有大小不等的圆孔(光圈)。 高级光学显微镜,可通过调节聚光器内孔径光阑的大小来调节光线的强弱。 若将孔径光圈放大,图像亮度增高,分辨率增加,而反差减小; 若将孔径光圈缩小,图像亮度降低,分辨率下降,但反差增大。 因此,在观察时要调节聚光器孔径光圈以达到适当的反差和良好的分辨率。
切割时用臂力带动刀片自左前方向右后方做水平切割移 动,割下许多切片后,将切下的薄片轻轻移入盛水的培 养皿中,从中挑选薄而透明的切片,放在载玻片的水滴 中,加盖玻片观察。
(3)压片法
将植物的幼嫩器官处理后,涂抹或压在载玻片 上,使组织成一薄层然后进行观察的制片方法。 常用于染色体数目的检查。
材料置于水滴上,并使材料展开或分散均匀;
③ 盖上盖玻片:用镊子夹住盖玻片的一边,另一边与水滴的边 缘接触,慢慢放下盖玻片,避免混入气泡。如盖玻片下水过多, 可用吸水纸吸掉多余的水。
练习:撕取洋葱鳞叶的内表皮制作临时水封片。
洋葱表皮
细胞壁 细胞核 液泡
细胞质
(2)徒手切片法
用左手的拇指和食指捏住材料,材料略高出指尖,以免 切时伤及手指。右手握住双面刀片。材料和刀片浸润清 水,以减少摩擦。
遵守实验室的规章制度;借用的实验仪器在实验结束后清点归还。
4. 实验前需进行认真准备,明确实验目的,掌握实验的基本原理、实验方 法、操作步骤等,了解有关仪器设备的配置、性能,熟悉操作规程及安 全注意事项。发现设备故障或其它异常情况时应立即采取应急措施并及 时报告。
5. 科学实验中应规范操作、细致观察、如实记录并及时整理实验结果,完 成实验报告。
6. 爱护节约实验材料,不得损坏永久装片,不将实验材料随意丢弃。 7. 实验结束后将物品归还原处,打扫室内卫生,废弃物倒入指定地点,注
意关闭仪器设备、关闭电源、关水、关门窗。
实验一 植物学实验的基本研究方法
一、实验目的
1. 培养学生掌握植物学研究的基本方法、养成 良好的实验习惯、打下良好的实验基础。
眼距调节装置 机 镜筒
物镜转换器 械
镜臂 系 载物台
统 调焦螺旋
推进器 镜座
目镜 视度调节圈

物镜 学
系 聚光器
统 集光镜
目镜 眼距调节装置
物镜转换器 物镜
聚光器 推进器
集光镜
ห้องสมุดไป่ตู้视度调节圈
载物台 调焦螺旋 光源亮度调节钮
物 镜:通常有4倍(4×)、10倍 (10×)、20倍(20×)、40倍 (40×)和100倍(100×,油镜)
6)用后处理 (1)关闭电源,拔掉插座。 (2)载物台降到最低。 (3)取下载玻片。 (4)4倍和10倍物镜靠内呈“八”字放置。 (5)电线缠2圈半。
(二)常用的植物制片技术
(1)临时水封片
① 准备好载玻片、盖玻片,擦拭时小心,以免弄碎玻片 ② 用滴管在载玻片的中央滴一滴蒸馏水,用镊子或解剖针取植物
期末考试=实验操作内容(50%) + 实验理论内容(50%) 平时成绩=实验报告+实验操作考查+出勤率
植物实验室的要求:
1. 实验室是进行科学实验、培养严谨求实作风、启发思维创新的场所,必 须持严肃科学的态度。
2. 实验室必须保持清洁,仪器设备要摆放整齐、安全规范。 3. 凡进入实验室工作学习的人员必须着装整洁,服从本室工作人员的管理,
步骤 : 取材、预处理、固定、解离、染色、压 片、镜检和封固。
(4)石蜡切片法
将材料包埋在石蜡中进行切片,切片经染 色(番红-固绿二重对染法:番红为碱性染 料,能使细胞核及木质化的细胞壁染成红 色;固绿为酸性染料,能使细胞质及纤维 素的细胞壁染成绿色),观察效果很好。
物镜数字:表示镜头的主要性能 参数
“40”:放大倍数
“0.65”:镜口率(或称数值孔径, 数值越大分辨率越高)
“160”:镜筒长度(mm)
“0.17”:盖玻片厚度(mm)
物镜的工作距离 :从物镜组最前面一块透镜的 表面到被观察标本的距离。
4×、10×、40×和100×物镜的工作距离分别为 34.7、7.634、0.53和0.198毫米。 调焦时要特别小心,以免碰坏镜头或损坏标本。
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