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基因操作技术分章节作业题

项目1
一、名词解释
基因、操纵子、外显子、内含子、启动子、增强子、终止子、SD序列、半保留复制、复制、转录、翻译、遗传密码
二、问答题
1.简述核酸的定义、分类、组成、结构。

2.核酸有哪些重要的理化性质?这些性质在基因操作中有什么作用?
3.比较病毒基因组、原核生物基因组、真核生物基因组的特点。

4.简述DNA复制、RNA转录以及蛋白质翻译的过程及其参与的酶和蛋白因子的作用。

5.以大肠杆菌乳糖操纵子为例说明原核生物基因表达调控的特点。

项目2
一、名词解释
基因工程、基因操作技术、基因克隆、基因文库
二、问答题
1.基因操作的基本步骤是怎样的?每一步骤各需要哪些物质参与?
2.目的基因克隆的方法有哪些?
项目3
一、名词解释
质粒、电泳
二、问答题
1.简述提取核酸的基本步骤。

2.简述提取质粒DNA的经典方法的步骤及原理。

3.简述提取基因组DNA的经典方法的步骤及原理。

4.结合实验比较经典碱裂解法与试剂盒法提取质粒DNA的差异。

5.结合实训简述试剂盒法所加试剂的作用?
6.简述测定核酸浓度和纯度的方法原理及步骤。

7.简述琼脂糖凝胶电泳分离DNA的原理、操作步骤、影响因素
8.结合DNA琼脂糖凝胶电泳实训简述所用试剂的作用。

9.简述SDS-PAGE电泳分离蛋白质的原理及操作步骤
项目4
一、名词解释
PCR、变性、变性温度、退火、退火温度、延伸、延伸温度、载体、质粒载体、λ噬菌体载体、病毒载体、克隆载体、表达载体、多克隆位点(MCS)限制性内切酶、回文结构
二、问答题
1.简述PCR反应的基本原理
2.简述PCR反应体系的组成和体系中各成分的作用
3.简述PCR的标准反应过程设定那些参数?其中那个参数最为重要,需要在实际工作中优化。

4.简述PCR引物设计的原则。

5. 简述载体的概念、种类。

6.简述作为载体应具备的条件。

7.简述表达载体应该具备的条件
8.简述 噬菌体载体的特点及其类型
9.以PBR322、PUC等载体为例,指出载体上应包括那些结构,各有何作用?
10.比较克隆载体与表达载体的异同。

12.现在有一质粒载体大小为4200bp,在560处、1800处有两个EcoR I酶切位点,在2300处有1个BamH I酶切位点,在3100处有一个Hind III酶切位点。

试问,用各个酶进行分别进行单酶切时,各会得到几条片段,大小分别为多少?若两两酶进行双酶切时,又分别会得到几条片段,大小分别为多少?
项目5
一、名词解释
黏性末端、平末端、转化、转导、转染、重组子、感受态细胞、宿主细胞
二、问答题
1.简述连接酶的概念和常用类型
2.简述连接反应的影响因素
3.简述DNA重组技术的基本步骤
4.基因转移的方法主要有哪些?
5.结合实训简述氯化钙转化法的操作步骤和注意事项有哪些?
6.简述筛选重组子的方法有哪些?举例说明抗药性筛选、营养缺陷型筛选、插入失活筛选、蓝白斑的筛选的原理。

项目6
一、名词解释
诱导表达、诱导剂、包涵体
二、问答题
1.原核表达系统与真核表达系统各有何优缺点?
2.结合发酵课或课外资料举例说明大肠杆菌、酵母等表达系统常用的诱导表达方法及原理。

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