标准菌株使用标准操作规程
1 检验目的
对实验室的标准菌株进行合理的保存,并规范合理的使用流程,保证菌株的性能稳定可靠。
2 范围
微生物实验室保存的标准菌株。
3 职责
微生物组工作人员正确执行本操作规程。
4 术语和定义
其特征进行了分类和描述,有明确的来源。
ATCC(American Type Culture Collection)美国标准菌株收藏中心。
标准菌株经过一代转接后获得的同种菌株。
标准储备菌株传代后得到的同种菌株。
标准菌株、标准储备菌株、工作菌株的统称。
ATCC最佳,但当无法获得时可以使用ATCC演化的菌株或我国国家菌种库储存的标准菌株。
特殊情况,例如定性试验可用已知的菌种作为质控菌株。
室间质评的菌株即可。
5 保存程序
用1ml无菌的小牛血清或营养肉汤溶解。
根据菌种的生长特点,接种到新鲜培养基上选择适宜的培养条件培养18-24h。
酵母菌要求3天,形成孢子的微生物宜保存孢子。
成分有蛋白胨、牛肉浸出粉、氯化钠、甘油、纯化木。
相当于20%的甘油。
挑取5环菌落加入到1ml甘油肉汤中混匀。
苛养菌可以适当增加菌量。
-80℃保存。
除链球菌和嗜血杆菌以外细菌均可使用。
保存期限1-5年。
成分为脱纤维羊血。
挑取5环菌落加入到1ml甘油肉汤中混匀。
苛养菌可以适当增加菌量。
-80℃保存。
主要用于保存链球菌、嗜血杆菌及厌氧菌。
保存期限1-5年。
由标准储备菌株传代得到的菌株。
标准储备菌株对多向下传三代。
过多的传种会增加变异的机会。
标准储备菌株根据菌种特点选择适宜的培养基和培养条件进行培养18-24h即工作标准菌株。
储存在
2-8℃,可放四周。
个别营养要求高的为2周,例如肺炎链球菌和嗜血杆菌。
使用时应编号并登记。
每个菌的保存管都要有唯一的编号,签字笔标注,便于查找和管理。
菌种应有严格的登记。
每个编号都要有详细的记录包括来源、传代、保存方法、使用记录、使用原因、高压灭菌记录等。
附表《标准菌株记录表》《标准储备菌株记录表》
菌种保管应有专人负责,保存于专用冰箱中,双人双锁,确保菌种安全。
保管人员变动时,必须严格交接手续。
各种菌种应按规定时间接种,注意菌种有无污染及变异,如发现变异时,应及时更换
6 使用流程
1代。