D.酵母菌进行有氧呼吸和无氧呼吸的产物都能用酸性重铬酸钾溶液来鉴定
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解析 答案
5.(2018·旌阳区校级模拟)以下关于实验步骤的叙述(试剂、药品的浓度和 用量符合要求)，正确的是 A.鉴定蛋白质：豆浆→CuSO4溶液→NaOH溶液→观察颜色变化 B.鉴定还原糖：苹果匀浆→CuSO4溶液→NaOH溶液→水浴加热→观察颜
解析 答案
3.(2018·保定期末)只有在保持细胞活性的条件下，才能显示细胞中某物 质或结构的实验是 A.苏丹Ⅲ染色观察花生种子子叶细胞中的脂肪
√B.健那绿染色观察动物细胞的线粒体
C.龙胆紫染色观察洋葱根尖分生区细胞的有丝分裂 D.用甲基绿、吡罗红染液染色观察动物细胞中的DNA和RNA的分布
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D.用洋葱根尖作为实验材料，观察染色体数目发生改变的细胞
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解析 答案
2.(2018·榆林一模)下列用显微镜观察的实验中，细胞不需要染色的是 A.观察DNA和RNA在口腔上皮细胞中的分布 B.观察口腔上皮细胞中的线粒体 C.观察洋葱根尖细胞的有丝分裂
√D.观察洋葱表皮细胞的质壁分离与复原
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观察细胞的 减数分裂 低温诱导染 色体加倍
观察细胞的 有丝分裂
死细胞 死细胞 死细胞
染色体
无(为固定 装片)
蝗虫精母细胞
改良苯酚
品红染液
龙胆紫溶 液(或醋酸 洋红液)
洋葱根 尖分生 区细胞
染色前需漂 洗干净
用显微镜观 察多种多样 的细胞
活或死 细胞
细胞
酵母菌细胞、水绵细胞、叶 的保卫细胞、鱼的红细胞等
色变化
√C.提取绿叶中的色素：剪碎绿叶→SiO2＋CaCO3→无水乙醇→研磨→过滤
D.观察DNA和RNA在细胞中的分布：制片→解离→漂洗→染色→显微镜 观察
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解析 答案
6.(2017·石家庄期末)现提供可配制斐林试剂的溶液：甲液(0.1 g·mL－1的
NaOH溶液)、乙液(0.05 g·mL－1的CuSO4溶液)以及蒸馏水，如果充分利 用上述试剂及必需的实验用具，可灵活性地鉴别出下列哪些物质
分；碳酸钙可防
分离液：层 ③叶绿素a：蓝绿色； (如菠菜叶)
止在研磨中色素
析液
④叶绿素b：黄绿色
被破坏
DNA的粗提 二苯胺试剂
取和鉴定
蓝色
鸡血细胞等 沸水浴加热5 min
3.关注洋葱在实验中的“一材多用”
取材部位
实验名称
植物细胞的质壁分离和复原
取材原因 外表皮细胞含紫色大液泡
使用高倍显微镜观察细胞的 鳞片叶 多样性 叶
变化
裂生长，诱导染色体变异率较高
4.辨析有关颜色反应类实验的五种颜色
颜色
原理
①还原糖＋斐林试剂 ―水――浴―加――热→ 砖红色沉淀
红 ②脂肪＋苏丹Ⅳ染液→红色 ③RNA＋吡罗红溶液→红色
④染色体(质)＋醋酸洋红液→红色
①脂肪＋苏丹Ⅲ染液→橘黄色 黄 ②叶绿体中色素分离的滤纸条中：胡萝卜素→橙黄色，叶黄素→
2.鉴定类实验的操作流程模板
1.观察类实验
核心点拨
实验名称 细胞的状态 观察对象 染色剂 生物材料(及特殊要求)
观察DNA 和RNA在 细胞中的 分布
观察线粒体
死细胞 活细胞
DNA和
吡罗红甲基
人的
RNA的分布 绿染色剂
口腔
上皮
细胞 线粒体 健那绿染液
DNA、RNA同时 存在时染色剂要 混合使用且现配 现用 用生理盐水配制 健那绿染液，用 显微镜观察
解析 答案
题组二 鉴定提取类实验 4.(2018·广东模拟)下列有关组织细胞中化合物鉴定实验的叙述，正确的是
√A.蛋白酶和蛋白质的混合溶液中加入双缩脲试剂后，会产生紫色反应
B.将斐林试剂加入果糖溶液中后，溶液呈现无色，水浴加热后有砖红色沉 淀生成
C.观察DNA与RNA在细胞中分布的实验中，用盐酸处理有利于DNA与吡 罗红结合
浴加热
脂肪的鉴定
苏丹Ⅲ 橘黄(或红)色
(或Ⅳ)染液
花生种子切片 (或匀浆)
需用高倍镜观 察(匀浆不需用 高倍镜观察)
蛋白质 双缩脲试剂
的鉴定
紫色
豆浆、稀 先加A液，后加B 蛋清等 液，摇匀使用
绿叶中色 素的提取 和分离
加入二氧化硅是
提取液：无 ①胡萝卜素：橙黄色；
为了研磨得更充
水乙醇； ②叶黄素：黄色； 新鲜的绿叶
8%
中DNA与蛋白质分离
的分布
观察细胞的有丝分裂；低
15%
解离
温诱导染色体加倍
0.1 g/mL 斐林试剂、双缩脲试剂的成分 检测还原糖、蛋白质
NaOH
5% 0.1%
营造碱性环境 遇酚酞呈紫红色
探究pH对酶活性的影响 探究细胞表面积与体积的 关系
0.05 g/mL CuSO4
0.01 g/mL
斐林试剂的成分 双缩脲试剂的成分
①葡萄糖 ②蔗糖 ③胃蛋白酶 ④RNA
A.只有①
B.①和②
√C.①和③
D.②、③和④
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解析 答案
题组特训
题组一 观察类实验
1.(2018·滨海新区模拟)洋葱是常用的生物学实验材料。下列有关实验中 不能达到预期目的的是 A.用洋葱鳞片叶内表皮作实验材料，观察DNA、RNA在细胞中的分布 B.用紫色洋葱鳞片叶外表皮作为实验材料，观察植物细胞的质壁分离
√C.用紫色洋葱鳞片叶外表皮作为实验材料，观察细胞中的线粒体
细胞较大，外表皮细胞有大 液泡，内表皮细胞有明显的 细胞核
观察DNA和RNA在细胞中的 分布 管状叶 叶绿体中色素的提取和分离
内表皮细胞近于无色
观察根尖分生组织Biblioteka 胞的有 材料易得，且分生区细胞分裂能力强，
丝分裂
染色体数目少，易于观察
根
低温诱导植物染色体数目的 材料易得，且低温(4 ℃)下根尖也能分
第一篇 专题十二 教材基础实验
考点33 观察类实验和鉴定提取类实验
直击考纲 能独立完成“生物知识内容表”所列的生物实验，包括理解实验目的、 原理、方法和操作步骤，掌握相关的操作技能，并能将这些实验涉及的 方法和技能进行综合运用。
栏目 索引
静悟提纲 核心点拨 题组特训
静悟提纲
1.观察类实验操作流程模板
(9)脂肪的鉴定是否一定要借助显微镜？ 提示 不一定，因为脂肪的鉴定有两个方案，可磨碎后在试管内鉴定， 肉眼观察即可，也可做切片借助显微镜观察。 (10)绿叶中色素的提取和分离有何区别？ 提示 前者用无水乙醇提取法，原理是色素能够溶于有机溶剂无水乙醇 中；而后者用纸层析法，原理是色素在层析液中的溶解度不同，溶解度 高的色素随层析液在滤纸条上扩散得快，反之扩散得慢。
黄色
①DNA＋甲基绿染液→绿色 ②线粒体＋健那绿染液→蓝绿色 绿 ③酒精＋橙色的重铬酸钾溶液―在――酸――性→灰绿色
条件下 ④叶绿体中色素分离的滤纸条中：叶绿素b→黄绿色，叶绿素a→ 蓝绿色
①淀粉＋碘液→蓝色 蓝 ②DNA＋二苯胺试剂 ―水――浴―加――热→ 蓝色
①染色体(质)＋龙胆紫溶液→紫色 紫
(7)为什么应选取成熟的植物细胞观察质壁分离与复原实验？ 提示 因其含有中央大液泡，易于发生质壁分离与复原的实验现象。 (8)斐林试剂能否用于蛋白质的鉴定？为什么？ 提示 不能，因为用于蛋白质鉴定的双缩脲试剂B液是0.01 g/mL的CuSO4 溶液，两种试剂的本质不同。斐林试剂的本质是新制的Cu(OH)2，故应将 甲液和乙液等量混匀后使用，而双缩脲试剂的本质是碱性条件下的Cu2＋， 故应先加A液1 mL造成碱性环境，再加B液4滴摇匀使用。
②蛋白质＋双缩脲试剂→紫色
5.常用试剂的种类及作用
试剂 体积分数或质量浓度 作用原理
相关实验
50%
洗去浮色(溶剂)
脂肪的鉴定
70%
酒精
95%
消毒 解离
微生物的培养 观察细胞的有丝分裂； 低温诱导染色体加倍
100%
叶绿体色素的提取和 溶解、提取色素
分离
5%
营造酸性环境
探究pH对酶活性的影响
盐酸
改变细胞膜通透性，使染色质 观察DNA和RNA在细胞中
检测还原糖 检测蛋白质
6.常见疑难辨析 (1)在观察类实验中低倍镜和高倍镜的使用情况如何？除观察类实验外， 还有什么实验中也用到了显微镜呢？ 提示 观察类实验中除了“观察植物细胞的质壁分离和复原”使用低倍 镜即可外，其余均需要使用高倍显微镜；还有“脂肪的切片法定”“探 究培养液中酵母菌种群数量的动态变化”也用到了显微镜。
观察叶绿体
观察植物细 胞的质壁分 离与复原
活细胞 活细胞
叶绿体 无(无需 藓类的叶(或菠菜叶、黑藻叶)
紫色中央液 染色)
泡的大小和 原生质层的
紫色洋葱鳞片叶外表皮细胞
位置
2.鉴定提取类实验
实验名称 淀粉的鉴定
试剂 碘液
还原糖的鉴定 斐林试剂
颜色
生物材料
备注
蓝色
若材料有颜色， 脱色的叶片等
需先脱色
现配现用、水 砖红色沉淀 苹果或梨匀浆等
(2)“观察DNA和RNA在细胞中的分布”实验中能否选用哺乳动物的成熟 红细胞？为什么？ 提示 不能。因为哺乳动物的成熟红细胞中无细胞核和众多细胞器，几 乎不含有DNA和RNA。 (3)能否用观察叶绿体的材料来观察线粒体？为什么？ 提示 不能。因为叶绿体中的色素的颜色会掩盖线粒体被健那绿染色后 的颜色变化。
(4)在“观察细胞的有丝分裂”实验中为什么应注意观察呈正方形的根尖 分生区细胞？ 提示 呈正方形的根尖分生区细胞分裂旺盛，而呈长方形的细胞可能是 伸长区或成熟区的细胞，没有分裂能力。 (5)在观察减数分裂实验中为什么不宜选择动物的卵巢或植物的雌蕊？ 提示 因为雄配子的产生数量远远多于雌配子，更易观察到减数分裂。 (6)选用菠菜叶观察叶绿体时，为什么要取稍带些叶肉细胞的下表皮？ 提示 因为靠近下表皮的叶肉细胞中的叶绿体较大而数目较少。